干细胞移植

    孟鲁司特联合骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤模型大鼠
  • 图1|不同时间点骨髓间充质干细胞形态(×400)

    结果:倒置相差显微镜下原代细胞呈类圆形,分布欠均匀,第3代BMSCs在培养第7天可见细胞呈梭形聚集,集落大小不一,第14天可见分布更加均匀有序的梭形细胞,见图1。经流式细胞仪测定BMSCs表面特异性标志物CD29、CD34、CD44、CD45的阳性率分别为97.6%,2.4%,92.5%,0.95%。

    图3|脊髓损伤后7 d各组大鼠脊髓组织苏木精-伊红染色和Nissl染色

    结果:大鼠造模成功后,模型组可见脊髓灰质出现大量炎性细胞因子浸润,细胞出血、水肿,神经元坏死、凋亡明显。孟鲁司特组、BMSCs组和联合组的大鼠脊髓组织切片可见出血水肿显著减轻,炎性细胞因子浸润显著减少,神经元溶解、凋亡减轻,其中联合组效果更加显著,见图3A。
    与模型组相比,孟鲁司特组、BMSCs组和联合组运动神经元数量明显增加(P < 0.05)。此外,与孟鲁司特组、BMSCs组相比,联合组运动神经元数量明显增加
    (P < 0.05) ,见图3B,C。

    图4|各组大鼠造模后7 d脊髓组织中胶质纤维酸性蛋白、白细胞介素1β的表达(免疫组织化学染色,×400)

    结果:造模后7 d,孟鲁司特组、BMSCs组、联合组胶质纤维酸性蛋白、白细胞介素1β的表达明显低于模型组(P < 0.05),联合组胶质纤维酸性蛋白、白细胞介素1β表达明显低于孟鲁司特组、BMSCs组(P < 0.05),见图4。脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白、白细胞介素1β表达增多,孟鲁司特组、BMSCs组、联合组均能抑制胶质细胞增生及炎性反应,联合组抑制效果优于孟鲁司特组、BMSCs组。

    图5|BMSCs组和联合组脊髓损伤节段BrdU染色(标尺为100 μm)

    结果:造模后7 d,BMSCs组和联合组脊髓损伤节段可见阳性细胞(细胞核呈棕褐色),BMSCs组BrdU阳性率(6.51±0.82)%显著低于联合组(8.71±0.64)%(P=0.000),表明孟鲁司特有助于提高BMSCs局部移植成活率,促进BMSCs发挥作用,见图5。

    图6|Western blot法检测各组大鼠脊髓组织中凋亡蛋白表达

    结果:造模后7 d,孟鲁司特组、BMSCs组、联合组大鼠Bcl-2的表达较模型组显著增加(P < 0.05),Bax和Caspase-3的表达较模型组显著减少(P < 0.05),联合组治疗效果较孟鲁司特组和BMSCs组更加显著(P < 0.05),见图6。

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  • 发布日期: 2021-04-02  浏览: 1066