毛蕊花糖苷抑制Erastin诱导的多巴胺能神经细胞系MN9D细胞铁死亡

doi:10.12307/2025.008

中国组织工程研究 ›› 2025, Vol. 29 ›› Issue (7): 1408-1413.doi: 10.12307/2025.008

• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇下一篇

毛蕊花糖苷抑制Erastin诱导的多巴胺能神经细胞系MN9D细胞铁死亡

张明洋，杨新玲

新疆医科大学第二附属医院，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830028

收稿日期:2023-11-02 接受日期:2024-01-10 出版日期:2025-03-08 发布日期:2024-06-27
通讯作者: 杨新玲，博士，博士生导师，主任医师，新疆医科大学第二附属医院，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830028
作者简介:张明洋，男，1992年生，新疆维吾尔自治区尉犁县人，汉族，新疆医科大学在读硕士，医师，主要从事神经病学疾病研究，尤其是帕金森疾病的研究。
基金资助:
中央引导地方科技发展专项资助项目(ZYYD2022C17)，项目负责人：杨新玲；新疆自治区研究生科研创新项目(XJ2023G178)，项目负责人：张明洋；新疆神经系统疾病研究重点实验室(XJDX1711)，项目负责人：杨新玲

Verbascoside inhibits Erastin-induced ferroptosis of dopaminergic nerve cell line MN9D cells

Zhang Mingyang, Yang Xinling

Second Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830028, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Received:2023-11-02 Accepted:2024-01-10 Online:2025-03-08 Published:2024-06-27
Contact: Yang Xinling, MD, Doctoral supervisor, Chief physician, Second Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830028, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Zhang Mingyang, Master candidate, Physician, Second Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830028, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Supported by:
Central-Guided Local Funding Project for Scientific and Technological Development, No. ZYYD2022C17 (to YXL); Graduate Student Innovation Project of Xinjiang Uygur Autonomous Region, No. XJ2023G178 (to ZMY); Key Laboratory of Nervous System Diseases of Xinjiang Uygur Autonomous Region, No. XJDX1711 (to YXL)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

铁死亡：是一种铁依赖性的细胞程序性死亡，由Dixon等人在2012年首次提出，该种新型的细胞死亡形式与铁代谢异常及脂质过氧化等密切相关，其作用分子、效应形态及生化特征等方面与凋亡、自噬、坏死、焦亡等其他细胞死亡方式有所不同。
毛蕊花糖苷：又称类叶升麻苷，是一种易溶于水、颜色呈类白色或淡黄色的苯乙醇苷类化合物，在自然界中分布广泛，可以从地黄、肉苁蓉、前子、桂花、裸花等植物中分离提纯得到毛蕊花糖苷单体。目前研究发现毛蕊花糖苷具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、保护神经等作用，是非常具有研究价值的天然植物资源。

背景：近年越来越多的研究证实多巴胺能神经元细胞铁死亡参与了帕金森病的发病，毛蕊花糖苷目前被证实具有抗氧化、抗炎和神经保护作用。
目的：探讨毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡的保护效果及作用机制。
方法：以MN9D细胞为研究对象，分为对照组、模型组(20 μmol/L Erastin组)、Erastin+1 μg/mL毛蕊花糖苷组、Erastin+5 μg/mL毛蕊花糖苷组、Erastin+10 μg/mL毛蕊花糖苷组。MN9D细胞在CO2恒温培养箱中培养24 h，然后用不同质量浓度毛蕊花糖苷预处理8 h，再加入20 μmol/L Erastin诱导24 h后，采用ELISA法检测还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、总铁离子、丙二醛水平，免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶的表达，Western blot法检测酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4蛋白表达。
结果与结论：①与对照组相比，模型组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显减少(P < 0.05)，丙二醛和总铁离子水平明显增加(P < 0.05)；与模型组相比，毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显增加(P < 0.05)，丙二醛和总铁离子水平明减少(P < 0.05)；②与对照组相比，模型组酪氨酸羟化酶阳性细胞面积明显减少(P < 0.05)；与模型组相比，毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组酪氨酸羟化酶阳性细胞面积明显增加(P < 0.05)；③与对照组相比，模型组酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4的蛋白表达明显减少(P < 0.05)；与模型组相比，毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4的蛋白表达明显增加(P < 0.05)。结果提示：毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡具有明显的抑制作用，其机制可能通过作用于核因子红细胞-2相关因子2/血红素加氧酶1/谷胱甘肽过氧化物酶4通路实现的。

https://orcid.org/0009-0009-8754-6623 (张明洋)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Abstract: BACKGROUND: In recent years, more and more studies have confirmed that ferroptosis of dopaminergic neurons is involved in the pathogenesis of Parkinson’s disease, and verbascoside has been confirmed to have antioxidant, anti-inflammatory and neuroprotective effects.
OBJECTIVE: To investigate the protective effect of verbascoside on Erastin-induced ferroptosis of MN9D cells and its action mechanism.
METHODS: MN9D cells were divided into control group, model group (20 μmol/L Erastin group), Erastin+1 μg/mL verbascoside group, Erastin+5 μg/mL verbascoside group, and Erastin+10 μg/mL verbascoside group. MN9D cells were cultured in a CO2 incubator for 24 hours, then pretreated with different mass concentrations of verbascoside for 8 hours, and induced with 20 μmol/L Erastin for 24 hours. The levels of reduced glutathione, superoxide dismutase, total iron ion, and malondialdehyde were detected by ELISA. The expression of tyrosine hydroxylase was detected by immunohistochemistry. The expressions of tyrosine hydroxylase, nuclear factor erythrocyte-2-associated factor 2, heme oxygenase-1, and glutathione peroxidase 4 were detected by western blot assay.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) Compared with the control group, the levels of reduced glutathione and superoxide dismutase were significantly decreased (P < 0.05), and the levels of malondialdehyde and total iron ion were significantly increased in the model group (P < 0.05). Compared with the model group, the levels of reduced glutathione and superoxide dismutase were significantly increased (P < 0.05), and the levels of malondialdehyde and total iron ionized water were decreased in 1, 5, 10 μg/mL verbascoside groups (P < 0.05). (2) Compared with the control group, the area of tyrosine hydroxylase positive cells in the model group was significantly reduced (P < 0.05). Compared with the model group, the area of tyrosine hydroxylase positive cells was significantly increased in 1, 5, 10 μg/mL verbascoside groups (P < 0.05). (3) Compared with the control group, the protein expressions of tyrosine hydroxylase, nuclear factor erythrocyte-2-associated factor 2, heme oxygenase-1 and glutathione peroxidase 4 were significantly decreased in the model group (P < 0.05). Compared with the model group, the protein expression levels of tyrosine hydroxylase, nuclear factor erythrocyte-2-associated factor 2, heme oxygenase-1, and glutathione peroxidase 4 were significantly increased in 1, 5, 10 μg/mL verbascoside groups (P < 0.05). The results suggested that verbascoside could inhibit Erastin-induced ferroptosis in MN9D cells, possibly by activating nuclear factor erythrocyte-2-associated factor 2/ heme oxygenase-1/glutathione peroxidase 4 pathway.

Key words: verbascoside, Erastin, MN9D cell, ferroptosis, nuclear factor erythrocyte-2-associated factor 2, heme oxygenase-1, glutathione peroxidase 4

中图分类号:

张明洋, 杨新玲. 毛蕊花糖苷抑制Erastin诱导的多巴胺能神经细胞系MN9D细胞铁死亡[J]. 中国组织工程研究, 2025, 29(7): 1408-1413.

Zhang Mingyang, Yang Xinling. Verbascoside inhibits Erastin-induced ferroptosis of dopaminergic nerve cell line MN9D cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2025, 29(7): 1408-1413.

图/表（结果） 2

2.1 Erastin诱导铁死亡细胞模型的建立在0，10，20，40，80 μmol/L不同浓度Erastin干预下，MN9D细胞存活率分别为(91.0±2.0)%，(73.0±2.6)%，(52.0±4.4)%，(36.0±2.6)%，(24.0±3.0)%，在20 μmol/L浓度下细胞的存活率在50%左右，故后续实验以此浓度来建立帕金森病铁死亡细胞模型，见图1，2。
2.2 不同质量浓度毛蕊花糖苷干预后MN9D细胞的存活情况 CCK-8方法检测对照组、模型组、1，5，10，20 μg/mL毛蕊花糖苷组细胞存活率分别为(98.66±1.15)%，(50.33±1.53)%，(59.00±3.60)%，(66.33±3.06)%，(89.00±3.61)%，(73.00±3.00)%，见图3，4，后续选择1，5，10 μg/mL毛蕊花糖苷进行相关实验。
2.3 免疫组织化学检测各组MN9D细胞酪氨酸羟化酶的表达与对照组相比，模型组酪氨酸羟化酶阳性细胞面积明显减少(P < 0.01)；与模型组相比，毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组酪氨酸羟化酶阳性细胞面积明显增加，但仍低于对照组(P < 0.05)，见图5。
2.4 Western blot法检测各组MN9D细胞酪氨酸羟化酶、Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4的表达与对照组相比，模型组酪氨酸羟化酶、Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4的表达明显减少；与模型组相比，毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组酪氨酸羟化酶、Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4的表达明显增加，但仍少于对照组，差异有显著性意义(P < 0.05)，见图6，7。
2.5 各组MN9D细胞还原型谷胱甘肽、丙二醛、超氧化物歧化酶、总铁离子水平与对照组相比，模型组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显减少，丙二醛和总铁离子水平明显增加；与模型组相比，毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显增加，但仍少于对照组，丙二醛和总铁离子水平明减少，但仍高于对照组，差异有显著性意义(P < 0.05)，见图8。

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引言

随着人口的不断老龄化，帕金森病的发病率和患病率不断提高，给社会及家庭带来沉重的负担，目前在医学界和基因学界得到了广泛的关注[1]。帕金森病的症状分为运动型症状和非运动型症状。运动型症状主要表现为静止性震颤、运动迟缓、肌强直、姿势步态异常等，非运动型症状主要表现为认知障碍、睡眠障碍、感觉障碍等一系列自主神经功能障碍[2]。帕金森病的病理特征主要表现为中脑黑质区致密部多巴胺能神经元发生退变、α-突触核蛋白异常聚积形成路易小体等[3]。帕金森病的发病机制尚不明确，目前没有特效的治疗手段，主要是改善和延缓临床症状的进展。为了更好地研究帕金森病的发病机制和治疗方法，制备帕金森病实验模型就成为不可或缺的研究手段。MN9D细胞系是由胚胎小鼠中脑区的多巴胺能神经细胞和N18TG2神经母细胞瘤细胞通过人工干预的方式相互融合而成的细胞系；由于MN9D细胞能够表达酪氨酸羟化酶并且能够合成、释放及吸收多巴胺[4-6]，常被广泛用于帕金森病和多巴胺能神经元细胞损伤的机制及治疗研究[7]。
细胞的死亡方式有多种形式，包括凋亡、坏死、铁死亡、自噬、焦亡等。细胞铁死亡是DXION等[8]在2012年提出的一种新型的细胞死亡方式。铁死亡是一种铁依赖的氧化损伤引起的细胞死亡方式[9]，标志性特征包括脂质过氧化和铁沉积[10]。目前发现在帕金森病发病中氧化应激、线粒体功能障碍、α-突触核蛋白异常聚集等机制与铁死亡密切相关[11-12]。Erastin是一种细胞渗透性喹唑啉酮类(Quinazolinone)化合物，是基础研究中常见的铁死亡诱导剂[13]。Erastin引起细胞铁死亡的主要机制是通过抑制SystemXc-活性，耗竭细胞内的谷胱甘肽，引起脂质氧化、活性氧积聚，最终导致细胞铁死亡[14]；YAGODA等[15]在2007年发现Erastin可以引起细胞内线粒体功能障碍和脂质氧化物累积，最终导致细胞铁死亡。谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPX4)又名磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶，是第4个含有硒元素的GPX成员，是目前已知的唯一一种能有效减少生物细胞膜中脂质氧化的酶，在抵抗脂质过氧化方面具有重要作用[16-18]，在GPX4失活后脂质氧化物不能被催化代谢，将发生类似Fenton反应产生大量具有细胞毒性的活性氧[19]，触发细胞发生铁死亡[20-21]。毛蕊花糖苷是一种水溶性的苯乙醇苷类化合物，广泛分布于植物界，常见于地黄、肉苁蓉、车前子、桂花、裸花等植物中[8]。目前研究表明毛蕊花糖苷具有抗氧化、神经保护、抗炎症反应、抗肿瘤等功能[22-23]。但毛蕊花糖苷在改善帕金森病症状方面的相关报道较少，机制仍未阐明。由于毛蕊花糖苷具有抗氧化、保护神经的作用，因此推测毛蕊花糖苷可能通过抑制细胞的铁死亡，从而起到保护神经的作用。该实验探讨毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡的保护作用及其可能机制，为帕金森病的治疗提供基础研究依据。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计细胞学实验观察。
1.2 时间及地点实验于2023年4-10月在新疆医科大学第二临床医学院新疆神经系统疾病研究重点实验室完成。
1.3 材料 MN9D细胞(武汉普诺赛生命科技有限公司)；DMEM高糖培养基(武汉普诺赛生命科技有限公司，批号：PM150210)、胎牛血清(依科赛生物科技有限公司，批号：FSP500)；Erastin(MCE公司，批号：HY-15763)；毛蕊花糖苷(成都瑞芬思德丹生物科技有限公司，批号RDD-M01102302016)；兔酪氨酸羟化酶单克隆抗体(Affinity，
批号：58844S)；核因子红细胞-2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2)抗体(Affinity，AF0639)；重组血红素加氧酶1抗体(Affinity，批号：AF5393)；重组GPX4抗体(Abcam，批号：ab125066)；GAPDH抗体(Affinity，批号：AF7021)。
1.4 实验方法
1.4.1 MN9D细胞培养和传代采用DMEM高糖培养液[含体积分数10%胎牛血清，1%双抗(青霉素、链霉素)]培养MN9D细胞，置于37 ℃、体积分数5%CO2恒温箱中孵育，每两三天更换1次培养液，待细胞融合至80%-90%时以1 ∶ 3进行传代处理。
1.4.2 Erastin诱导铁死亡细胞模型的建立将第3代MN9D细胞以5 000个/孔接种于96孔板中，置于CO2培养箱培养24 h，分别加入 0(对照组)，10，20，40，80 μmol/L Erastin，再置于CO2培养箱培养24 h，弃培养基，每孔加入100 μL含有10% CCK-8的无血清DMEM高糖培养基，放入培养箱培养1 h，用酶标仪于450 nm波长处测定每孔吸光度值，计算细胞存活率，另设置不加入MN9D细胞，仅加入DMEM高糖培养基为空白组，每组3个复孔。细胞存活率= (实验组吸光度值-空白组吸光度值)/(对照组吸光度值-空白组吸光度值)×100%。实验重复进行3次。选择细胞存活率为对照组细胞存活率50%左右的浓度作为诱导细胞铁死亡的最佳浓度。
1.4.3 不同质量浓度毛蕊花糖苷干预后MN9D细胞存活情况将第3代MN9D细胞以5 000个/孔的密度接种于96孔板中，置于CO2培养箱培养24 h，分别加入0，1，5，10，20 μg/mL毛蕊花糖苷预处理8 h，然后加入20 μmol/L Erastin共培养24 h，弃培养基，每孔加入100 μL含有10% CCK-8的无血清DMEM高糖培养基，放入培养箱培养1 h，用酶标仪于450 nm波长处测定每孔吸光度值，计算细胞存活率，另设置仅加入MN9D细胞和DMEM高糖培养基、不加入毛蕊花糖苷和Erastin为对照组，设置不加入MN9D细胞、仅加入DMEM高糖培养基为空白组，每组3个复孔。细胞存活率= (实验组吸光度值-空白组吸光度值)/(对照组吸光度值-空白组吸光度值)×100%。实验重复进行3次。
1.4.4 ELISA法检测MN9D细胞中还原型谷胱甘肽、丙二醛、超氧化物歧化酶、总铁离子水平第5代MN9D细胞以5 000个/孔的密度接种于96孔板中，在37 ℃的CO2培养箱中培养24 h，加入0(模型组)，1，5，10 μg/mL毛蕊花糖苷预处理8 h，然后再加入20 μmol/L Erastin共培养24 h，另设置仅加入MN9D细胞和DMEM高糖培养基、不加入毛蕊花糖苷和Erastin为对照组，用胰酶消化后离心收集细胞，置-80 ℃保存待测。严格按照说明书进行测定，每组均设3个复孔，实验重复进行3次。
1.4.5 免疫组织化学法检测MN9D中酪氨酸羟化酶的表达按1.4.4分组干预MN9D细胞后，以1×108 L-1的细胞浓度接种于共聚焦小皿中，PBS冲洗2次，每次5 min；40 g/L多聚甲醛室温固定15 min，PBS冲洗3次，每次2 min；0.1%TritonX -100溶液室温孵育20 min，PBS冲洗3次，每次2 min；体积分数3%H2O2孵育15 min；体积分数10%胎牛血清室温封闭20 min，PBS冲洗2次，每次
2 min；一抗稀释液(兔酪氨酸羟化酶单克隆抗体；稀释比例1∶200)4 ℃孵育过夜，次日孵育二抗(增强酶标山羊抗兔IgG聚合物)，DAB显色，苏木精复染，脱水封固，光学显微镜下观察酪氨酸羟化酶阳性细胞(呈黑褐色)。Image J软件分析酪氨酸羟化酶阳性细胞面积百分比。
1.4.6 Western blot实验检测酪氨酸羟化酶、Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4的相对表达量按1.4.4分组干预MN9D细胞后，弃培养液，胰酶消化贴壁细胞，1 200 r/min离心5 min，PBS重悬细胞后再次离心，加入RIPA 裂解配置液(1%蛋白酶抑制剂PMSF)冰上裂解提取细胞蛋白，按BCA说明书进行蛋白浓度定量，100 ℃沸水中煮沸蛋白变性10 min，经过SDS-PAGE凝胶电泳、转膜、封闭、一抗孵育过夜(酪氨酸羟化酶抗体、Nrf2抗体、血红素加氧酶1抗体、GPX4抗体，稀释比例1∶1 000)，辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG二抗(1∶5 000)孵育2 h后曝光显色；Image J 软件采集各条带的灰度值，分析酪氨酸羟化酶、Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4的相对表达量。
1.5 主要观察指标 ①铁死亡细胞模型的最适Erastin浓度；②CCK-8法检测不同质量浓度毛蕊花糖苷干预后MN9D细胞的存活情况；③免疫组织化学法检测各组MN9D细胞酪氨酸羟化酶的表达；④Western blot实验检测各组MN9D细胞酪氨酸羟化酶、Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4的表达；⑤ ELISA法检测各组MN9D细胞还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、丙二醛、总铁离子水平。

1.6 统计学分析数据分析使用SPSS 23.0软件，以x±s表示，两组数据比较采用t 检验，多组数据比较采用单因素方差分析(One way ANOVA)，P < 0.05为差异有显著性意义。文章统计学方法已通过新疆医科大学统计教研室的审核。

讨论

毛蕊花糖苷最早是于1963年意大利科学家在毛蕊花属植物中分离提纯后得到的，并命名为verbascoside。目前研究发现毛蕊花糖苷具有广泛的药理活性，可以清除生物体内自由基增强抗氧化酶活性，在调节免疫、保护神经、延缓衰老等方面发挥重要重要[24-26]。毛蕊花糖苷作为一种中药单体在治疗阿尔茨海默症、抗抑郁等方面也有良好的改善作用[27-28]。在该实验中首先使用不同浓度的Erastin诱导MN9D细胞，观察对细胞的增殖抑制作用，结果发现用20 μmol/L Erastin诱导的MN9D细胞存活率在50%左右，最终选择20 μmol/L为造模浓度。研究发现10 μg/mL毛蕊花糖苷可以明显减轻Erastin作用后的MN9D细胞损伤[29]。铁死亡是一种新型的细胞程序性死亡方式，在细胞形态、发生机制等方面均不同于细胞凋亡、细胞焦亡和细胞坏死等细胞死亡方式。阿尔茨海默症、缺血再灌注、肿瘤、帕金森病等疾病的发生发展与铁死亡均密切相关[30-33]。铁死亡在生化特征上主要表现为铁离子积累、氧化剂增多、抗氧化剂减少。在该实验中，与对照组相比，Erastin模型组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显减少，丙二醛和总铁离子水平增加；毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平较模型组增加，但仍少于对照组，丙二醛和总铁离子水平较模型组减少，但仍高于对照组，这些结果与既往研究结果一致[34]。GPX4是第4个含有硒元素的GPX成员，由于具有独特的氨基酸排列顺序和特殊的空间结构使得它可以清除膜脂质过氧化氢产物，将具有细胞毒性的脂质过氧化物还原为无毒性的脂质醇，从而起到预防细胞氧化应激的作用，因此GPX4是铁死亡的一个主要抑制剂和细胞铁死亡的标志蛋白[35-37]。该实验表明，毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组与模型组相比可以明显提高GPX4蛋白的表达，尤其是毛蕊花糖苷10 μg/mL组更加明显。Nrf2/血红素加氧酶1/GPX4通路与抗氧化作用密切相关，转录因子Nrf2是抗氧化系统的主要调控因子，在介导铁等金属代谢、脂质代谢和谷胱甘肽合成方面也发挥着关键作用，GPX4和血红素加氧酶1受Nrf2调控，从而发挥抗氧化作用，以上因子都涉及铁死亡的发生[38]。在该实验中，与对照组相比，模型组Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4的蛋白表达量明显减少；毛蕊花糖苷1，5，10 μg/mL组Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4的蛋白表达量较模型组明显升高，同时略低于对照组。结果表明毛蕊花糖苷可以上调Nrf2、血红素加氧酶1、GPX4表达，减轻氧化应激，保护多巴胺能神经元免受损伤[39-40]。
综上所述，实验发现Erastin可以成功诱导MN9D细胞的帕金森样铁死亡改变，毛蕊花糖苷可以减轻Erastin诱导的MN9D细胞帕金森样损伤，其机制可能是通过激活Nrf2/血红素加氧酶1/GPX4通路，抑制细胞铁死亡，提高还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶的表达量，同时降低丙二醛和总铁离子的表达量实现的，这为毛蕊花糖苷治疗帕金森病提供了实验性基础。但实验也存在局限性，该实验并未采用中脑多巴胺的神经元直接进行研究，尚不能完全反映神经元在不同状态下的生理特点，需要在动物实验及临床试验中进一步验证。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

毛蕊花糖苷抑制Erastin诱导的多巴胺能神经细胞系MN9D细胞铁死亡

Verbascoside inhibits Erastin-induced ferroptosis of dopaminergic nerve cell line MN9D cells

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[1]	关梦雅, 任彬彬, 王晶莹. 主要组织相容性复合体调控帕金森病的免疫反应[J]. 中国组织工程研究, 2025, 29(25): 5469-5477.
[2]	王晶莹, 任彬彬, 马素娜, 杨悦悦, 吴松, 关梦雅, . α-突触核蛋白在帕金森疾病中诱导线粒体损伤的机制[J]. 中国组织工程研究, 2025, 29(17): 3668-3674.
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