干细胞与外泌体

三种不同来源卵巢颗粒细胞外泌体的提取及鉴定

• 图1｜人卵巢颗粒细胞苏木精-伊红染色(×20)

  

  结果：SVOG细胞、KGN细胞形态呈上皮细胞样，形态相似，呈长梭形、多边形等不规则形态，细胞之间以各自延伸的伪足相互交织连接，细胞核呈圆形或椭圆形，核仁蓝染，胞浆呈淡红色，细胞形态结构完整。原代人卵巢颗粒细胞呈成纤维细胞样，细胞贴壁良好，生长旺盛，细胞伪足细长，相互交织紧密连接，细胞核大，呈圆形，胞质颗粒均匀分布。见图1。

  
  

  图2｜人卵巢颗粒细胞FSHR免疫组化染色(×20)

  

  结果：人卵巢颗粒细胞的FSHR特异性染色定位在细胞浆，呈绿色，细胞核呈蓝色。在荧光显微镜下观察，3种不同来源细胞的FSHR 阳性率> 95%，颗粒细胞纯度达到95%，可以用于下一步实验研究。见图2。

  
  

  图3｜SVOG细胞、KGN细胞、原代人卵巢颗粒细胞来源外泌体形态特征(标尺=100 nm)

  

  结果：3种不同来源卵巢颗粒细胞的外泌体形态一致，呈双层膜状结构、杯样形态，符合文献报道的外泌体结构特征，镜下可见原代人卵巢颗粒细胞外囊泡聚集性分泌，见图3。

  
  

  图5｜SVOG细胞、KGN细胞、原代人卵巢颗粒细胞来源外泌体特异性蛋白表达

  

  结果：蛋白印迹法检测外泌体特异性蛋白，结果显示，3种不同来源卵巢颗粒细胞的外泌体中CD63、TSG101均呈阳性表达，Calnexin呈阴性表达，KGN细胞及原代人卵巢颗粒细胞来源外泌体中CD63蛋白出现非唯一性条带，见图5。

  
  

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发布日期： 2022-08-05  浏览： 1071