图1|人牙髓干细胞的形态
结果:采用组织块培养法培养牙髓组织5-10 d后,倒置显微镜下观察可见细胞从组织块中爬出,见图1A,贴壁生长,14 d左右细胞呈放射状排列,融合达70%-80%,去除组织块,次日进行传代。经有限稀释法分离提纯细胞后,可获得较为纯化的人牙髓干细胞,镜下观察细胞形态呈形态均一的长梭形,细胞生长汇集时,细胞排列成典型的漩涡状,见图1B。
图2|人牙髓干细胞的克隆形成能力
结果:经有限稀释法提纯后细胞培养7 d,结晶紫染色后镜下观察可形成明显的克隆集落,见图2。
图4|人牙髓干细胞的多向分化能力(标尺=50 μm)
结果:成脂诱导3周,油红O染色后镜下可见大小不一的红染脂滴散在分布,证明其具有成脂分化能力,见图4A。成骨诱导2周,茜素红染色后镜下可见散在的红色矿化结节,证明其具有成骨分化能力,见图4B。
图6|不同质量浓度重组人生长激素(rhGH)对人牙髓干细胞碱性磷酸酶活性的影响
结果:成骨诱导分化7 d,碱性磷酸酶染色后倒置显微镜下观察,对照组和rhGH组均可见散在胞质内的蓝紫色颗粒,碱性磷酸酶染色呈阳性,但rhGH组阳性染色面积多于对照组,且100,250 μg/L rhGH组染色较10,500,1 000 μg/L rhGH组深,见图6A。碱性磷酸酶半定量分析结果显示,与对照组相比,100,250,500,1 000 μg/L rhGH组碱性磷酸酶活性增强,尤其以100,250,500 μg/L rhGH组作用明显(P < 0.01),见图6B。
图7|不同质量浓度重组人生长激素(rhGH)对人牙髓干细胞成骨矿化能力的影响
结果:成骨诱导分化2周,茜素红染色后倒置显微镜下观察,rhGH组和对照组均可见散在红染的钙结节形成,见图7A。与对照组相比较,rhGH组的钙结节数量明显增多,尤其以100,250 μg/L rhGH组较为明显,见图7B。
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