中国组织工程研究

骨髓干细胞

转录因子配对盒基因6对骨髓间充干细胞向角膜缘干细胞样细胞分化的影响

图1｜C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞及过表达配对盒基因6的骨髓间充质干细胞形态

结果：刚接种时细胞呈圆形漂浮于培养基中，24 h后贴壁细胞呈不规则形；1周左右细胞呈集落样生长，形态逐渐变为长梭形或多角形，胞浆丰富，胞核明显，见图1。

图2｜小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化能力(茜素红染色，标尺为100 μm)

结果：成骨诱导25 d后茜素红染色可见大量橘红色矿化结节，见图2。

图3｜小鼠骨髓间充质干细胞的成脂分化能力(油红O染色，标尺为100 μm)

结果：成脂诱导25 d后油红O染色可见红色脂滴，见图3。

图5｜免疫荧光染色鉴定配对盒基因6的表达(标尺为100 μm)

结果：免疫荧光检测配对盒基因6表达：绿色荧光蛋白标记细胞核染成绿色，PE标记的荧光二抗表达配对盒基因6，在过表达配对盒基因6的BM-MSCs的胞核中可见染成红色的荧光颗粒，而正常BM-MSCs的胞核中未见红色荧光，见图5。

图6｜各组骨髓间充质干细胞定向诱导分化5 d的形态变化

结果：诱导第5天倒置显微镜下观察，4组细胞均出现球形或卵圆形的细胞，呈悬浮生长，见图6。

图7｜免疫荧光染色鉴定诱导5，10 d小鼠角膜缘干细胞特异性抗体

结果：诱导第5，10天，4组细胞DAPI标记细胞核染成蓝色，PE标记的荧光二抗表达p63，k14，在对照组及实验组中可见染成红色的荧光颗粒，结果保留了merge图，对各组的阳性细胞平均荧光强度进行分析，实验组C >实验组B >实验组A >对照组；角膜上皮特异性抗体k12呈阴性表达，见图7。

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