干细胞移植
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图2｜神经干细胞形态学观察及免疫荧光法鉴定
结果：分离后24 h可见单个悬浮细胞、不规则悬浮细胞团及部分贴壁细胞混合存在，细胞均为透亮，呈圆形或椭圆形。两三天后可见细胞聚集成神经球，并悬浮生长，见图2A。加血清诱导分化2 d后可见细胞多贴壁，并生长出突起。免疫荧光示细胞Nestin表达为阳性，见图2B。加入血清诱导分化后，MAP2及GFAP表达为阳性，见图2C，D。
图3｜两组神经干细胞迁移、分化情况(×400)
结果：免疫荧光显示，移植后21 d，2个移植组的绿色荧光蛋白转染神经干细胞均可迁移入中枢神经系统，且在3个解剖部位脑室内注射组的阳性细胞数均多于静脉注射组，即第三脑室周围[(5.67±0.13) vs. (2.99±0.07)个/mm2，P < 0.05]，脊髓中央管[(2.68±0.06) vs. (0.54±0.04)个/mm2，P < 0.05]，腰骶膨大处脊髓前角[(5.35±0.13) vs. (4.59±0.11)个/mm2，P < 0.05]。脊髓前角绿色荧光蛋白和NeuN的荧光双标显示，两组移植的神经干细胞均能分化为神经元，但数量均较少，无统计学差异[(0.89±0.02) vs. (0.82±0.02)个/mm2，P > 0.05]。两组移植源性神经干细胞在脊髓前角向神经元分化的比例也较小[(16±3)% vs. (17±2)%，P > 0.05]，见图3。
图7｜各组小鼠腰骶膨大脊髓运动神经元表达
结果：Nissl染色显示3组运动神经元数量组间无统计学差异，分别为(5.16±1.21)，(4.72±1.04)，(4.43±0.87)个/mm2(P > 0.05)。NeuN阳性细胞数组间无统计学差异，分别为(5.11±1.32)，(4.65±0.97)，(4.47±0.84)个/mm2(P > 0.05)。ChAT的相对表达量组间无统计学差异，分别为(0.39±0.07)，(0.36±0.06)，(0.32±0.08)个/mm2(P > 0.05)，见图7。
图8｜各组小鼠腓肠肌苏木精-伊红染色(×100)
结果：3组肌肉均有不同程度的变性、坏死、萎缩等损伤，但也表现出各自的特点。脑室内注射组细胞核数量增加，肌肉细胞变薄，见图8A；静脉注射组肌肉细胞颜色变浅，肌肉条纹消失，见图8B；对照组出现大量脂肪变性和大量炎性细胞浸润，见图8C。