2.1   菟丝子主要活性成分和绝经后骨质疏松症的共同作用靶点   以生物利用度≥30% 、类药性≥0.18作为筛选标准，于TCMSP数据库内完成筛选，共获得菟丝子主要活性成分共11个，见表1；完成菟丝子潜在活性成分筛选后，在TCMSP数据库内整合各活性成分对应的靶点并整合去重，共获得靶点190个，使用UniProt数据库实现数据格式转换。基于OMIM、GeneCards和PharmGKB数据库获得绝经后骨质疏松症靶点并整合去重，共获得疾病靶点1 402个。通过R语言绘制韦恩图，筛选出两者的共同作用靶点110个，见图1。 2.2   菟丝子和绝经后骨质疏松症的共同作用靶点分析   将菟丝子11个主要活性成分和110个共同靶点信息添加到Cytoscape软件中，构建和绘制成分-靶"

点之间可视化网络，筛选出度中心性值排名前5个作为关键靶点，分别为白细胞介素6、活化T细胞核因子1、雌激素受体1(ESR1)、肿瘤蛋白p53(TP53)、B细胞淋巴瘤2(BCL2)，见图2。"

2.3   共同作用靶点的蛋白质-蛋白质互作网络分析   在String数据库中获取蛋白质间的互作关系，再将相关数据添加到Cytoscape软件中，完成对蛋白质-蛋白质互作网络图的绘制，并通过Cytoscape中的CytoNCA插件包含的度中心性值计算方法，计算得到中位数，筛选出度中心性值排名前10个作为核心靶点，分别为白细胞介素6、活化T细胞核因子1、雌激素受体1(ESR1)、热休克蛋白90 α家族A类成员1(HSP90AA1)、肿瘤蛋白p53(TP53)、B细胞淋巴瘤2(BCL2)、肿瘤坏死因子(TNF)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、v-myc髓细胞组织增生病毒癌基因同源物(MYC)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)，见图3。"

2.4   核心靶点的GO功能分析   GO功能分析结果得出生物学过程2 083条、细胞组分68条、分子功能157条。生物学过程主要涉及对氧水平的反应、对氧化应激的反应、对雌激素水平的反应、对类固醇激素的反应等；分子功能主要涉及雌激素反应元件结合、转录共调节因子结合等；细胞组分主要涉及RNA聚合酶Ⅱ转录调节复合体、分泌颗粒腔、膜筏等，见图4。 2.5   菟丝子活性成分作用于绝经后骨质疏松症的分子对接   分子对接用于确定药物小分子成分和靶点蛋白之间的结合亲和力[21]。度中心性值排名前二的靶点蛋白为白细胞介素6和活化T细胞核因子1，"

将白细胞介素6(PDB ID：4NI7)与其对应的活性成分槲皮素、苦参碱以及活化T细胞核因子1(PDB ID：1A66)与其对应的活性成分苦参碱、山柰酚进行分子对接，见图5，并进行亲和力评分，即对接结合能，见表2，其中结合力排名前二的是苦参碱和白细胞介素6、苦参碱和活化T细胞核因子1，因此后续动物实验使用苦参碱进行验证。"

2.6   实验动物数量分析   实验共设计了4组，假手术组10只，模型组10只，苦参碱低剂量组10只，苦参碱高剂量组10只。实验结束后共有26只大鼠存活，分别为假手术组7只，模型组6只，苦参碱低剂量组7只，苦参碱高剂量组6只。在实验过程中，共有14只大鼠脱落，假手术组2只大鼠因感染死亡，1只大鼠因手术并发症死亡，具体表现为肠梗阻；模型组1只大鼠因感染死亡，3只大鼠因手术并发症死亡，具体表现为肠管坏死和肠梗阻；苦参碱低剂量组1只大鼠因感染死亡，2只大鼠因手术并发症死亡，具体表现为肠胀气和肠梗阻；苦参碱高剂量组1只大鼠因感染死亡，3只大鼠因手术并发症死亡，具体表现为肠胀气、肠梗阻和给药后出现抽搐。尽管有部分大鼠在实验过程中脱落，但最终进入结果分析的大鼠数量仍足以支持实验结果的可靠性。 2.7   验证模型的成功性   术后8周采用Micro-CT扫描胫骨远端作为观察区域，观察骨小梁密度及分布，并用Dataviewer软件截取胫骨远端二维图，可见模型组较假手术组的胫骨远端骨小梁数量明显减少，稀疏，且形态呈细小、不连续状，即证明造模成功，见图6。"

2.8   各组大鼠股骨形态学改变   在相同的放大倍数下(×200)，与假手术组相比，模型组的骨小梁明显减少，排列不规则，骨小梁丢失、断裂严重，髓腔内脂肪细胞明显增多；与模型组相比，苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量组的骨小梁数量、分布均有改善，髓腔内脂肪细胞减少，且苦参碱低剂量组骨小梁的改善情况优于苦参碱高剂量组，苦参碱低剂量组髓腔内脂肪细胞数量明显少于苦参碱高剂量组，见图7。"

2.9   各组大鼠股骨三维图   三维图显示，模型组骨小梁数量显著减少，骨小梁结构稀疏且出现断裂，形态细小且不连续，呈现扭曲或断裂状，靠近生长板的初级和次级网状骨小梁几乎完全消失，同时骨皮质变薄，骨髓腔明显增大。相比之下，苦参碱低剂量组和高剂量组的骨小梁数量、宽度、长度、形态和分布均有所改善，骨小梁密度和连接性增加，苦参碱低剂量组的皮质骨面积增加更为显著，骨髓腔也相应缩小，见图8。"

2.10   各组大鼠股骨微结构的形态计量学参数   与假手术组相比，模型组骨矿物质密度显著降低(P < 0.001)；与模型组相比，苦参碱低剂量组骨矿物质密度显著升高(P < 0.05)，而苦参碱高剂量组骨矿物质密度则无显著差异(P > 0.05)；与假手术组相比，模型组相对骨体积显著降低(P < 0.001)；与模型组相比，苦参碱低剂量组相对骨体积显著升高(P < 0.05)，而苦参碱高剂量组骨矿物质密度则无显著差异(P > 0.05)；与假手术组相比，模型组骨小梁数量显著降低(P < 0.01)；与模型组相比，苦参碱低剂量组骨小梁数量显著升高(P < 0.05)，而苦参碱高剂量组骨小梁数量则无显著差异(P > 0.05)；与假手术组相比，模型组骨小梁厚度显著降低(P < 0.001)；与模型组相比，苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量组骨小梁厚度则无显著差异(P > 0.05)；与假手术组相比，模型组骨小梁分离度显著升高(P < 0.001)；与模型组相比，苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量组骨小梁分离度则无显著差异(P > 0.05)，见图9。"

2.11   各组大鼠血清中白细胞介素6水平   与假手术组相比，模型组大鼠血清中白细胞介素6水平显著升高(P < 0.05)；与模型组相比，苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量组大鼠血清中白细胞介素6水平显著降低(P < 0.01，P < 0.05)；与苦参碱低剂量组相比，苦参碱高剂量组大鼠血清白细胞介素6水平显著升高(P < 0.05)，见图10。"

2.12   各组大鼠胫骨中活化T细胞核因子1的蛋白水平   与假手术组相比，模型组大鼠胫骨中活化T细胞核因子1蛋白水平显著升高(P < 0.01)；与模型组相比，苦参碱低剂量组大鼠胫骨中活化T细胞核因子1蛋白水平显著降低(P < 0.01)，而苦参碱高剂量组大鼠胫骨中活化T细胞核因子1蛋白水平则无显著差异(P > 0.05)，见图11。"