干细胞移植

尾静脉注射骨髓间充质干细胞修复衰老小鼠颅骨损伤

• 图1｜小鼠骨髓间充质干细胞培养形态

  

  结果：倒置显微镜下观察到原代提取的小鼠骨髓间充质干细胞在培养第3天时可见少量细胞贴壁且伸展为短梭形，见图1A，B。随着培养时间的延长，细胞数量不断增加，待传至第3代时细胞伸展为长梭形或多角形并融合成片，见图 1C，D。
  

  
  

  图4｜各组小鼠颅骨组织苏木精-伊红染色(标尺为50 μm)

  

  结果：术后1周，各组缺损区域均有纤维状组织生成；术后3周，各组缺损区域出现新生骨组织，骨髓间充质干细胞注射组新生骨组织量显著多于生理盐水注射组，且已有板状骨的基本形态，新生骨基质量比较：年轻小鼠实验组>衰老小鼠实验组>年轻小鼠对照组>衰老小鼠对照组，见图4。

  
  

  图5｜各组小鼠颅骨组织Masson染色(标尺为50 μm)

  

  结果：骨组织中的主要成分胶原蛋白被染成蓝色，见图5。

  
  

  图6｜各组小鼠颅骨组织非线性光学显微镜成像和定量分析

  

  结果：利用多波长激光共聚焦原位高分辨拉曼成像系统对小鼠颅骨样品进行检测，FV10-ASW4.2软件进行三维立体重建，绿色荧光强度反映骨缺损区域胶原生成情况，见图6。

  
  

  图7｜各组小鼠颅骨组织Sirt1免疫组化染色和定量分析

  

  结果：利用免疫组织化学染色检测骨组织样本成骨细胞中Sirt1蛋白的表达，见图7。

  
  

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发布日期： 2022-01-25  浏览： 555