中国组织工程研究 ›› 2012, Vol. 16 ›› Issue (11): 1973-1976.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.11.017
• 组织构建细胞学实验 cytology experiments in tissue construction • 上一篇 下一篇
马丽丽,艾力江•吐尔逊,张 莉
Ma Li-li, Ailijiang•Tuerxun, Zhang Li
摘要:
背景:在甲醛固定石蜡包埋组织的制作及保存过程中会对DNA造成损害,提取的DNA在用于PCR扩增时部分结果并不理想。 目的:比较分析石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应的影响因素。 方法:从10.0 μm×2、10.0 μm×4和10.0 μm×5石蜡包埋食管癌组织切片中提取DNA,以0.05,0.1,0.2 μg模板DNA量扩增内参基因β-actin,PCR反应循环次数分别为35,40,45次,分析影响PCR反应的因素。 结果与结论:琼脂糖凝胶电泳结果显示以10.0 μm×2组织切片量,PCR反应循环次数40次,PCR反应模板DNA量 0.05 μg扩增取得的目的基因DNA的质量最高。说明减少石蜡包埋组织用量和减少模板DNA量有助于获得高质量的PCR反应条带,且PCR反应循环次数应大于40次,小于45次,再增加循环次数,则意义不大。 关键词:石蜡包埋组织;提取DNA;PCR反应;循环次数;模板DNA doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.11.017
中图分类号: