骨髓干细胞

过表达长链非编码RNA Gm16104影响C3H10T1/2间充质干细胞的成骨分化

• 图2｜C3H10T1/2间充质干细胞成骨分化模型的鉴定

  

  结果：碱性磷酸酶在矿化组织细胞中高度表达，在骨的钙化过程起关键作用，是成骨细胞的表型标志物之一，根据碱性磷酸酶活性可判断细胞成骨分化程度[18-19]。该研究采用100 ng/mL BMP-2诱导细胞成骨分化，诱导5 d后进行碱性磷酸酶染色，结果显示：与对照组比较，诱导组80%以上细胞染色阳性呈紫蓝色，见图2A。提取成骨诱导第0，1，3，5天的细胞总RNA用于进行反转录反应，采用qRT-PCR检测成骨标志基因Alpl的表达水平，结果显示：在成骨分化过程中，Alpl的表达水平升高，见图2B，以上结果表明BMP-2可成功诱导C3H10T1/2细胞成骨分化。

  图5｜过表达Gm16104后对C3H10T1/2细胞成骨分化的影响

  

  结果：质粒转染12 h后，加入成骨诱导液诱导细胞分化，成骨分化4 d进行碱性磷酸酶染色，采用qRT-PCR检测成骨分化相关标志基因的表达水平。碱性磷酸酶染色结果显示，与pcDNA3.1对照组相比，pcDNA-Gm16104过表达组碱性磷酸酶染色阳性细胞显著减少，见图5A。qRT-PCR结果显示，过表达Gm16104可导致成骨标志基因Alpl表达水平降低，见图5B，表明过表达Gm16104可抑制C3H10T1/2细胞成骨分化。
  
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发布日期： 2024-01-23  浏览： 37