脂肪干细胞

    脂肪基质细胞诱导分化为星形胶质细胞过程中Bax/Bcl-2蛋白与细胞凋亡
  • 图1|脂肪基质细胞以及诱导分化为星形胶质细胞过程中的细胞形态特征

    结果:脂肪基质细胞于48 h时可见已完全贴壁,可见细胞呈多种形态,呈类圆形、梭形、不规则形。培养至第7天可见大量长梭形细胞呈漩涡状排列;第10-14天细胞已80%融合,此时可进行细胞传代。应用第3代生长状态良好的脂肪基质细胞进行诱导分化,诱导至48 h时可见细胞呈圆形、多边形、不规则形,细胞周围可见光晕,部分细胞的胞体周围伸出细长突起,并有多个分支,细胞质均匀,细胞核较大,呈卵圆形或圆形,核仁清晰可见;诱导7 d时,可见分化细胞呈现典型的星形胶质细胞形态,细胞体呈圆形或椭圆形,有细长的突起和分支较多,并交织成网状,细胞质均匀,细胞核大,且多偏于细胞体一侧,呈卵圆形或圆形,核仁清晰可见;诱导14 d时,细胞形态与7 d时无明显变化;诱导21 d时,存活的细胞数量明显减少,细胞体呈三角形或不规则形,细胞的突起较诱导14 d时变短、变少,细胞核与诱导14 d时相比无明显变化,见图1。


    图2|脂肪基质细胞诱导为星形胶质细胞过程中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt-C)、Caspase-3 的表达(光学显微镜,×200) 

    结果:胶质纤维酸性蛋白的阳性表达率随诱导时间的延长逐渐升高,在诱导至7 d时达到高峰(P < 0.05),诱导7 d与14 d差异无显著性意义(P > 0.05)。Bcl-2的细胞阳性表达率随诱导时间的延长逐渐降低,至诱导14 d时达到最低(P < 0.05)。Bax、细胞色素C的阳性表达率随诱导时间的延长逐渐升高,诱导至14 d时达到高峰(P < 0.05)。Caspase-3的阳性表达率随诱导时间的延长逐渐升高,诱导至14 d时达到高峰(P < 0.01)。胶质纤维酸性蛋白在诱导48 h及7,14,21 d均可见阳性表达细胞,阳性表达部位主要在细胞体和突起部位。Bcl-2、Bax、细胞色素C、Caspase-3在诱导48 h及7,14,21 d均可见阳性表达细胞,而且阳性表达部位均主要位于细胞核周围的细胞浆,而在突起部位表达不明显,见图2。


    图5|脂肪基质细胞诱导分化为星形胶质细胞第14天时的细胞凋亡和线粒体超微结构变化特征

    结果:脂肪基质细胞诱导分化为星形胶质细胞第14天,在透射电子显微镜下可以见到大量呈圆形或椭圆形的线粒体结构。正常线粒体的基质密度高,嵴排列规整。部分线粒体肿胀,体积变大;还可见部分线粒体嵴断裂,甚至空泡化,线粒体基质密度减低。另外,还可见到凋亡细胞,细胞体积缩小,细胞核呈不规则形,染色质浓缩,呈块状,见图5。


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  • 发布日期: 2022-04-25  浏览: 477