脐血干细胞
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图1｜人脐带间充质干细胞(hucMSCs)的培养与鉴定
结果：原代hucMSCs一般会在10-12 d从脐带组织小块周围爬出，可见细胞形态呈长梭形，贴壁生长，逐渐呈漩涡状，见图1A。当细胞密度达到90%时，胰酶消化至小皿中进行培养扩增，第2代hucMSCs形态，见图1B。成骨诱导3周，茜素红染色结果呈阳性，细胞内出现大小不等的红色钙结节，见图1C。成脂诱导三四周，油红O染色呈阳性，细胞内出现大小不等、形态不一的橘红色脂滴，见图1D。以上结果提示，hucMSCs具备多向分化的潜能。利用流式细胞术检测其表面抗原分子，结果表明hucMSCs高表达抗原CD73 (99.24%)、CD29 (99.38%)、CD105 (98.34%)，阴性表达抗原CD14 (0.87%)、CD11b (0.83%)、CD45(0.49%)，见图1E。以上结果，证明成功提取出原代hucMSCs。
图3｜微电场对人脐带间充质干细胞形态和干细胞表面抗原表达的影响
结果：与对照组相比，微电场作用3 d后，hucMSCs的形态无明显变化，均呈梭形，见图3A。通过流式细胞仪分析微电场作用3 d后hucMSCs的表面抗原表达：CD73(98.01%)、CD29(98.37%)、CD11b (1.76%)、CD45(1.45%)，见图3B。以上结果表明，微电场作用后hucMSCs仍然具有干细胞的细胞形态和表型特征。
图4｜微电场对人脐带间充质干细胞活力与增殖的影响
结果：采用CCK-8法检测微电场刺激后细胞活力，采用EdU染色法检测微电场刺激后对hucMSCs增殖的影响。CCK-8结果显示，微电场刺激3 d后，50，100 mV/mm组细胞的吸光度值显著高于未刺激组，差异有显著性意义(P < 0.05)，见图4A。EdU染色结果也同样得到了类似的现象，见图4B，C；50，100 mV/mm组增殖的细胞数量显著高于0 mV/mm组，且100 mV/mm组细胞增殖更显著(P < 0.001)。以上结果表明，微电场可提高hucMSCs的活力及促进增殖。
图5｜微电场对人脐带间充质干细胞成骨分化的影响(茜素红染色)
结果：为了观察微电场刺激对hucMSCs成骨分化的影响，茜素红染色发现50，100 mV/mm组均有圆形钙结节产生，且比0 mV/mm组更早出现典型的红色钙结节，见图5。以上结果提示，微电场可以显著提高hucMSCs分化的速度，促进hucMSCs成骨分化。
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