2.1   NLRP3炎性小体概述   在2002年，MARTINON等[5]首次报道了NLRP3炎性小体的存在，以及其发生突变会导致促炎性半胱天冬酶失调，从而导致自发性发热发作，随后学者们对于NLRP3炎性小体进行了更多的研究。研究初期，学者们主要集中于对NLRP3炎性小体激活物进行研究，胞壁二肽、尿酸单钠、焦磷酸钙二水合物及胆固醇晶体等均可激活NLRP3炎性小体，从而引起caspase-1的激活及白细胞介素1β和白细胞介素18的产生[6-8]。随着研究的进行，学者们对于NLRP3炎性小体的激活机制了解更加深入，发现钙敏感受体可通过钙离子和环磷酸腺苷调节NLRP3炎症小体[9]，但是关于细胞器与NLRP3炎性小体的激活研究尚浅，SHIMADA等[10]首次提出了在核转录因子κB存在下，三磷酸腺苷诱导线粒体功能障碍和细胞凋亡，导致氧化的线粒体DNA从线粒体中释放，从而激活NLRP3炎症小体。大量的文献表明，有许多内源性和外源性分子可以激活NLRP3炎性小体，但是NLRP3炎性小体如何被这些分子所激活仍然存在疑问，在2018年，CHEN等[11]解释了NLRP3炎性小体的激活与分散的高尔基体反面网络结构(dispersed trans-Golgi network，dTGN)的磷酸肌醇-4-磷酸(phosphatidylinositol-4-phosphate，PtdIns4P)有关。在这个过程中，NLRP3通过其保守的多碱基区域与dTGN上PtdIns4P之间以离子键相互结合，从而使得适配蛋白ASC聚合，激活下游的信号级联。目前，人们普遍认为NLRP3炎性小体与调节生物体内正常发育和生理学中的多种关键事件，其与炎症性疾病、脑损伤及脊髓损伤等疾病密切相关，见图3。"

到目前为止，随着对NLRP3炎性小体的研究逐渐深入，国内外研究大部分集中于对其激活和疾病中的作用[12]。NLRP3炎性小体的激活分为经典活化和非经典活化，目前大部分都在对其经典通路激活进行研究，其受多种因素所激活，主要包括离子通道、线粒体、溶酶体、高尔基复合体及内质网损伤等所导致[4]。NLRP3炎性小体在脊髓损伤中的作用主要集中于炎症和焦亡两方面，脊髓损伤后引发氧化应激和各种炎症因子的激活，通过调控NLRP3炎性小体，有助于改善脊髓损伤后微环境，从而治疗脊髓损伤。近年来，焦亡已经成为一个热点话题，大量的研究表明NLRP3炎性小体与焦亡紧密联系，焦亡是一种程序性细胞死亡，其在神经元、小胶质细胞、星形胶质细胞及少突胶质细胞中均有大量研究，通过调控NLRP3炎性小体依赖性焦亡，降低相关炎症因子的释放，有助于促进脊髓损伤后的神经元恢复，治疗脊髓损伤。 2.1.1   NLRP3炎性小体的组成结构   NLRP3炎性小体由3个主要组分构成：NLRP3、ASC和caspase-1，这3种主要组分具有不同的作用，NLRP3主要功能为捕获危险信号并募集下游分子；caspase-1参与细胞因子白细胞介素1β和白细胞介素18的成熟以及促裂解蛋白D(gasderminD，GSDMD)的加工以介导细胞因子释放和焦亡；ASC承担连接NLRP3和caspase-1的作用。NLRP3由3部分组成：氨基(N)-末端pyrin结构域(PYD)、羧基(C)-末端LRR和核苷酸结合寡聚化结构域(NOD或NACHT)[13]。位于中心的腺苷三磷酸(ATP)酶结构域，称为NACHT，包括核苷酸结合结构域(NBD)、螺旋结构域1(HD1)、翼螺旋结构域(WHD)和螺旋结构域2(HD2)以及由12个重复序列组成的富含亮氨酸序列(LRR)结构域[4]。衔接子ASC含有N-末端PYD和C-末端胱天蛋白酶募集结构域(CARD)。Caspase-1由N末端CARD、称为p20的大催化亚基和称为p10的C末端小催化亚基组成[14]。ASC敲除小鼠脊髓损伤后运动功能恢复明显优于野生型小鼠，其NLRP3炎性小体相关蛋白表达降低[15]。在小鼠巨噬细胞中，与NLRP3相互作用的有丝分裂激酶NIMA相关激酶7(NEK7)是炎性小体活化所必需的[16]。NEK7敲除并不会明显改善小鼠脊髓损伤后的运动功能，但能减弱局部炎症反应并抑制受损脊髓的小胶质细胞/巨噬细胞中NLRP3炎性小体的活化[17]。上述研究表明，ASC，NEK7在NLRP3炎性小体中扮演不可或缺的角色。NLRP3炎性小体已成为炎症过程的关键要素，并被视为脊髓损伤中的潜在靶标，见图4。"

2.1.2   NLRP3炎性小体活化   NLRP3炎性小体的活化分为典型NLRP3炎性小体活化和非典型NLRP3炎性小体活化，文章主要陈述典型NLRP3炎性小体的活化。典型的NLRP3炎性小体活化需要2个步骤：启动步骤和激活步骤。首先，NLRP3表达可以在识别病原体相关分子模式或损伤相关分子模式时由模式识别受体或由参与免疫和炎症反应的细胞因子所引发。在相关因子活化后，NLRP3和其他炎性小体组分的表达在转录水平上上调。NLRP3的翻译后修饰，包括泛素化、磷酸化和类小泛素化，使得NLRP3活化，同时仍使NLRP3保持在自我抑制状态[4，18]。在第二步中，NLRP3被多种微生物和无菌刺激物激活，这些刺激包括细胞外ATP、尼日利亚菌素、短杆菌肽、细菌毒素和颗粒物质，如二氧化硅晶体、氢氧化铝、尿酸单钠和焦磷酸钙二水合物。在活化后，NLRP3组装并募集下游组分以形成炎性小体复合物，将白细胞介素1家族中的促细胞因子转化为调节免疫应答所必需的成熟促炎细胞因子白细胞介素1β和白细胞介素18[19]。NLRP3炎性小体活化是一个复杂的过程，其中涉及到各种各样的分子对其进行调节，研究这些分子是治疗疾病的关键。"

2.2   小胶质细胞极化与焦亡   中枢神经系统由神经元和神经胶质细胞所组成，神经胶质细胞主要包括小胶质细胞、少突胶质细胞以及星形胶质细胞，其中小胶质细胞是大脑及脊髓的常驻免疫细胞[20]。小胶质细胞能够精确地识别凋亡细胞及其碎片，避免吞噬相邻的正常神经元[21]。除此之外，其还可以促进神经元发育以及轴突再生[22]。然而，小胶质细胞容易受到外界环境的干扰，作为炎症效应器，小胶质细胞在脊髓损伤后会被多种物质所激活，释放大量的细菌毒素以及炎症因子，导致神经元死亡，从而加重脊髓损伤，而炎性小体所介导的神经炎症是导致脊髓损伤炎症的不良后果之一。炎性小体主要包括NLRP3、Nod样受体蛋白1(Nod-like receptor protein 1，NLRP1)及黑色素瘤缺乏因子2 (absent in melanoma 2，AIM2)炎性小体等，调控这些炎性小体，有助于促进神经元的恢复。研究表明，血红素加氧酶1可以通过下调脊髓损伤后神经元NLRP1的表达来促进神经元存活[23]，经雷帕霉素预处理后的小胶质细胞可以通过AIM2信号通路抑制脊髓损伤后的神经元损伤[24]，NLRP1及AIM炎性小体在脊髓损伤后发挥重要作用，但截至目前，NLRP1及AIM2炎性小体在脊髓损伤中的研究文献数量有所欠缺，暂未形成统一的观点，未来可以增加这方面的研究。NLRP3炎性小体是在脊髓损伤中研究最多的炎性小体，其主要在小胶质细胞中表达，通过调控NLRP3炎性小体，有利于减轻小胶质细胞中炎症因子的释放，从而促进神经元再生修复及脊髓损伤后功能恢复。 2.2.1   小胶质细胞极化   小胶质细胞和巨噬细胞是第一批响应脊髓损伤的细胞，是继发性脊髓损伤最重要的调节因子。位于脊髓的小胶质细胞在正常生理条件下以静息状态存在，并执行免疫监视功能[25]。当脊髓损伤时，静息状态下的小胶质细胞可极化为M1型和M2型，M1表型识别有害刺激，从而产生炎性细胞因子，如白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α，M2型为抗炎状态，清除细胞碎片，促进细胞外基质的形成和血管生成[26]。研究表明，M1型小胶质细胞在炎症早期释放大量炎症因子及氧自由基等有害物质，破坏神经元结构，影响神经元正常功能；M2型小胶质细胞在炎症晚期分泌一些神经营养物质，清除坏死或凋亡的神经元碎片，促进组织胶质瘢痕的形成。M2型小胶质细胞由多种抗炎递质调节驱动，并对抗M1型诱导的炎症，最终实现免疫抑制和神经元保护[27]。此外，M1型小胶质细胞促进损伤区域中硫酸软骨素蛋白聚糖的沉积，从而抑制损伤区域的轴突再生[28]，而M2型小胶质细胞在免疫调节中起重要作用，促进脊髓损伤后的神经再生和修复[29]。通过调节M1/M2的极化平衡以及由此产生的炎症因子，有可能减轻神经炎症反应，对保护神经系统免受继发性损伤具有重要意义，为脊髓损伤的诊断和治疗提供重要的临床依据。 2.2.2   小胶质细胞焦亡   细胞焦亡是一种程序性细胞死亡的促炎形式，其发生与NLRP3炎性小体密切相关。与其他程序性细胞死亡不同，焦亡的特征在于质膜破裂形成孔隙，细胞的通透性增加以及炎性细胞因子的释放。焦亡的发生依赖于caspase-1的形成，刺激物激活NLRP3炎性小体，诱导caspase-1裂解为有活性的caspase-1，有活性的caspase-1将白细胞介素1β与白细胞介素18前体切割成成熟形式的白细胞介素1β和白细胞介素18，还可以切割GSDMD，暴露氨基酸结合位点，促进GSDMD-N结构域募集到细胞膜上，形成细胞膜孔，从而释放白细胞介素1β和白细胞介素18，导致级联炎症反应和炎症细胞聚集[4]。几乎所有中枢神经系统细胞都可发生焦亡，如神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞以及小胶质细胞，目前国内外研究大部分聚焦于小胶质细胞焦亡的研究。轴突再生障碍是脊髓损伤恢复的主要障碍，抑制小胶质细胞电压门控质子通道减轻活性氧的产生，抑制焦亡从而促进轴突再生[30]。采用大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞与小胶质细胞共培养结果显示，通过抑制小胶质细胞焦亡有助于轴突再生[31]。通过靶向调控NLRP3炎性小体，可以抑制小胶质细胞焦亡，有助于缓解脊髓损伤后的神经炎症，促进神经元再生，促进脊髓损伤后功能恢复。"

2.3   参与脊髓损伤后NLRP3炎性小体调控小胶质细胞的信号通路     2.3.1   核转录因子κB信号通路   核转录因子κB是一组转录因子，其中的通路可被不同种类的促炎细胞因子激活。核转录因子κB在哺乳动物细胞的炎症、分化、增殖和存活中发挥关键作用[32]。核转录因子κB家族包含5个成员：RelA/p65、RelB、c-Rel、核转录因子κB1/p50(p105)和核转录因子κB2/p52(p100)，脊髓损伤后其主要在损伤部位的小胶质细胞和巨噬细胞被激活[33]。小胶质细胞活化后，会激活核转录因子κB信号通路，诱导星形胶质细胞的激活并放大炎症和神经毒性作用，导致神经元及少突胶质细胞死亡，促进神经胶质瘢痕的形成，最终进一步加重脊髓损伤[34]。除此之外，核转录因子κB激活可以促进NLRP3炎性小体的活化，进一步加重神经炎症反应[35]。通过拮抗核转录因子κB信号通路，有助于减轻继发性脊髓损伤的炎症环境，促进脊髓损伤后神经功能的恢复。 2.3.2   MAPK和AMPK信号通路   丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen-activated protein kinases，MAPKs)家族包括细胞外调节蛋白激酶(exracellular signal-regulated kinase，ERK)、p38 MAPK和c-Jun氨基末端激酶(C-JUN N-terminal kinase，JNK)，是一组在促炎细胞因子表达中起重要作用的信号分子。腺苷酸激活蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase，AMPK)和p38 MAPK通路是调节活化的小胶质细胞中的炎症反应的关键信号通路[36]。活性氧和MAPK信号通路可激活核转录因子κB，这在脊髓损伤后活化的小胶质细胞介导的神经炎症反应中起重要作用[37]。过表达范可尼贫血互补群 C(FANCC)可以抑制p38 MAPK磷酸化，降低NLRP3炎性小体及其相关蛋白表达，抑制小胶质细胞焦亡[37]。 NADPH氧化酶(NOX)是包括NOX1、NOX2、NOX3和NOX4以及DUOX2的酶复合物家族，其中NOX2和NOX4主要表达于脊髓小胶质细胞，并在中枢神经系统损伤时上调。NOX4增加活性氧的产生，进而促进p38 MAPK和JNK的磷酸化，从而激活核转录因子κB信号通路，进而促进NLRP3炎性小体相关蛋白的表达[38]。晚期氧化蛋白产物包括二酪氨酸和交联蛋白产物，是氧化应激的新标志物，脊髓损伤大鼠晚期氧化蛋白产物和氧化应激水平升高，晚期氧化蛋白产物通过NOX4-活性氧-NLRP3-GSDMD信号通路引发小胶质细胞焦亡[39]。除此之外，AMPK的激活可以抑制炎症起始中的NLRP3炎性小体合成，通过激活AMPK，可以减少NLRP3/caspase-1/白细胞介素1β轴来减轻小胶质细胞炎症，减轻脊髓损伤后的组织炎症反应，从而促进小鼠运动功能恢复[40]。MAPK与AMPK是许多分子相互作用的“中转站”，通过调控其表达，有助于修复损伤，显著减轻对细胞的有害作用。 2.3.3   PI3K/AKT信号通路   磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinases/proteinkinase B，PI3K/AKT)信号通路在小胶质细胞中起关键作用， PI3K/AKT激活后可以将小胶质细胞极化从促炎M1表型转变为抗炎 M2 表型，从而增加白细胞介素10表达，显著降低促炎细胞因子释放[41]。通过PI3K/AKT信号通路可调节脊髓损伤后的小胶质细胞的NLRP3炎性小体活化。胞外5′核苷酸酶 (Ecto-5′-nucleotidase，CD73)是一种糖基化蛋白，存在于外质膜层上，其功能是将细胞外AMP水解成腺苷和磷酸盐。CD73通过A2B腺苷受体(A2BAR)促进M2型小胶质细胞极化以及抑制M1小胶质细胞极化，从而减少脊髓损伤后的神经炎症[42]。在动物实验中，A2BAR会降低CD73敲低导致的NLRP3表达上调。FOXO1是促裂解蛋白D的转录激活因子，CD73通过A2BAR/PI3K/AKT/FOXO1途径减轻NLRP3炎性小体，从而抑制小胶质细胞焦亡，促进脊髓损伤功能恢复。缺氧诱导因子是由缺氧诱导因子1α和缺氧诱导因子1β亚基组成的异二聚体转录因子，是氧稳态的主要调节因子，其上调小胶质细胞CD73表达，与CD73协同促进小胶质细胞焦亡[43]。基于此，通过调控信号通路及其上下游靶标，有助于脊髓损伤后的神经功能恢复。 2.3.4   JAK/STAT信号通路   Janus激酶/信号转导和转录激活蛋白(Janus kinase/sigal transducer and activator of transcripation，JAK/STAT)信号通路是响应许多炎症调节物而触发的最重要的级联反应之一。小胶质细胞在脊髓损伤后被激活，M1型小胶质细胞在干扰素γ+脂多糖/肿瘤坏死因子α刺激后上调STAT1，以促进炎症的产生，白细胞介素4 和 白细胞介素13 诱导的 M2 型细胞上调STAT6表达，从而发挥抗炎作用，促进细胞增殖、迁移、生长和髓鞘再生[44]。Toll样受体4(Toll-like receptor4，TLR4)是一种重要的先天免疫受体，其可引发对各种疾病的炎症反应，其作为损伤相关分子模式和病原体相关分子模式的重要模式识别受体，在引发焦亡中起着重要的作用。细胞及动物实验共同证明脊髓损伤后死盒解螺旋3X连锁(DEAD-box helicase 3X-linked，DDX3X)表达增加，但当TLR4缺乏时表达减少。此外，DDX3X低表达在体外减轻了NLRP3炎性小体和小胶质细胞的焦亡，而DDX3X过表达有效地逆转TLR4缺乏的抗焦亡作用。同时，荧光素酶实验和免疫共沉淀实验共同证实STAT1是DDX3X的转录激活因子，TLR4会导致JAK2/STAT1通路激活，并且JAK2抑制剂减轻DDX3X/NLRP3介导的小胶质细胞焦亡。这进一步说明TLR4在脊髓损伤后通过激活JAK2/STAT1/DDX3X/NLRP3信号传导轴来促进小胶质细胞焦亡。    除此之外，双糖链蛋白聚糖(biglycan，BGN)与TLR4相互作用共同促进脂多糖/ ATP诱导的小胶质细胞中STAT1/DDX3X/NLRP3轴介导的焦亡[45]。JAK和STAT 之间的分子相互作用介导细胞反应，在神经稳态和神经炎症中都起着重要作用，干扰这些相互作用的分子，特别是靶向 JAK和STAT的小分子，在治疗脊髓损伤的动物研究中显示出良好的疗效和安全性。 2.3.5   自噬信号通路   除此之外，自噬是一种清除机制，其将受损的细胞器以及过量的蛋白质递送到溶酶体。首先具有双层膜结构的囊泡构成原始自噬囊泡，随后外膜与溶酶体融合，形成功能降解的自噬囊泡，通常称为自噬溶酶体[46]。溶酶体中的酶降解自噬囊泡和内膜的内容物，以执行自噬效应。自噬参与生物体的许多生理活动，包括抑制炎性趋化因子释放[47]。研究表明，NLRP3炎性小体的积累会诱导自噬体形成，从而反过来抑制炎性小体的活化[48]。活化的小胶质细胞产生内源性大麻素并表达抑制神经炎症的大麻素受体亚型，在小胶质细胞实验中，应用大麻素受体2(cannabinoid type 2 receptor，CB2R)激活剂下调脂多糖诱导后M1小胶质细胞比例，上调M2小胶质细胞的比例，降低白细胞介素6和白细胞介素1β的表达，促进白细胞介素10的表达，CB2R通过AMPK/UNC-51样激酶(UNC-51-like kinase 1，ULK1)自噬信号通路，增加微管关联蛋白A/B(microtubule-associated protein A/B，LCB/A)的比例，从而促进NLRP3的降解和泛素化，减弱神经炎症反应和逆转小胶质细胞极化，促进脊髓损伤后运动功能的恢复。动物实验与细胞实验相一致，除此之外，CB2R还可以改善脊髓损伤后神经元损伤的扩大、胶质瘢痕形成、继发性神经元凋亡和脱髓鞘[49]。自噬是细胞的一种自我保护机制，是细胞为应对压力而激活的细胞保护反应，通过调控自噬，有助于减轻炎症因子的产生，修复脊髓损伤后的微环境。 2.3.6   其他受体分子   小胶质细胞上有许多受体可以调节脊髓损伤的NLRP3炎性小体，从而缓解神经炎症。电压门控质子通道会选择性地在中枢神经系统中的小胶质细胞中表达，电压门控质子通道会诱导NADPH氧化酶介导活性氧的生成[50]；其敲低会将小胶质细胞极化状态从M1型转变为M2型，阻碍NOX活性，显著导致活性氧减  少[51]。研究表明抑制小胶质细胞的电压门控质子通道通过调节活性氧的生成从而减少NLRP3炎性小体诱导的神经元焦亡，促进脊髓损伤后轴突再生和运动功能恢复[30]。P2X7R是嘌呤能受体P2X家族的独特亚型，是由595个氨基酸组成的ATP门控非选择性阳离子通道。在中枢神经系统中，P2X7R主要在小胶质细胞上表达，小胶质细胞上P2X7R通过NLRP3炎性小体调节脊髓损伤后的神经炎症，揭示P2X7R可能是治疗脊髓损伤的有效靶点[52]。趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type 4，CXCR4)是多功能G蛋白偶联受体，其通常由天然配体CXCL12激活并在各种组织中表达，包括神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞。小胶质细胞表达CXCL12受体CXCR4，CXCL12通过与CXCR4受体结合，减弱小胶质细胞中的NLRP3炎性小体活化来抑制神经炎症[53]，见图5。"

信号通路是指细胞内外的信号分子通过受体、效应器和转录因子等一系列分子的相互作用，传递和调节细胞的生理功能的过程。信号通路在脊髓损伤的发生、发展和修复中发挥着重要作用，不同的信号通路可以影响神经元的存活、死亡、分化和再生，以及胶质细胞、血管细胞和炎症细胞的活化、增殖以及迁移等。NLRP3炎性小体与这些信号通路密切相关，通过调控这些分子，可以抑制NLRP3炎性小体激活，从而缓解小胶质焦亡和促进小胶质细胞向M2极化，减轻脊髓损伤后的神经炎症和维持内环境稳态，促进神经通路的建立。未来可以增加靶向这些分子药物的研究，为脊髓损伤患者带来治疗的希望。 "

2.4   外源性分子调控脊髓损伤后小胶质细胞中NLRP3炎性小体    2.4.1   非编码RNA   非编码RNA是不编码蛋白质的RNA，如微小RNA(microRNA，miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)及环状RNA(circular RNA，circRNA)，均可参与NLRP3炎性小体激活的调节。miRNA是一类长度为22-24个核苷酸的非编码单链RNA分子，广泛参与DNA的转录后调控，其通过上调或下调脊髓损伤后改变的靶基因来调节相关蛋白质的表达。荧光素酶实验证明NLRP3是miR-423-5p的直接分子靶点。miR-423-5p通过抑制NLRP3的表达，从而抑制小胶质细胞M1极化，促进小胶质细胞M2极化，减少神经炎症，促进脊髓损伤恢复[54]。NLRP3也是是miR-223的靶标，NLRP3上调可减弱miR-223的作用，加重小胶质细胞炎症反应，脊髓损伤后从大鼠尾静脉注射Lv-miR-223，促进神经元增加、减轻脊髓中央灰质和背侧白质损伤[55]。MiR-451靶向NLRP3的3′-UTR，负向调控NLRP3表达，从而减轻小胶质细胞炎症因子释放[56]。 长链非编码RNA是长度超过200个核苷酸的非编码RNA，其从外显子、启动子和基因间区域转录而来，转录产生不同种类的长链非编码RNA。X染色体失活特异转录物(X-inactive specific transcript，XIST)是一种广泛报道的长链非编码RNA，其敲低可引起miR-374a-5p上调，从而抑制小胶质细胞自噬，进而抑制小胶质细胞中NLRP3炎性小体活化，减轻脊髓的充血、水肿和结构损伤，锌通过沉默XIST，从而促进小鼠运动功能恢复[57]。环状RNA是另一种具有稳定环状结构的非编码RNA，与终止于5′帽和3′尾的线性RNA相反，其基于3′和5′末端的共价结合形成闭环。Circ0005512敲低可以抑制NLRP3炎性小体及其相关蛋白的表达，从而减少细胞焦亡[58]。除此之外，另一种Circpedia_4214也可以促进NLRP3炎性小体及其相关蛋白表达，双荧光素酶实验显示，CIRCpedia_4214可直接靶向结合 miR-212-5p，从而调控Myd88表达，激活NLRP3炎性小体，加重脊髓损伤的炎症反应。敲低CIRCpedia_4214后可以减少小胶质细胞焦亡和神经元丢失，改善大鼠的运动功能[59]。非编码RNA在脊髓损伤中扮演越来越重要的角色，通过靶向调控非编码RNA，有利于减轻NLRP3的生成，进而调控小胶质细胞极化和焦亡，减轻脊髓损伤后的神经炎症反应，促进脊髓损伤后的功能恢复。见表1。"

2.4.2   中药活性成分   中药活性成分可通过拮抗NLRP3炎性小体，从而介导小胶质细胞极化和焦亡，进而减轻神经炎症，达到治疗脊髓损伤效果。花旗松素是一种天然类黄酮，大量存在于柑橘类水果、葡萄、洋葱和橄榄油中。花旗松素抑制小胶质细胞活化介导的氧化应激。花旗松素通过PI3K/AKT/NLRP3信号传导途径抑制小胶质细胞焦亡，从而促进轴突再生和髓鞘恢复，改善大鼠的运动功能[31]。 甘草甜素一种三萜糖苷复合物，是从药用植物甘草根茎中提取出来的一种具有多种生理功能的有效活性成分，口服甘草酸抑制创伤性脊髓损伤后NLRP3炎性小体活化并促进小胶质细胞M2极化从而改善创伤性脊髓损伤后的功能恢复，可抑制神经活性因子的释放和神经元凋亡，促进脊髓损伤后神经元存活和功能恢复[60]。 松果菊苷是从肉苁蓉中分离出来的一种苯乙醇苷，在中国已用作草药数百年，其通过抑制核转录因子κB通路的激活，从而降低NLRP3炎性小体，减轻神经炎症；除此之外，其可抑制小胶质细胞活性氧的产生，保护线粒体免受损伤及逆转NEK7的表达，从而有效促进脊髓损伤后后肢运动功能的恢复，减少神经元丢失，改善脊髓严重的纹理紊乱及异常的组织排列[35]。山奈酚是一种具有良好特征的天然多酚，也是最常见的膳食类黄酮之一，富含于大多数植物性食物中，包括茶、西兰花、葡萄柚、羽衣甘蓝和卷心菜。山奈酚通过抑制NOX4减少活性氧的产生，抑制p38 MAPK和JNK的磷酸化，从而抑制核转录因子κB信号通路，进而抑制NLRP3炎性小体的形成，促进脊髓损伤后前肢功能恢复，改善脊髓损伤后脊髓结构紊乱，促进脊髓灰质和白质外侧索恢复[38]。丹皮酚、雷公藤红素、马钱素和虎杖苷均通过核转录因子κB通路靶向调控NLRP3炎性小体，抑制小胶质细胞焦亡和促进小胶质细胞向M2极化，从而促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复和保护神经元[61-63]。 中药作为天然药物的丰富来源，其活性成分在脊髓损伤后的抗炎、抗焦亡及抗应激扮演重要角色，其作为一种重要的辅助治疗方法，有助于修复受损的脊髓，见表2。"

2.4.3   干细胞疗法   干细胞可以在损伤组织区域释放许多有益因子，从而具有治疗脊髓损伤潜力，其可通过多种机制改善脊髓损伤的功能恢复，例如神经保护、免疫调节和轴突的发芽及再生。干细胞可以抑制小胶质细胞极化及焦亡从而为治疗脊髓损伤提供了可行性方法，例如人脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞和人牙髓干细胞等。人牙髓干细胞是来源于颅神经嵴的干细胞，并且就其胚胎起源而言与脊髓相似，其培养液通过抑制NLRP3来减轻小胶质细胞焦亡，从而促进脊髓损伤后的轴突再生和髓鞘恢复，减少胶质瘢痕形成，促进诱发电位恢复[65]。MAPK活化蛋白激酶2(MAPK activated protein kinase 2，MK2)作为p38 MAPK的底物参与细胞周期、细胞迁移、肌动蛋白重塑和炎症的调节。三四脯氨酸(Tristetraprolin，TTP)是NLRP3炎性小体的负调节因子，通过靶向结合NLRP3的3′-UTR区域抑制NLRP3的表达[66]。脊髓损伤后MK2过度表达，抑制TTP活性，从而上调NLRP3及其相关炎症因子水平，小胶质细胞极化状态也会被破坏，引起细胞极化至M1状态。人脐带间充质干细胞移植联合超声波治疗可通过抑制MK2的磷酸化来下调NLRP3表达水平，从而减少炎症反应，改善免疫微环境，挽救脊髓损伤[67]。研究表明，活化的小胶质细胞会分泌半乳糖凝集素3(Gal-3)，通过活性氧/硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin-interacting protein，TXNIP)/NLRP3轴调节神经炎症[68]。骨髓间充质干细胞培养液通过限制Gal-3/NLPR3的表达，从而抑制M1小胶质细胞/巨噬细胞极化，促进M2小胶质细胞/巨噬细胞极化来减少炎症反应，减轻大鼠的脊髓损伤后的出血和水肿，改善脊髓损伤后的运动功能[69]。 干细胞是近几年来研究的热点，临床前研究带来了令人鼓舞的前景，但临床试验的结果却很弱且相互矛盾，通过干细胞移植及干细胞所产生的培养液可以减轻脊髓损伤后的小胶质细胞炎症，挽救脊髓损伤[70-72]，见表3。"

2.4.4   代谢物   生物在进行生命活动后会产生各种各样的代谢物，其有利也有弊，通过调控代谢产物从而调控NLRP3炎性小体，有助于缓解脊髓损伤。酮代谢物β-羟基丁酸可抑制NLRP3炎性小体活化，并促进脊髓损伤后巨噬细胞/小胶质细胞从促炎性活化状态M1向更具保护性的活化状态M2极化，减轻神经炎症，从而改善脊髓损伤后的运动功能和促进其电生理恢复[70]。5-甲氧基色氨酸是色氨酸的代谢物，通过对p38-MAPK信号通路和NLRP3/caspase-1表达的负调节，降低M1小胶质细胞活化，并减少炎症细胞因子的产生。在动物实验中，其能降低脊髓损伤小鼠神经胶质瘢痕相关的神经炎症水平，在给药后可调节神经完整性和神经元存活以及改善运动功能[71]。ω-3多不饱和脂肪酸可以显著减弱脊髓损伤抑制NLRP3炎性小体及抑制脊髓小胶质细胞增生，从而减轻炎症因子的释放，其还可减轻脱髓鞘，从而改善脊髓损伤大鼠运动能力[72]。饮食治疗在脊髓损伤治疗中扮演越来越重要的角色，通过调控不同种类的食物摄入，可以调节代谢产物，进而缓解脊髓损伤的炎症，见表3。 2.4.5   特异性抑制剂   近年来，已经研究出许多NLRP3抑制剂来抑制NLRP3炎性小体及其相关上下信号分子。MCC950是研究最多且特异性的NLRP3炎性小体抑制剂，其不抑制NLRP1和AIM2炎性小体。MCC950与NLRP3中的NACHT结构域结合，阻断其水解ATP的能力，从而抑制ASC的募集和caspase-1的裂解。除此之外，其可减少小胶质细胞促炎细胞因子分泌，增加小胶质细胞抗炎细胞因子的产生，并将小胶质细胞的表型转变为抗炎状态[73]。MCC950可显著增强脊髓损伤后小鼠运动功能的恢复和减轻神经元的损伤[74]。小分子CY-09也可以特异性抑制NLRP3与ATP结合从而阻断ATP酶活性，其通过抑制3′-O-(4-苯甲酰苯甲酰基)腺苷-5′-三磷酸(3′-O-(4-benzoylbenzoyl) adenosine 5′-triphosphate，BzATP)，进而上调P2X7受体来调节NLRP3炎性小体，最终抑制脊髓损伤后的神经炎症[75]。BAY11-7082是一种磺酸衍生物，具有多种药理活性，与CY-09的作用类似，其可抑制小胶质细胞活化和中性粒细胞浸润，从而减少神经胶质形成和改善线粒体功能障碍，进而减少神经元死亡和促进脊髓损伤小鼠的运动恢复[76]。越来越多的特异性抑制剂用于脊髓损伤的治疗，这些特异性抑制剂大部分在脊髓损伤中表现出良好的效果，但尚未得到批准用于治疗脊髓损伤，未来的工作需要过渡到临床试验，以测试其安全性和治疗效果。 2.4.6   其他外源性分子   除此之外，还有许多因素可以调控小胶质细胞中的NLRP3炎性小体，离子稳态紊乱是脊髓损伤过程的一部分，在脊髓损伤的早期阶段起着不可或缺的作用，通过拮抗离子通道有利于保护内环境稳态平衡，促进脊髓损伤后的恢复。利鲁唑是一种钠通道阻滞剂和谷氨酸能神经传导抑制剂，利鲁唑通过抑制NLRP3炎性小体活化，从而减少小胶质细胞焦亡，降低炎症反应，减轻脊髓实质破坏，促进脊髓损伤大鼠功能恢复[77]。3，4-二氢萘-1(2H)-酮衍生物抑制脂多糖刺激的小胶质细胞中的氧化应激活性氧的产生、核转录因子κB信号通路以及NLRP3炎性小体相关蛋白的表达；除此之外，其还可以抑制小胶质细胞M1极化，但不会影响M2型小胶质细胞[78]。亚甲蓝是线粒体靶向细胞毒性试剂，亚甲蓝通过减少ASC与NLRP3的结合以抑制小胶质细胞中活性氧产生。体内及体外实验均表明亚甲蓝通过抑制小胶质细胞NLRP3炎症小体活化减轻脊髓损伤后急性神经炎症[79]。总之，越来越多的策略可用于调控NLRP3炎性小体，从而调节小胶质细胞的极化和焦亡，为脊髓损伤患者带来治疗的希望。 总之，大量策略可以调控脊髓损伤后小胶质细胞中NLRP3炎性小体。首先，非编码RNA，如miRNA、lncRNA和circRNA可以参与NLRP3炎性小体的激活调节。其次，中药活性成分，如花旗松素、丹皮酚和甘草甜素等，可以通过拮抗NLRP3炎性小体，减轻神经炎症，促进神经元再生，恢复神经稳态，从而治疗脊髓损伤。此外，干细胞可以释放许多有益因子，改善脊髓损伤的功能恢复，生命活动会产生各种各样的代谢物，如β-羟基丁酸、5-甲氧基色氨酸和ω-3多不饱和脂肪酸，其可以调控NLRP3炎性小体，通过抑制这些代谢物的产生，有助于神经通路的再次建立。最后，相关的特异性抑制剂如MCC950和CY-09，它们可以抑制NLRP3炎性小体及其相关上下信号分子。近年来，干细胞外泌体广泛应用于脊髓损伤的治疗，其主要依赖于非编码RNA发挥功能，但与NLRP3炎性小体之间的研究较少，未来可以增加这方面的研究，NLRP3炎性小体调控是一个复制且深入的领域，需要更多的研究来深入理解这些机制并开发出有效的治疗方法。"