脐血干细胞

    人外周血血清培养人脐带间充质干细胞定向诱导为神经干细胞
  • 图1|分离培养的人脐带间充质干细胞形态(标尺为100 μm)

    结果:体积分数10%人外周血血清诱导培养的hUC-MSCs在倒置显微镜下观察可见呈漩涡状生长且多层分布,排列有方向性,细胞多呈梭形或纺锤状,见图1

    图2|脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)定向诱导的神经干细胞(NSCs)形态(标尺为100 μm)

    结果:hUC-MSCs加入神经干细胞诱导培养液培养三四天,细胞体积开始变小,仍呈漩涡样排列,当诱导培养7-10 d时,大部分细胞开始聚集在瓶底部,形成小的球形细胞簇。随着培养时间延长,球形结构逐渐离开培养瓶底形成了悬浮的细胞团,形态规则,致密,折光性强,无突起生长,形成典型的神经球细胞团,细胞团生长迅速,由最初的小细胞团逐渐增大增多,见图2


    图5|人脐带间充质干细胞成骨诱导分化(茜素红染色,标尺为20 μm)


    结果:hUC-MSCs成骨诱导分化后,茜素红染色镜下可观察到茜素红与钙发生显色反应,产生一种深红色的带色化合物,即茜素红染色阳性,见图5


    图6|人脐带间充质干细胞源性神经干细胞分化为神经细胞(苏木精-伊红染色,标尺为100 μm)

    结果:用含体积分数10%人外周血血清的DMEM/F12培养基继续培养NSCs,随着培养时间的延长,神经球开始贴壁,并向周围伸出长突起,呈单极或多极神经细胞样改变,部分突起出现分支。诱导分化第8天时,经苏木精-伊红染色后的神经细胞在显微镜下可更直观地发现其伸出的突起长度较长,分支也较多且邻近细胞之间的突起互相连接,呈典型的神经细胞形态,见图6

    图7|免疫荧光染色鉴定体外诱导人脐带间充质干细胞源性神经干细胞向神经元和星形胶质细胞分化(×100)

    结果:用含体积分数10%人外周血血清的DMEM/F12培养基继续培养NSCs,随着培养时间的延长,神经球开始贴壁,并向周围伸出长突起,呈单极或多极神经细胞样改变,部分突起出现分支。诱导分化第8天时,经苏木精-伊红染色后的神经细胞在显微镜下可更直观地发现其伸出的突起长度较长,分支也较多且邻近细胞之间的突起互相连接,呈典型的神经细胞形态,见图6

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  • 发布日期: 2023-11-25  浏览: 84