大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体的蛋白组学对比分析

doi:10.12307/2025.046

中国组织工程研究 ›› 2025, Vol. 29 ›› Issue (13): 2683-2689.doi: 10.12307/2025.046

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大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体的蛋白组学对比分析

张鑫瑞1，韩悦1，雷蕾1，刘建宇1，耿承奎2

1云南中医药大学第二临床医学院，云南中医药大学呈贡校区，云南省昆明市 650000；2昆明医科大学附属延安医院骨科，云南省昆明市 650000

收稿日期:2024-01-15 接受日期:2024-03-26 出版日期:2025-05-08 发布日期:2024-09-11
通讯作者: 耿承奎，主任医师，硕士研究生导师，昆明医科大学附属延安医院骨科，云南省昆明市 650000
作者简介:张鑫瑞，女，2000年生，云南中医药大学在读硕士，主要从事运动系统疾病中西医结合康复学的实验与临床研究。并列第一作者：韩悦，女，1999年生，云南中医药大学在读硕士，主要从事运动系统疾病中西医结合康复学的实验与临床研究。通讯作者：耿承奎，主任医师，硕士研究生导师，昆明医科大学附属延安医院骨科，云南省昆明市 650000
基金资助:
云南省科技厅科技计划项目(202001AY070001-263)，项目负责人：耿承奎

Comparative proteomic analysis of rat adipose-derived mesenchymal stem cells and their exosomes

Zhang Xinrui1, Han Yue1, Lei Lei1, Liu Jianyu1, Geng Chengkui2

1Second School of Clinical Medicine, Yunnan University of Chinese Medicine, Chenggong Campus of Yunnan University of Chinese Medicine, Kunming 650000, Yunnan Province, China; 2Department of Orthopedics, Yan’an Hospital Affiliated to Kunming Medical University, Kunming 650000, Yunnan Province, China

Received:2024-01-15 Accepted:2024-03-26 Online:2025-05-08 Published:2024-09-11
Contact: Geng Chengkui, Chief physician, Master’s supervisor, Department of Orthopedics, Yan’an Hospital Affiliated to Kunming Medical University, Kunming 650000, Yunnan Province, China
About author:Zhang Xinrui, Master candidate, Second School of Clinical Medicine, Yunnan University of Chinese Medicine, Chenggong Campus of Yunnan University of Chinese Medicine, Kunming 650000, Yunnan Province, China; Han Yue, Master candidate, Second School of Clinical Medicine, Yunnan University of Chinese Medicine, Chenggong Campus of Yunnan University of Chinese Medicine, Kunming 650000, Yunnan Province, China Zhang Xinrui and Han Yue contributed equally to this article.
Supported by:
Science and Technology Plan Project of Yunnan Provincial Department of Science and Technology, No. 202001AY070001-263 (to GCK)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

脂肪间充质干细胞：是来源于中胚层的多能干细胞，可分化为多种功能细胞，与其他干细胞相比具有易于采集、数量多、增殖快、标志物高表达、低免疫原性等优势，近年来受到广泛的关注。
外泌体：是细胞分泌的呈现茶杯状典型结构的纳米级囊泡，含有蛋白质、脂质、细胞因子和核酸等，由磷脂双分子层组成，是疾病诊断、预测和监测的潜在生物标志物。外泌体可参与细胞间信息的通讯和物质的运输，还可以介导药物的递送，具有低细胞毒性、低免疫原性优势，可能成为无细胞疗法的新兴治疗剂。

摘要
背景：从蛋白组学方面分析脂肪间充质干细胞及其来源外泌体促进组织修复的研究较多，但缺少二者之间的蛋白组学对比分析。
目的：对脂肪间充质干细胞及其外泌体进行蛋白组学分析。
方法：分离培养大鼠脂肪间充质干细胞，从细胞上清液中提取外泌体并进行鉴定；运用DIA蛋白组学分析大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体差异表达蛋白，对差异表达蛋白进行GO和KEGG分析。
结果与结论：①脂肪间充质干细胞以长梭形为主，类似成纤维样；②经BCA法测定外泌体悬液的蛋白质量浓度为7.66 mg/mL；③外泌体呈典型的茶杯型，可见双层膜的囊泡结构，中央为低电子密度成分，外泌体粒径分布峰值为112.2 nm，浓度为7.5×1011粒子/mL，平均直径在70-140 nm之间；④外泌体有表面标记蛋白CD9、TSG101高表达；⑤GO分析脂肪间充质干细胞及其外泌体的差异表达蛋白主要集中在细胞外基质和突触等位置，与离子结合和核糖体的结合能力相关，在细胞黏附和翻译过程中最为显著；⑥KEGG通路分析结果显示，差异表达蛋白主要参与细胞外基质受体交互、核糖体和细胞因子受体相互作用等，并且与胆固醇和甲状腺等多种代谢性疾病有关。

https://orcid.org/0009-0006-4083-3308(张鑫瑞)；https://orcid.org/0009-0005-0351-348X(韩悦)；https://orcid.org/0009-0007-6731-9891(耿承奎)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 脂肪间充质干细胞, 外泌体, 蛋白组学, 对比分析, 组织修复

Abstract: BACKGROUND: Research on adipose-derived mesenchymal stem cells and their exosomes often uses proteomics to analyze their roles in tissue repair, but comparative proteomic analyses between the two are scarce.
OBJECTIVE: To analyze adipose-derived mesenchymal stem cells and their exosomes using proteomic analysis.
METHODS: Rat adipose-derived mesenchymal stem cells were isolated, cultured, and identified. Exosomes were then extracted from cell supernatant and identified. Differentially expressed proteins of adipose-derived mesenchymal stem cells and their exosomes were analyzed using DIA proteomics. Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes analyses were performed on these differentially expressed proteins.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) Adipose-derived mesenchymal stem cells displayed a mainly spindle-shaped, fibroblast-like morphology. (2) The exosome suspension protein concentration was 7.66 mg/mL, as determined by the BCA method. (3) Exosomes exhibited a characteristic teacup shape with a visible double-layer membrane vesicle structure. The center presented a low electron density component. The exosomes showed a peak particle size distribution of 112.2 nm, a concentration of 7.5×1011 particles/mL, and an average diameter ranging from 70 to 140 nm. (4) Exosomes expressed high levels of surface marker proteins CD9 and TSG101. (5) Gene Ontology analysis of differentially expressed proteins revealed enrichment in the extracellular matrix and synapses, with functions related to ion binding, ribosome binding, and particularly cell adhesion and translation. (6) Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway analysis indicated that the differentially expressed proteins were primarily involved in extracellular matrix receptor interaction, ribosome, and cytokine receptor interaction, and also associated with various metabolic diseases like cholesterol and thyroid disorders.

Key words: adipose mesenchymal stem cell, exosome, proteomics, comparative analysi, tissue repair

中图分类号:

张鑫瑞, 韩悦, 雷蕾, 刘建宇, 耿承奎. 大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体的蛋白组学对比分析[J]. 中国组织工程研究, 2025, 29(13): 2683-2689.

Zhang Xinrui, Han Yue, Lei Lei, Liu Jianyu, Geng Chengkui. Comparative proteomic analysis of rat adipose-derived mesenchymal stem cells and their exosomes[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2025, 29(13): 2683-2689.

图/表（结果） 6

2.1 大鼠脂肪间充质干细胞形态学特征 采用组织块贴壁法培养2 d左右，可观察到从脂肪组织块周围陆续爬出贴壁的细胞，多为长梭形，还有多角形，培养10 d后待细胞达到80%-90%融合度时进行传代，可见脂肪间充质干细胞类似成纤维样细胞，群落生长，排列紧密，呈漩涡状，见图1。
2.2 大鼠脂肪间充质干细胞表面标记物的表达 第3代脂肪间充质干细胞免疫表型为CD29、CD90阳性表达，CD45阴性表达，见图2，鉴定所培养细胞为大鼠脂肪间充质干细胞。
2.3 外泌体在透射电镜下的形态学特征 在透射电镜下观察到呈茶杯型，可见清晰的双层膜性小囊泡结构，由磷脂双分子层包绕，中央为低电子密度区，边界清晰，囊泡直径约为100 nm，符合文献中外泌体的形态大小，见图3。

2.4 纳米粒度仪检测粒径分布峰值、尺寸及浓度 外泌体粒径分布峰值为112.2 nm，总浓度为7.5×1011粒子/mL，外泌体直径在70-140 nm之间，见图4。

2.5 外泌体法测蛋白含量 经BCA法测定蛋白质量浓度为7.66 mg/mL。
2.6 Western blot 检测外泌体膜蛋白中CD9、TSG101的表达 大鼠脂肪间充质干细胞来源外泌体的表面标记蛋白CD9、TSG101阳性表达，见图5。

2.7 大鼠脂肪间充质干细胞及其来源外泌体的蛋白质组学分析
2.7.1 数据选择 使用Proteome Discoverer 2.4软件对原始数据进行检索。参数设置为酶切方式：胰蛋白酶，最大允许存在2个漏切位点。固定修饰为：氨基甲酰甲基(C)。可变修饰为：M氧化(15.995 Da)；乙酰基(蛋白N-端)。一级质量偏差为：±15 ppm，二级质量偏差为：±0.02 Da。数据库为uniprot大鼠数据库(含有47 943个注释蛋白)。
2.7.2 蛋白组学分析结果 在蛋白定量和功能注释富集分析中，对原始搜库结果中样本的定量值不为空的蛋白进行统计，获取每个样本间蛋白数目，使用Perseus进行补值，填充缺失值数据，差异分析采用Maxquant Siginificance A检验法进行，差异表达蛋白质的选择标准为：表达差异倍数大于1.2倍，且P值 < 0.05。脂肪间充质干细胞及其来源外泌体样本中总蛋白数为3 766种，其中筛选出一致性表达蛋白(差异比< 1.2)为1 605种，细胞中表达的蛋白数为2 123种，外泌体中表达的蛋白数为38种，表明细胞及其来源外泌体在蛋白表达之间存在一定的差异性，见图6。

脂肪间充质干细胞及其来源的外泌体相比，差异表达蛋白为504个，其中上调的蛋白有216个，下调的蛋白有288个。基因本体(gene ontology，GO)条目是描述基因功能、定位和活动的标准词汇表，涉及的词汇分为三大类，包括差异蛋白的细胞组分、分子功能、生物过程3个生物学方面。将脂肪间充质干细胞及其来源外泌体的差异蛋白进一步行GO分析，结果显示，差异表达蛋白在细胞定位上主要集中在细胞外基质、突触和核糖体等位置；在分子功能上主要与钙、锌离子结合活性和核糖体的结合能力等方面密切相关；参加的生物过程主要在细胞外基质组织作用、细胞黏附和翻译过程中最为显著，见图7。

KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)是京都基因与基因组百科全书，其整合了一些经常使用的数据库，把已得到的基因目录与更高级别的细胞、物种和生态系统水平的系统功能关联起来，形成知识库，用以描述相关的信号通路。KEGG通路结果显示，脂肪间充质干细胞和外泌体的差异蛋白主要参与细胞外基质受体交互作用、核糖体作用和细胞因子受体相互作用等信号通路，并且还与胆固醇和甲状腺等多种代谢性疾病有关，见图8。

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引言

间充质干细胞是一类具有高度自我更新、增殖和多向分化潜能的多能干细胞，可以来源于体内多种组织[1]，并能向成软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种类型的细胞分化[2]。间充质干细胞移植治疗疾病是目前的研究热点，脂肪间充质干细胞是其中一类细胞，与其他干细胞相比具有来源广泛、获取方便、低免疫原性等优势[3-5]，在组织修复、再生医学等方面具有广泛的应用前景，并能从实验阶段向临床应用推进[6-7]。随着研究的不断深入，发现脂肪间充质干细胞发挥治疗效果主要是通过强大的旁分泌功能，分泌多种细胞外囊泡，携带多种细胞因子进行细胞之间和细胞与外环境之间的信号交流、物质传递等[8-10]，对损伤部位的修复和再生具有积极作用[11]。
外泌体属于细胞外囊泡中的一个亚群，平均直径为30-150 nm，由双层磷脂分子层包围，富含与其来源细胞相似的蛋白质、部分核酸、细胞因子、脂质、氨基酸等多种生物活性分子[12-14]，参与细胞多条信号通路的调节，还有促进细胞之间和细胞与外部环境之间的交流、促进细胞归巢效应[15]、促进细胞对组织的再生和修复作用[16-17]，为细胞移植治疗各类疾病提供了新思路和实验依据，另有研究指出外泌体可作为疾病诊断和监测的新指标[18-22]。
该实验分离培养大鼠脂肪间充质干细胞及其来源外泌体，从蛋白质层面寻找二者的差异表达蛋白及在治疗中有显著差异的信号通路，探索组织修复再生相关差异表达蛋白的主要功能和参与的不同信号通路，为进一步探讨相关的作用机制奠定基础。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计 细胞学体外实验，多样本间比较采用单因素方差分析，两样本间比较采用t检验。
1.2 时间及地点 实验于2023年3-10月在云南中医药大学完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物 3只4周龄体质量为(80±10) g的SPF级SD雌性大鼠，购于斯贝福(北京)生物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2019-0010，在云南中医药大学实验动物中心饲养，饲养条件：室温22-26 ℃，湿度40%-70%，12 h光/暗循环。
实验方法及过程符合云南中医药大学伦理委员会要求(伦理审批号：R-062022128)。遵循国际公认标准和3R原则(Replace，Reduce，Refine)，尽可能减少动物的痛苦，避免不必要的SD大鼠使用。
1.3.2 主要试剂与仪器 100 kD超滤管(Millipore，美国)；外泌体提取试剂盒(赛默飞，美国)；胎牛血清、无外泌体胎牛血清、DMEM/F12培养基、青霉素-链霉素溶液(逍鹏生物，上海)；兔抗鼠TSG101、CD9抗体(Proteintech，中国)；CD90抗体、CD29抗体(BioLegend，美国)；CD45抗体(联科生物，杭州)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天生物，上海)；0.25%胰蛋白酶(Gibco，美国)；纳米粒度颗粒跟踪分析仪(Malvern Panalytical，英国)；透射电子显微镜(Hitachi，日本)；光学显微镜(Olympus，日本)；超净工作台(Airtech，日本)；流式细胞仪(Becton，Dickinson，美国)。
1.4 实验方法
1.4.1 大鼠脂肪间充质干细胞的分离、培养 将雌性SD大鼠的两侧腹股沟皮下脂肪组织分离出来，在无菌条件下用含有双抗的1×PBS冲洗脂肪组织3次，除去大部分纤维和血细胞，将组织剪成1 mm3大小之后均匀分布在培养皿底部，在超净台中放置15-20 min使脂肪组织略微干燥，缓慢滴加10 mL完全培养基(体积分数为10%胎牛血清+ 1%青链霉素混合液+DMEM/F12培养基)，避免组织块浮起，将培养皿置于37 ℃、体积分数为5% CO2细胞培养箱中，每天在显微镜下观察组织周围细胞的爬出状态，在培养48 h后进行第1次换液，当细胞达80%-90%融合度时用0.25%胰蛋白酶进行消化，消化后按照1∶3的比例传代，传代细胞记为第1代细胞，取第3代脂肪间充质干细胞进行实验。
1.4.2 大鼠脂肪间充质干细胞的鉴定 用0.25%胰蛋白酶消化液对第3代脂肪间充质干细胞进行消化，再用PBS洗涤两三次，制成单细胞悬液，每管分装5×105个细胞，分别加入小鼠抗大鼠PE、FITC、APC标记的单抗CD90(202523)、CD29(102205)、CD45(F3104503)各10 μL，在避光条件下孵育30 min，PBS洗去未标记的抗体，制成单细胞悬液后用流式细胞仪检测分析[23]。

1.4.3 外泌体的提取 用完全培养基将第3代脂肪间充质干细胞培养至达80%-90%融合度时，更换不含外泌体的间充质干细胞培养基，在细胞恒温培养箱中培养48 h，收集细胞上清液[24-25]，在100 kD超滤管中加入1 000 mL上清液，以2 000×g转速离心浓缩30 min，以去除细胞和碎片，加入50%培养基体积的外泌体分离试剂，混合后4 ℃过夜，在4 ℃下、10 000×g离心1 h，用200 μL PBS重悬管壁沉淀物，将所得的外泌体悬液分装后放在-80 ℃冰箱内备用。

1.4.4 外泌体的鉴定
(1)透射电镜观察外泌体大体形貌：取20 μL外泌体悬液，滴于载样铜网上，置于超净工作台中保留2 min，用磷钨酸溶液负染固定5 min，用干净无菌滤纸吸干多余液体后置于室温下干燥，用透射电镜观察外泌体的外形、尺寸，并进行拍摄。
(2)纳米颗粒跟踪分析检测粒径分布峰值、尺寸及浓度：样本池用去离子水清洗，取上述外泌体悬液，用1×PBS对样本进行稀释(1∶50稀释)，进行样本粒径的检测。
(3) BCA法检测蛋白浓度：将外泌体悬液置于冰上裂解30 min后，按BCA试剂盒说明书步骤测定外泌体悬液中的蛋白浓度，并根据所测浓度调整外泌体悬液的稀释倍数。样本孔加入5 μL外泌体悬液，重复2个复孔，蛋白稀释液定容至20 μL，加入BCA工作液于37 ℃下孵育30 min，用酶标仪测各孔在562 nm处吸光度值，根据标准品所得的吸光度值绘制标准曲线并得到标准曲线公式，将样品的吸光度值带入该公式，测算出外泌体悬液的蛋白浓度。
(4) Western blot检测外泌体膜蛋白中CD9、TSG101的表达：加入等体积含有蛋白酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液对外泌体悬液进行裂解，收集的样品在10% SDS-PAGE中用300 mA电泳60 min，将蛋白质转移到聚偏二氟乙烯膜上，在室温下用5%脱脂奶粉进行封闭，加入CD9(20597-1-AP，1∶3 000)、TSG101(28283-1-AP，1∶8 000)一抗在4 ℃摇床孵育过夜，次日进行洗涤，回收一抗后在室温下与辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗(1∶10 000)孵育1 h，用ELC发光液进行显影成像。
1.4.5 大鼠脂肪间充质干细胞及其来源外泌体的蛋白质组学分析 首先对脂肪间充质干细胞及其来源外泌体进行蛋白提取，质控检测合格后进行酶解脱盐，加入5 mmol/L DTT后37 ℃孵育1 h，恢复室温后加入碘乙酰胺孵育45 min，加入胰酶孵育过夜，第2天加入甲酸终止酶切，形成肽段，再进行高通量LC-MS/MS质谱分析，对提取出的肽段通过液相色谱分离后进入Orbitrap Exploris™ 480质谱仪中，生成质谱检测原始数据，对原始数据进行相关数据库检索，得到相应的质谱分析数据结果。
1.5 主要观察指标 ①大鼠脂肪间充质干细胞的形态及免疫表型的鉴定；②大鼠脂肪间充质干细胞源性外泌体的形态学特征、粒径尺寸、浓度、表面标志物CD9、TSG101的表达；③大鼠脂肪间充质干细胞及其来源外泌体的蛋白组学对比分析。

1.6 统计学分析 实验所得数据采用SPSS 25.0软件进行分析，计量资料以x±s表示。数据资料符合正态分布，两样本均数差异用t检验比较，多样本均数差异用单因素方差分析比较，以P < 0.05为差异有显著性意义。该研究统计方法已经通过云南中医药大学统计学专家审核。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

到目前为止，再生医学中使用间充质干细胞移植治疗逐渐成为研究的热点[26]，可用于治疗糖尿病[27]、骨关节炎[28]、神经损伤[29-30]、系统性红斑狼疮[31]、炎症[32]、组织修复等方面[33]，并表现出良好的治疗潜力。脂肪间充质干细胞因其来源广泛、取材时对自身创伤小、临床应用不涉及伦理问题等优势而逐渐受到重视。越来越多的研究证据表明，间充质干细胞治疗中起主导作用的可能是其强大的旁分泌效应[14，34]。外泌体是细胞外囊泡的一个亚群，与其来源的母体细胞具有相似的生物性能，可以在细胞之间和细胞与细胞外基质之间传递物质和信息[35]，但与干细胞相比，外泌体移植后没有致瘤性和存活率低等缺点，具有安全性好、浓度易于控制、免疫原性低等优势[36-37]，并可作为药物载体治疗疾病和监测疾病[38]，且来源广泛。脂肪间充质干细胞来源外泌体已经被应用于治疗神经和视网膜疾病[39]、伤口愈合[11]、组织修复等研究中[40]。
已有研究者对间充质干细胞的蛋白组学进行了分析，这些分析结果为干细胞的应用奠定了一定的基础[41]。但目前对于干细胞来源外泌体的蛋白组学研究中，缺少母体细胞和其来源外泌体之间的对比分析[42]，因此该实验应用蛋白组学技术对脂肪间充质干细胞及其来源外泌体进行对比分析，主要运用非标定量法，通过酶切得到肽段，检测肽段上的蛋白并进行质谱分析，对所检测出的蛋白质谱数据进行相关数据库搜索后，通过多组学联合分析筛选出差异表达蛋白，再对这些差异蛋白进行功能分析，该结果可说明间充质干细胞来源外泌体和其母体细胞在应用中起到治疗作用的差异蛋白富集情况，差异蛋白参与的功能和相关信号通路的不同。
目前有很多提取外泌体的方法，该实验主要采用外泌体提取试剂盒对浓缩后的细胞上清进行快速提取。通过透射电镜观察到外泌体呈茶杯型、由双层膜包绕的膜性小囊泡结构，边界清晰，囊泡直径约为100 nm，与报道中的外泌体形态相同。纳米颗粒跟踪分析仪是一种物理性能测试仪器，用于外泌体的粒径测量分析，在该实验中所测外泌体的粒径分布峰值为112.2 nm，浓度为7.5×
1011粒子/mL，外泌体平均直径在70-140 nm之间，与文献报道中一致[20，43-44]。Western blot检测发现外泌体中特异性蛋白 TSG101和CD9高表达[45-46]。经过BCA法测定蛋白质量浓度为7.66 mg/mL，符合文献报道[47]。证明实验成功提取脂肪间充质干细胞来源外泌体。
蛋白组学对比分析结果显示，大鼠脂肪间充质干细胞及其来源外泌体中总蛋白数为3 766种，二者相同表达的蛋白为1 605种，外泌体中表达的蛋白数为38种，细胞中表达的蛋白数为2 123种。在差异蛋白筛选后，脂肪间充质干细胞与外泌体相比，有504个差异表达蛋白，其中有216个上调，有288个下调。对差异表达蛋白进行GO分析，结果显示差异表达蛋白在细胞定位上主要集中在细胞外基质、突触和核糖体等位置，在外泌体发挥作用的部位高表达，可促进外泌体的合成和加速信息交流；在分子功能上主要与肝素、钙、锌离子结合活性和核糖体、信号受体的结合能力等方面密切相关，这些蛋白参与了外泌体分泌后的作用过程，并减少了血栓形成，在组织修复中起积极作用；参加的生物过程主要在细胞黏附、细胞外基质组织作用和翻译过程中最为显著，这与外泌体发挥作用的结构和功能有关，参与了蛋白形成过程，可促进细胞之间、细胞和外部环境之间的物质和信息交流。KEGG通路分析结果显示，差异表达蛋白参与了多条信号通路、细胞外基质受体交互作用、核糖体作用和细胞因子受体相互作用等，并且还与胆固醇和甲状腺、系统性红斑狼疮等多种代谢性疾病有关，此外，与百日咳、帕金森病等也密切相关。有研究表明，脂肪间充质干细胞衍生的外泌体可能通过Wnt、MAPK、PI3K/Akt、JAK/STAT等信号通路促进肌肉再生[48]，还可以通过减轻β-淀粉样蛋白的积累，从而减少阿尔茨海默病神经元细胞的凋亡，促进受损神经突触的恢复[49]。
综上所述，脂肪间充质干细胞及其来源外泌体有相同表达蛋白和差异表达蛋白，对筛选后的差异表达蛋白进行GO分析和KEGG分析，发现脂肪间充质干细胞来源外泌体和其母体细胞具有相似性，并在细胞间物质和信息交流方面起着重要作用，通过加强细胞间的交流、合成相关蛋白和抑制炎症，可以促进组织的再生修复，有望成为无细胞治疗的替代疗法。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体的蛋白组学对比分析

Comparative proteomic analysis of rat adipose-derived mesenchymal stem cells and their exosomes

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