胚胎干细胞

    体外诱导人胎盘来源间充质干细胞向肝细胞分化
  • 图1|人胎盘间充质干细胞的形态特征(倒置相差显微镜,×40)

    结果:培养5 d后,倒置显微镜下可见典型梭形或成纤维细胞样细胞生长,见图1A,培养10 d后可增殖形成集落样,见图1B,有少量漂浮细胞。传代后细胞形态更单一,呈梭形,见图1C,增殖后呈漩涡状生长,传代到第10代,细胞形态未见明显变化,见图1D。


    图3|人胎盘间充质干细胞向成脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞的分化能力(×100)

    结果:经过28 d的成脂诱导培养后,油红O染色可见细胞内有较多红色的脂滴,见图3A;经过28 d的成骨诱导培养后,茜素红染色可见细胞内有较多红色矿化基质沉积,见图3B;经将21 d成软骨诱导培养后,阿辛蓝染色可见细胞显示出蓝色,见图3C,提示细胞表达软骨细胞特异性的Ⅱ型胶原蛋白。结果表明从胎盘组织分离培养的细胞具备向脂肪细胞、成骨细胞和成软骨细胞分化的能力。


    图4|人胎盘间充质干细胞向肝细胞诱导分化的形态变化(×100)

    结果:向肝细胞诱导22 d后,在倒置相差显微镜下可见胎盘间充质干细胞由诱导分化前的成纤维细胞样、梭形细胞,逐渐变成圆形或多角形、细胞界限明显的上皮样细胞,见图4,与体外培养的人肝细胞形态相似。


    图5|人胎盘间充质干细胞向肝细胞诱导分化后肝细胞标志物表达的变化(×200)

    结果:免疫荧光染色结果显示:向肝细胞诱导分化后,成熟肝细胞标志物白蛋白、细胞角蛋白18、HepPar1等阳性表达;生物转化的关键酶类CYP7A1由原来的阴性转为阳性表达,而未诱导分化的胎盘间充质干细胞为阴性,胆管上皮细胞的标志物细胞角蛋白19的表达未见明显变化,提示人胎盘间充质干细胞可以分化为肝细胞,见图5。


    图6|人胎盘间充质干细胞向肝细胞诱导分化后糖原染色(×100)

    结果:人胎盘间充质干细胞向肝细胞诱导分化后糖原染色阳性,而未诱导的胎盘间充质干细胞糖原染色阴性,见图6。


    点击此处查看全文



  • 发布日期: 2022-01-30  浏览: 670