脂肪干细胞

改良法原代培养人脂肪间充质干细胞及其鉴定

• 图1｜常规法与改良法提取人脂肪间充质干细胞的形态学特点

  

  结果：倒置显微镜下可见不同方法获取的原代细胞接种后1 d开始贴壁，形态呈卵圆形；2 d后贴壁细胞数量逐渐增加，形态向长梭形过渡；培养3 d左右，贴壁细胞明显增多，且形态逐渐呈长梭形；在第7天左右，细胞融合至90%左右，生长呈一定的规律性，以组织块为中心，不断向周围生长，呈旋涡状，见图1。

  
  

  图5｜改良法培养的人脂肪间充质干细胞成骨诱导2周后碱性磷酸酶染色(×100)

  

  结果：镜下观察见未诱导的人脂肪间充质干细胞镜下形态均一，呈长梭形，当细胞融合至80%-90%时，表现为鱼群样生长，碱性磷酸酶染色胞浆呈淡灰色，碱性磷酸酶活性为阴性，见图5A。诱导后的细胞形态由长梭形变为多角形，逐渐成复层生长，部分区域出现点状钙化斑，且钙化斑随着诱导的时间逐渐增大。诱导2周后行碱性磷酸酶染色，成骨诱导组细胞胞浆呈灰黑色，见图5B。
  

  
  

  图6｜改良法培养的人脂肪间充质干细胞成脂诱导2周后油红O染色

  

  结果：镜下观察发现，成脂诱导 3 d后细胞逐渐由长梭形变为卵圆形、多角形，部分细胞内可见多个小脂滴。诱导2周后油红O染色显示细胞内有大小不一的橘红色脂滴，部分融合成团，大部分细胞胞浆被染成橘红色，见图6。

  
  

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发布日期： 2022-04-25  浏览： 544