骨髓干细胞
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图3｜四氧化三锰(Mn3O4)纳米颗粒的生物相容性
结果：为保证纳米颗粒能够安全的用于间充质干细胞，使用CCK-8实验检测了不同质量浓度Mn3O4纳米颗粒(0，12.5，25，50，100 mg/L)对细胞活力的影响，见表1，图3A，该材料在质量浓度为50 mg/L以内对细胞活力无明显影响，并且无统计学差异，在100 mg/L时细胞活力降低(P < 0.05)。由于该材料为棕色颗粒，可能会导致CCK-8吸光度值结果误差，参考细胞活力检测结果，使用了小于50 mg/L的不同梯度的质量浓度(0，5，10，20，40 mg/L)对材料的细胞毒性进行进一步检测。活-死染色结果显示，荧光成像中未见明显死细胞，并且细胞计数结果表明各组间细胞数量无明显差异，见图3B，C，证明该纳米材料在40 mg/L范围内不会导致明显的细胞死亡。
图4｜四氧化三锰(Mn3O4)纳米颗粒的细胞内活性氧清除能力
结果：使用H2O2诱导细胞氧化应激，即在培养基中加入100 μmol/L H2O2，并将细胞分为对照组(不处理)，H2O2组(100 μmol/L H2O2)，材料组(40 mg/L Mn3O4纳米颗粒)，H2O2+材料组(100 μmol/L H2O2+40 mg/L Mn3O4纳米颗粒)。由荧光图片可以看出，单纯H2O2处理组有大量的荧光产生，说明H2O2成功诱导了细胞内氧化应激发生；H2O2+材料组的细胞检测出一定量的荧光，但是强度相对于H2O2组有明显减低，说明该组活性氧量较H2O2组低，并且从材料组可以看出该材料的加入不会诱导细胞内活性氧的产生，见图4。
图5｜四氧化三锰(Mn3O4)纳米颗粒保护骨髓间充质干细胞的伸展能力
结果：基于纳米颗粒在细胞环境中可观的抗氧化应激作用，该研究使用细胞骨架的免疫荧光染色观察纳米颗粒对细胞伸展功能的保护作用。如图5A所示，H2O2组的细胞面积明显小于其他3组，细胞形态接近于圆形；H2O2+材料组的细胞形态大体与对照组几乎无异。从统计学面积定量分析可知，经纳米材料处理后的细胞面积与对照组无明显差异，见图5B。同时，材料本身并不会引起细胞伸展面积的缩小。
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