Abstract:

背景：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体可以通过上调死亡受体5蛋白的表达诱导大鼠肝星状细胞凋亡。
目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞对肝星状细胞死亡受体5和Caspase-3蛋白表达的影响，探讨骨髓间充质干细胞诱导肝星状细胞凋亡及其机制。
方法：贴壁筛选法培养、纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞，传至第3代使用；大鼠原代肝星状细胞和肝纤维原细胞系冻融后传代使用。应用6孔培养板，建立上下双层细胞共培养体系，常规培养。将细胞分为4组：①空白对照组：肝星状细胞和骨髓间充质干细胞分别单独培养。②阴性对照组：肝纤维原细胞与肝星状细胞共培养(模拟星状细胞体内生长环境)。③骨髓间充质干细胞与肝星状细胞共培养组。④实验组：1.5 mg/L TRAIL多克隆抗体与骨髓间充质干细胞作用6 h后，不换液，再与肝星状细胞共培养。
结果与结论：在共培养组中肝星状细胞的增殖降低，凋亡增加，且肝星状细胞死亡受体5、Caspase-3蛋白的表达均显著升高，并呈时间依赖性，且与其他组比较差异有显著性意义(P < 0.01)。实验组Caspase-3和死亡受体5蛋白的表达在共培养的各个时间段均低于共培养组，与共培养组比较差异有显著性意义(P < 0.01)。提示骨髓间充质干细胞与肝星状细胞共培养能抑制肝星状细胞的增殖，促进肝星状细胞的凋亡，其机制可能为骨髓间充质干细胞旁分泌肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体通过上调Caspase-3和死亡受体5蛋白的表达实现的。

Key words: 死亡受体5, 骨髓间充质干细胞, 肝星状细胞, 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体, Caspase-3, 干细胞