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    脊髓损伤重塑皮质脊髓运动神经元突触输入的作用
  • 图2|病毒注射位点及荧光蛋白在各级神经元的表达情况

    结果:在初级运动皮质,经脊髓注射感染AAV-hSyn-SV40-NLS-Cre的皮质脊髓运动神经元合成Cre重组酶。在胞体内,对Cre重组酶依赖的包含TVA蛋白和RG蛋白序列的腺相关病毒DNA被Cre重组酶剪切和重组,从而诱导TVA和RG蛋白的表达。表达TVA蛋白的神经元会发出红色荧光,见图2A。腺相关病毒注射14 d后,TVA和RG蛋白在初级运动皮质脊髓运动神经元内已经充分表达。此时在初级运动皮质注射表达绿色荧光蛋白的假性狂犬病毒,假性狂犬病毒与皮质脊髓运动神经元内TVA结合,从而进入皮质脊髓运动神经元。当假性狂犬病毒进入初级运动皮质脊髓运动神经元胞体后,病毒基因组进行复制,并加入RG蛋白组装成为有跨突触能力的狂犬病毒颗粒。这些狂犬病毒颗粒逆向跨单突触感染直接支配初级运动皮质脊髓运动神经元的输入神经元,可大量表达绿色荧光蛋白,使得这些输入神经元在荧光显微镜成像中清晰可见,见图2B。由假性狂犬病毒介导的逆向跨单突触感染实验中的起始神经元,是既被表达假性狂犬病毒辅助蛋白的腺相关病毒(红色荧光)感染,又被假性狂犬病毒(绿色荧光)感染的神经元。在小鼠初级运动皮质中,观察到黄色(红色和绿色荧光叠加的结果)起始神经元,见图2C

    图4|假手术组与脊髓损伤组小鼠全脑范围内多脑区假性狂犬病毒逆向示踪标记的输入神经元

    结果:在皮质区域,两组输入神经元最多的区域均是躯体运动区(somatomotor area,MO) ,见图4A,图5A。此外,初级运动皮质还与听觉区(auditory areas,AUD)、压后皮质(retrosplenial area,RSP)等皮质结构有解剖学连接,见图4A,5A。

    在间脑,输入神经元主要分布于背侧丘脑,背侧丘脑为大脑重要的感觉传导接替站。来自全身的上行感觉传导通路(除听觉以外)均在背侧丘脑内进行换元,背侧丘脑发出大量神经元投射到大脑皮质。在背侧丘脑内,两组输入神经元最多的区域为背侧丘脑腹侧组,见图4B,5B。背侧丘脑其余区域也与初级运动皮质有解剖学连接,如背侧丘脑板内核(intralaminar nuclei of the dorsal thalamus,ILM)、背侧丘脑背内侧核(medial group of the dorsal thalamus)。此外,初级运动皮质也接受下丘脑于未定带(zona incerta,ZI)的神经元输入,见图4B,图5B。
    在中脑,两组输入神经元主要分布于纹状体与中脑运动核团,如顶盖前区前核 (anterior pretectal nucleus,APN)、无名质(substantia innominata,SI)、苍白球(globus pallidus,GP)和外侧视前区(lateral preoptic area,LPO),见图4C,5C。

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  • 发布日期: 2023-11-25  浏览: 84