转化生长因子β1与骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.49.016

中国组织工程研究 ›› 2013, Vol. 17 ›› Issue (49): 8563-8569.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.49.016

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转化生长因子β1与骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化

吕洋¹，刘博²，王海萍¹

1河北北方学院组织学与胚胎学教研室，河北省张家口市 075000
2河北北方学院附属第一医院病理科，河北省张家口市 075000

修回日期:2013-09-22 出版日期:2013-12-03 发布日期:2013-12-03
通讯作者: 王海萍，博士，教授，河北北方学院组织学与胚胎学教研室，河北省张家口市 075000 haipingmimi@126.com
作者简介:吕洋★，女，1979年生，河北省张家口市人，回族，2007年解放军军医进修学院毕业，硕士，讲师，主要从事骨髓干细胞向心肌细胞诱导分化的研究。 yyang2bb@163.com
基金资助:
河北省自然基金资助项目(C2009001022)*；河北省教育厅科学技术研究重点项目(ZH2012001)*；河北北方学院青年基金项目(Q2013027)*

Effect of transforming growth factor beta1 on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocyte-like cells in vitro

Lü Yang¹, Liu Bo², Wang Hai-ping¹

1Department of Histology and Embryology, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, Hebei Province, China
2Department of Pathology, the First Affiliated Hospital of Hebei North University, Zhangjiakou 075000, Hebei Province, China

Revised:2013-09-22 Online:2013-12-03 Published:2013-12-03
Contact: Wang Hai-ping, M.D., Professor, Department of Histology and Embryology, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, Hebei Province, China haipingmimi@126.com
About author:Lü Yang★, Master, Lecturer, Department of Histology and Embryology, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, Hebei Province, China yyang2bb@163.com
Supported by:
the Natural Science Foundation of Hebei Province, No. C2009001022*; the Scientific Research Projects of the Education Department of Hebei Province, No. ZH2012001*; the Youth Foundation of Hebei North University, No. Q2013027*

摘要/Abstract

摘要：

背景：转化生长因子β1是一种具有调控细胞增殖、分化、黏附和凋亡，在生物发育及组织修复过程中具有重要作用的细胞因子。
目的：观察转化生长因子β1对诱导大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为心肌样细胞的影响。
方法：取SD大鼠四肢骨骨髓，分离培养骨髓间充质干细胞，应用转化生长因子β1对第2代骨髓间充质干细胞定向诱导，以未诱导的骨髓间充质干细胞做对照。
结果与结论：①加入转化生长因子β1 诱导后的骨髓间充质干细胞培养7 d时，相差显微镜观察多紧密平行排列生长，呈类长柱形，少数呈不规则形；14 d后开始出现细胞间连接，形成数个相互连接的长柱形，28 d时骨髓间充质干细胞体积则变小，排列紧密呈条梭状。②转化生长因子β1 诱导4周后，免疫细胞化学技术检测骨髓间充质干细胞均可见结蛋白、原肌球蛋白及间隙连接蛋白43的阳性细胞，诱导组各指标的积分吸光度值均显著高于对照组(P均< 0.01)。③诱导组心肌肌钙蛋白I呈阳性表达。根据心肌肌钙蛋白I阳性率计算出的心肌样细胞转化率在诱导组显著高于对照组(P=0.000)。④荧光免疫双标技术检测结果显示，经转化生长因子β1诱导4周的骨髓间充质干细胞结蛋白及心肌肌钙蛋白I蛋白均定位于细胞质且呈共表达。⑤透射电镜结果显示，分化细胞的细胞质内可见到平行排列的肌丝，并富含线粒体、糖原和核糖体。提示骨髓间充质干细胞在转化生长因子β1诱导下可定向分化为心肌样细胞。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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关键词: 干细胞, 干细胞因子及调控因子, 骨髓间充质干细胞, 转化生长因子β1, 心肌样细胞, 心肌细胞, 结蛋白, 原肌球蛋白, 心肌间隙连接蛋白43, 心肌肌钙蛋白I, 省级基金, 干细胞图片文章

Abstract:

BACKGROUND: Transforming growth factor β1 is a cytokine that can regulate cell proliferation, differentiation, adhesion and apoptosis and have an important role in developmental biology and tissue repair process.
OBJECTIVE: To explore the differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocyte-like cells in vitro induced by transforming growth factor beta1.
METHODS: Bone marrow mesenchymal stem cells were isolated and cultured from the bone marrow of Sprague-Dawley rats. Then, passage 2 bone marrow mesenchymal stem cells were induced by transforming growth factor beta1. Bone marrow mesenchymal stem cells without induction served as controls.
RESULTS AND CONCLUSION: The morphology of bone marrow mesenchymal stem cells after induced by transforming growth factor beta1 for 7 days became larger and extended. Most of induced cells became long shuttle-shaped and paralleled, and a few arranged irregularly. After 14 days, most cells became rod-shape and touched with adjacent cells to form myotube-shape. Up to 28 days, the induced cells became smaller, showed fusiform shape and arranged tightly. After induced by transforming growth factor beta1 for 4 weeks, bone marrow mesenchymal stem cells could be identified by the positive staining for desmin, tropomyosin, connexin 43 and cardiac troponin I. The integral absorbance values in the induction group were significantly higher than those in the control group (all P < 0.01). According to the positive rate of cardiac troponin I, the conversion rate of cardiomyocyte-like cells in the induction group was significantly higher than that in the control group (P=0.000). Immunofluorescence double-labeling assay showed that after induced by transforming growth factor beta1 for 4 weeks, desmin and cardiac troponin I proteins were localized in the cytoplasm and showed co-expression. Transmission electron microscope showed that the induced cells had a cardiomyocyte-like ultrastructure: a lot of mitochondria, rough endoplasmic reticula and ribosomes were founded in the cytoplasm, and paralleled myofilaments could be seen in the cytoplasm. It is indicated that bone marrow mesenchymal stem cells can differentiate into cardiomyocytes in vitro after induced by transforming growth factor beta1.

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Key words: stem cells, bone marrow mesenchymal stem cells, transforming growth factor beta1, muscle cells

中图分类号:

R394.2

吕洋，刘博，王海萍. 转化生长因子β1与骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化[J]. 中国组织工程研究, 2013, 17(49): 8563-8569.

Lü Yang, Liu Bo, Wang Hai-ping. Effect of transforming growth factor beta1 on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocyte-like cells in vitro[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2013, 17(49): 8563-8569.

图/表（结果） 13

2.1 骨髓间充质干细胞的培养与诱导结果 相差显微镜下观察到：接种到培养瓶中的骨髓间充质干细胞， 24 h后可见部分细胞已贴壁，呈圆形；培养3 d后，贴壁的细胞逐渐呈短梭形或纺锤形；培养7 d后，细胞增殖明显，相互连接呈集落样；培养14 d后细胞集落增大，排列成旋涡状或栅栏状，周边可见无细胞生长区。传代后细胞的生长较原代细胞快，形态呈梭形，胞核明显，排列较为均匀，见图1。

第2代骨髓间充质干细胞经转化生长因子β1诱导7 d后，细胞的形态出现变化，多紧密平行排列生长，梭形细胞比例下降，多呈类长柱形，少数呈不规则形；14 d后开始出现细胞间连接，形成数个相互连接的长柱形，见图2；28 d时骨髓间充质干细胞体积则变小，排列紧密呈条梭状，见图3。培养4周始终未见自发性搏动现象。

2.2 免疫细胞化学鉴定结果 加入转化生长因子β1 诱导4周后的骨髓间充质干细胞均可见结蛋白、原肌球蛋白及间隙连接蛋白43的阳性细胞，见图4-6。

与PBS作为一抗的空白对照组相比，实验对照组(即不加诱导剂组)结蛋白、原肌球蛋白及间隙连接蛋白43均为弱阳性或阴性表达，见图7-9。

经统计学分析，诱导组与对照组结蛋白、原肌球蛋白及间隙连接蛋白43的阳性表达差异均有显著性意义(P均 < 0.01)，见表1。

2.3 心肌样细胞转化率 根据心肌肌钙蛋白I表达率计算出的心肌样细胞转化率为38.47%，显著高于对照组(P=0.000) ，见图10，11。

2.4 激光扫描共焦显微镜观察结果 荧光免疫双标检测结果显示经转化生长因子β1诱导4周的骨髓间充质干细胞核多呈空染，胞质内结蛋白和心肌肌钙蛋白I蛋白则均有阳性表达，分别呈现红色和绿色，当两者同时被观察时可见其共表达的部位呈黄色。见图12-14。

2.5 透射电镜观察结果 见图15，16。

透射电镜结果显示，部分细胞形态发生改变，呈短圆柱状，有突起或分支。细胞核较大，卵圆形，位于细胞中央。细胞质内可见到大量平行排列的肌丝，细胞器丰富而发达，含大量的粗面内质网、线粒体及糖原，呈现发育过程中的类心肌细胞样的超微结构。

参考文献

[1] 王彤,符岳,方向龆,等.体外诱导骨髓问充质干细胞向心肌细胞的分化和鉴定[J].中山大学学报:医学科学版, 2007,28(z1): 9-11.

[2] 吕洋,吴志刚,王海萍,等.转化生长因子β诱导骨髓干细胞分化为心肌样细胞的研究[J].中华老年心脑血管病杂志,2012,14(1): 62-65

[3] Huang YL,Kuang J, Hu YZ, et al. Bone marrow stromal cell transplantation combined with angiotensin-converting enzyme inhibitor treatment in rat with acute myocardial infarction and the role of insulin-like growth factor-1.Cytotherapy.2012;14(5): 563-569.

[4] Krausgrill B, Vantler M, Burst V, et al. Influence of cell treatment with PDGF-BB and reperfusion on cardiac persistence of mononuclear and mesenchymal bone marrow cells after transplantation into acute myocardial infarction in rats.Cell Transplant.2009;18(8):847-853.

[5] Alshammary S, Fukushima S, Miyagawa S, et al. Impact of cardiac stem cell sheet transplantation on myocardial infarction.Surg Today.2013, Epub ahead of print

[6] Mezey E.The therapeutic potential of bone marrow-derived stromal cells.J Cell Biochem. 2011;112(10):2683-2687.

[7] Ling SK,Wang R, Dai ZQ, et al. Pretreatment of rat bone marrow mesenchymal stem cells with a combination of hypergravity and 5-azacytidine enhances therapeutic efficacy for myocardial infarction.Biotechnol Prog.2011;27(2):473-482.

[8] Haghani K, Bakhtiyari S, Nouri AM.In vitro study of the differentiation of bone marrow stromal cells into cardiomyocyte-like cells.Mol Cell Biochem. 2012;361(1-2): 315-320.

[9] 王海萍,张雷,李秀华.大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞[J].解剖学报, 2007,38(1):70-74.

[10] Bierie B,Moses HL.TGF-beta and caneer.Cytokine Growth Factor Rev.2006;17(l/2):29-40.

[11] Antoon R,Yeger H,Loai Y,et al.Impact of bladder-derived acellular matrix, growth factors,and extracellular matrix constituents on the survival and multipotency of marrow-derived mesenchymal stem cells.J Biomed Mater Res A.2012; 100(1):72-83.

[12] Sun Z, Wang Y, Gong X, et al. Secretion of rat tracheal epithelial cells induces mesenchymal stem cells to differentiate into epithelial cells.Cell Biol Int. 2012;36(2): 169-175.

[13] Li TS,Hayashi M,Ito H,et al.Regeneration of infarcted myocardium by intramyocardial implantation of ex vivo transforming growth factor- beta- preprogrammed bone marrow stem cells.Circulation.2005;111(19): 2438-2445.

[14] Lawson-Smith MJ, McGeachie JK.The identification of myogenic cells in skeletal muscle, with emphasison the use of tritiated thymidine autoradiography and desmin antibodies. Anat.1998;192(1): 161-171.

[15] 史绍蓉,王娟.α-心肌肌球蛋白重链与原肌球蛋白-1在不同负荷运动中的差异表达研究[J].北京体育大学学报, 2009, 32(10): 51-54.

引言

材料方法

设计：单一样本细胞学实验观察。

时间及地点：实验于2010年3月至2013年2月在河北北方学院完成。

材料：

实验动物：3周龄健康雄性SD大鼠由河北医科大学动物实验中心提供，合格证号为：908134。

转化生长因子β1对骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的影响实验所需试剂：

方法：

骨髓间充质干细胞的分离与培养：用体积分数10%的水合氯醛麻醉SD大鼠，于乙醇中浸泡消毒后取其四肢长骨，分离周围肌组织，放入含有D-Hanks液/双抗(青霉素100 mg/L，链霉素100 g/L)的缓冲液中冲洗2次。用含体积分数10%胎牛血清的IMDM培养液经无菌滤膜过滤将暴露于骨髓腔的骨髓冲出后接种于培养瓶中，取1滴细胞悬液计数活细胞，使细胞浓度调整为 1×10¹⁴ L^-¹，随后将培养瓶置于37 ℃，体积分数5%CO₂的培养箱中进行培养。24 h后首次换液，此后每3 d换液1次，去除悬浮的造血干细胞，当贴壁的细胞达90%融合时用0.5% trypsin和0.04% EDTA(1∶1)消化、传代。

骨髓间充质干细胞的鉴定：参考文献[1]方法进行骨髓间充质干细胞的鉴定，采用流式细胞仪检测细胞表型CD45、CD29、CD44和CD11b/c的表达。

骨髓间充质干细胞诱导分化：第2代骨髓间充质干细胞生长48 h后加入诱导剂转化生长因子β1，采用预实验的最佳诱导浓度5 µg/L^[2^]，3 d后去除诱导的培养基，加入常规IMDM培养基继续培养至4周。对照组在培养过程中不加任何诱导剂。诱导组与对照组细胞培养4周后进行爬片，随后用PBS冲洗2次，40 g/L多聚甲醛固定以备其他方法的检测。

诱导分化的骨髓间充质干细胞免疫细胞化学检测：取细胞爬片用PBS冲洗，经体积分数3%过氧化氢-甲醇室温孵育10 min，枸橼酸盐缓冲液微波炉修复(温度达96 ℃时开始计时)20 min，室温冷却，山羊血清封闭10 min，随后分别加结蛋白(浓度为1∶200)，原肌球蛋白、间隙连接蛋白43及心肌肌钙蛋白I抗体(浓度均为1∶100)，4 ℃过夜；PBS冲洗，加二抗37 ℃孵育60 min；PBS冲洗，加链酶卵百素-过氧化物酶37 ℃孵育60 min；PBS冲洗，随后DAB液显色，苏木精复染，二甲苯透明，中性树胶封固，光镜下观察实验结果。阴性对照实验除了用PBS代替一抗外，其余步骤同上。

计算骨髓间充质干细胞的心肌样细胞转化率：免疫细胞化学检测阳性结果为细胞质呈棕黄色。每组选取8张载玻片，每张载玻片在光镜下随机取5个非重叠视野，用Image-Pro Plus 6.0 图像分析软件对结蛋白、原肌球蛋白及间隙连接蛋白43的免疫细胞化学检测结果进行分析。根据心肌肌钙蛋白I(鉴别心肌的特异性标记物)的阳性率分析心肌样细胞的转化率。计算方法：倒置相差显微镜高倍视野下(×100)，每孔随机取5个视野，分别计数每个视野内的细胞数(N)和心肌肌钙蛋白I阳性细胞数(Ni)。根据公式(Ni/N×100%)计算骨髓间充质干细胞的心肌样细胞转化率。

免疫荧光双标检测：取细胞爬片用PBS冲洗，经过氧化氢-甲醇室温孵育、枸橼酸盐缓冲液微波炉修复、山羊血清封闭后加结蛋白抗体(浓度为1∶200，阴性对照组以PBS代替一抗)，4 ℃过夜；PBS冲洗，加二抗37 ℃孵育60 min，PBS冲洗；加CY3标记的三抗(浓度为1∶50) 37 ℃孵育60 min，PBS冲洗；加心肌肌钙蛋白I抗体(浓度为1∶100，阴性对照组以PBS代替抗体)4 ℃过夜，PBS冲洗；加FITC标记的二抗(浓度为1∶50)37 ℃孵育60 min，PBS冲洗；最后用蛋白甘油封固，立即用激光扫描共聚焦显微镜观察结果。

透射电镜观察：将诱导培养至4周的细胞消化，用PBS悬浮细胞先经89×g离心清洗3次，后用2 146×g离心 15 min使细胞形成团块。将细胞团块置于25 g/L戊二醛中固定(4 ℃)；PBS冲洗后加1%锇酸固定30 min，随后PBS冲洗、丙酮梯度脱水，EPON 812进行包埋，超薄切片机切片，透射电镜下观察分化细胞的超微结构。

主要观察指标：①骨髓间充质干细胞的培养与诱导结果。②免疫细胞化学鉴定结果。③心肌样细胞转化率。④经转化生长因子β1诱导的骨髓间充质干细胞激光扫描共焦显微镜观察及透射电镜观察结果。

统计学分析：应用SPSS 17.0统计软件对全部结果进行分析，免疫细胞化学检测各组各实验指标的积分吸光度值用x(_)±s表示，多个样本均数间的比较采用单因素方差分析，组间比较采用成组t 检验，诱导组与对照组心肌样细胞转化率的比较采用卡方检验，以P < 0.05表示差异有显著性意义。

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讨论

成体心肌细胞是终末分化细胞，不能再生，因此近年来，细胞移植治疗心肌梗死等心血管疾病已成为了研究热点之一^[3-5]。骨髓间充质干细胞具有自我复制、自我更新及多向分化潜能的特点，是细胞治疗以及基因组织工程的重要种子细胞^[6]。大量的研究表明，骨髓间充质干细胞在5-氮胞苷诱导后向心肌细胞定向分化并表达相关特异性蛋白^[7-8]，作者前期的实验也证明了其诱导的有效性^[9]。目前，如何将骨髓间充质干细胞高效诱导为心肌细胞是提高心肌损伤后干细胞移植治疗成功率的关键。

转化生长因子β是一种由单核细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞和心肌细胞等分泌的具有广泛生理作用的生长因子，在哺乳动物中包括3种异构体，即转化生长因子β1、β2和β3。其中，转化生长因子β1含量最高，具有代表性^[10]。它是由两条含有112个氨基酸亚单位的相对分子质量为25 000的肽链二聚体组成，每条肽链由含C末端的390个氨基酸非活性前体编码而成。有研究显示，转化生长因子β1对骨髓间充质干细胞分化为平滑肌细胞^[11]、上皮细胞具有诱导促进作用^[12]。Li等^[13]的研究结果显示，心肌内植入转化生长因子β预编码的CD117⁺细胞能有效的辅助心肌再生和诱导治疗性血管的生成，从而促进心脏功能的恢复。本实验采用了转化生长因子β1对骨髓间充质干细胞进行定向诱导，使其定向分化为心肌样细胞，形态学结果显示，加入转化生长因子β1诱导后的骨髓间充质干细胞培养7 d时多紧密平行排列生长，呈类长柱形，少数呈不规则形；14 d后开始出现细胞间连接，形成数个相互连接的长柱形，28 d时骨髓间充质干细胞体积则变小，排列紧密呈条梭状，呈现类似心肌样细胞的形态改变。

为了进一步鉴定转化生长因子β1对骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的有效性，作者对所培养的细胞进行了免疫细胞化学及荧光免疫双标技术检测。结蛋白作为心肌细胞分化的一种早期标志已经得到公认，它是最早表达于未分化的肌母细胞中的肌源性蛋白^[14]，其功能主要包括保持细胞形态、参与物质运输，对维持成熟肌源性细胞内细胞器的正常位置、功能及肌张力有着积极的作用，且与基因表达调节和信息传导相关。原肌球蛋白是肌肉收缩过程中重要的调节蛋白质，存在于细肌丝中，与肌动蛋白双螺旋并行存在，可影响并调控肌动蛋白、肌球蛋白之间的相互作用^[15]，对肌肉收缩起重要调节作用。本实验结果显示，加入转化生长因子β1诱导4周后的骨髓间充质干细胞均可见结蛋白、原肌球蛋白的阳性细胞，对照组二者均为弱阳性或阴性表达。经统计学分析，诱导组与对照组以上两种标记物的IA值均具有显著性差异。结蛋白、原肌球蛋白在诱导组的阳性表达均说明了骨髓间充质干细胞发生了肌源性分化。

心肌肌钙蛋白仅存于心肌中，由3个亚单位即心肌肌钙蛋白I，心肌肌钙蛋白C和心肌肌钙蛋白T组成，三者之间形成复合物，共同调节心肌的舒缩运动。实验根据心肌肌钙蛋白I这一心肌源性特异性标记物的阳性率分析心肌样细胞的转化率。间隙连接蛋白43是心肌闰盘缝隙连接的主要结构蛋白，几乎遍及整个心脏，由其构成的缝隙连接通道是心肌细胞之间实现电耦联及化学信息交换的重要结构基础。间隙连接蛋白43的阳性表达说明了分化后的细胞能够形成细胞间快速的电冲动，从功能上体现了心脏整体电活动的同步性和协调性。实验结果显示，加入转化生长因子β1 诱导4周后的骨髓间充质干细胞均可见心肌肌钙蛋白I、间隙连接蛋白43的阳性细胞，而对照组二者均为弱阳性或阴性表达，差异均具有统计学意义。此外，荧光免疫双标的结果也印证了诱导后的细胞可同时表达结蛋白和心肌肌钙蛋白I。但本实验结果也显示，心肌肌钙蛋白I及间隙连接蛋白43的阳性表达均要低于结蛋白和原肌球蛋白，说明骨髓间充质干细胞大部分是被诱导为成肌细胞，一部分则分化为心肌细胞，骨髓间充质干细胞是经过成肌细胞向心肌样细胞分化而成的。同时，电镜结果也再次印证了经转化生长因子β1诱导的骨髓间充质干细胞具有发育过程中的类心肌细胞样的超微结构特点。

综上所述，实验根据诱导后细胞的形态变化，结合蛋白表达、超微结构观察等相关分析，证明了转化生长因子β1能够在体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化为心肌样细胞，且分化的细胞具有心肌细胞的特性。这为骨髓间充质干细胞体外诱导为心肌细胞提供了一种新的思路，具体机制仍需进一步实验去深入探讨。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
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[1]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta 分析[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(在线): 3-.
[2]	高扬, 白胜超, 陈圣菊, 王瑞元, 李俊平. 运动诱导骨骼肌损伤对结蛋白聚集体的影响[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(8): 1243-1248.
[3]	陈劲松, 王中汉, 常非, 刘贺. 多种特殊状态下关节软骨缺损修复的组织工程技术[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(8): 1272-1279.
[4]	乔雪松, 陈霓, 杨风英, 牛燕媚. 运动调控间充质干细胞来源骨髓脂肪细胞的作用及前景[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(8): 1293-1298.
[5]	张圣敏, 刘超. 生物支架材料诱导脂肪来源干细胞成骨分化的最新热点[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1107-1116.
[6]	王田田, 王建忠. 骨髓间充质干细胞治疗早期股骨头坏死的应用与前景 [J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1117-1122.
[7]	王张玲, 余丽梅, 赵春华. 间充质干细胞线粒体转移治疗修复组织损伤的作用 [J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1123-1129.
[8]	邓俊豪, 李苗, 张里程, 唐佩福. 三维悬滴法培养间充质干细胞在组织损伤修复中的应用及优势[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1101-1106.
[9]	任春梅, 刘玉芳, 许诺, 邵苗苗, 何建亚, 李晓杰. 非编码RNAs在人牙髓干细胞中的调控作用及机制 [J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1130-1137.
[10]	黄文文, 李硕, 侯宗柳, 王文举. 炎症性肠病发病机制及间充质干细胞治疗的作用与问题 [J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1138-1143.
[11]	何林, 白晋伟, 苏伟. 基于Scopus数据分析多能干细胞研究领域的文章、作者及高影响力机构[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1144-1148.
[12]	刘春栋, 申晓青, 张艳丽, 张小根, 吴补领. 钛表面锶改性后骨髓基质干细胞黏附、迁移、增殖及成骨相关基因的表达[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1009-1015.
[13]	林明, 潘金勇, 张惠荣. 敲除NIPBL基因可下调小鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化能力[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 1002-1008.
[14]	陈钢泓, 曾超明, 陈梓铭, 廖俊星, 马元琛, 郑秋坚. 骨髓间充质干细胞关节腔注射治疗兔软骨缺损的最适浓度[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 996-1001.
[15]	张文, 雷堃, 高磊, 李宽新. 慢病毒介导骨形态发生蛋白7基因转染诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化 [J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(7): 985-990.