脐血干细胞

    MAFA-PDX1过表达慢病毒感染人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞的分化
  • 图4|MAFA-PDX1慢病毒感染人脐带间充质干细胞72 h倒置荧光显微镜下照片(标尺为100 μm)

    结果:图4为MAFA-PDX1慢病毒感染HuMSCs 72 h后倒置荧光显微镜下照片,感染复数值为5时细胞发出的绿色荧光较弱,而感染复数值为10,20,30时细胞发出的绿色荧光逐渐增 强。

    图6|人脐带间充质干细胞经3种方案诱导后的细胞形态学改变(光镜,×40)

    结果:图6。①方案A(单纯慢病毒组):诱导第5天,细胞形态失去明显成纤维结构,细胞呈圆形或者类圆形,体积略增大,折光性增强,并开始出现细胞聚集;诱导第11天,部分细胞聚集成团,并呈半悬浮状态。无论是第5天还是第11天,方案A诱导分化后聚集成团细胞数量均少于方案B和方案C。②方案B(先药物诱导再加慢病毒组):诱导第5天,部分细胞呈圆形或多角形,周边突出逐渐缩短,部分细胞聚集成团,但成团状细胞数量较少,半悬浮生长;第11天细胞聚集生长更为明显,出现聚集生长的胰岛样细胞团。方案B第11天聚集成团的细胞数量明显多于其余2种诱导方案。③方案C(慢病毒和药物诱导同时进行组):诱导第5天,部分细胞呈圆形或多角形,周边突出逐渐缩短,部分细胞聚集成团,半悬浮生长,聚集成团的细胞较方案A和方案B多;诱导第11天细胞生长缓慢,细胞聚集成团数量较第5天减少。

    图11|三种方案诱导后双硫腙染色结果(光镜,×100)

    结果:经药物诱导或(和)MAFA-PDX1基因共同修饰后,用双硫腙染色来鉴别诱导后细胞内锌离子的鳌合情况,见图11。在倒置相差显微镜下可观察到,经方案A、方案B、方案C诱导第11天部分细胞被双硫腙染成棕红色,提示诱导后的细胞含有锌离子,而对照组没有染色。方案A、C中部分细胞可被染成棕红色,但颜色较浅;方案B中部分小岛状细胞被染成棕红色,颜色较深。同时,在双硫腙染色过程中,随着染色时间的延长,多数贴壁无染色细胞变成悬浮细胞,只有部分染色细胞仍然保持贴壁状态。

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  • 发布日期: 2023-07-17  浏览: 158