牙髓干细胞

人牙周膜干细胞来源外泌体干预成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化

• 图1｜人牙周膜干细胞形态及分化能力(×100)

  

  结果：细胞接种24 h后，可见部分贴壁细胞，细胞形态不均一，呈短梭形或多边形。待细胞培养3-5 d后，可见明显的细胞克隆及细胞集落，继续培养7-9 d后，细胞达到90%融合，此时大部分细胞形态为纤维状或长梭形。传代后细胞形态单一，为成纤维样形态，见图1A。
  成脂分化后人牙周膜干细胞由原本的纤维状慢慢缩短，变圆。诱导分化8-10 d出现脂滴，油红O染色后可见脂滴颗粒均被染成红色，见图1B。成骨诱导后人牙周膜干细胞由纤维状开始变为多边形、鳞片状。随着诱导时间的延长，逐渐形成钙结节，经茜素红染色后可见钙结节被染成红色的矿化沉着物，见图1C。

  
  

  图3｜人牙周膜干细胞来源外泌体的鉴定

  

  结果：透射电镜观察可见脂质双分子层形成的囊泡结构，见图3A。NanoFCM粒径检测显示其外泌体直径分布在50-120 nm，集中在79.86 nm，见图3B。Western blot检测结果显示，提取的外泌体中含有CD81和CD63和TSG101的表达，见图3C。
  

  
  
  图5｜人牙周膜干细胞来源外泌体(PDLSC-exo)对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响(×200)

  

  结果：由图5可知，与对照组相比，人牙周膜干细胞来源外泌体干预下，MC3T3-E1成骨细胞能够形成更多的钙结节，茜素红染色后可见更多的红色矿化沉着物。
  

  
  
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发布日期： 2022-06-14  浏览： 599