中国组织工程研究 ›› 2011, Vol. 15 ›› Issue (23): 4215-4219.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.23.009
• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇 下一篇
段小兵1,2,关方霞3,邓晓辉1,杨 波1,2,张天祥1,田 毅1,乔晓俊1,李 远1,梁 硕3,朱万万3
Duan Xiao-bing1,2, Guan Fang-xia3, Deng Xiao-hui1, Yang Bo1,2, Zhang Tian-xiang1, Tian Yi1, Qiao Xiao-jun1, Li Yuan1, Liang Shuo3, Zhu Wan-wan3
摘要:
背景:海藻具有广阔的药理活性前景,加强其研究对有目的进行应用开发有重要的指导意义。 目的:观察海洋单细胞海藻在体外对人脑胶质瘤干细胞生物学活性的影响。 方法:以酶消化法培养人脑胶质瘤干细胞,流式细胞分选出CD133阳性细胞,细胞传代获得第3代细胞。流式细胞仪检测海洋单细胞海藻作用前后细胞CD133表达变化,免疫组织化学检测贴壁细胞巢蛋白及胶质纤维酸性蛋白的表达。实验组分别加入不同质量浓度的海洋单细胞海藻,阴性对照加不含药的PBS,将稀释成4,6,8,10 g/L的海洋单细胞海藻加入细胞培养液中并作用24,48,72 h,流式细胞仪检测胶质瘤干细胞生长周期,应用酶标仪检测细胞生长抑制情况。 结果与结论:随着浓度和时间的增加,与对照组相比倒置显微镜下可见实验组胶质瘤干细胞不易聚团成球,出现贴壁分化,并逐渐明显;加药后胶质瘤干细胞CD133表达量明显减少;出现的贴壁细胞免疫组织化学染色巢蛋白及胶质纤维酸性蛋白表达阳性;流式细胞仪检测显示,停滞在S、G2/M期细胞数增加,而G0/G1期细胞数减少;随着浓度和时间的增加,胶质瘤干细胞增殖明显抑制,与对照组相比差异有显著性意义(P < 0.05~0.01)。提示海洋单细胞海藻能够抑制人脑胶质瘤干细胞的增殖,并促进其分化,且作用具有浓度和时间依赖性。
中图分类号: