2.1   体外培养的骨髓间充质干细胞具备成骨、成软骨、成脂诱导分化能力   成骨诱导21 d，茜素红染色可见红色颗粒物，见图2A；成软骨诱导7 d，甲苯胺蓝染色可见大量蓝色颗粒物，见图2B；成脂诱导21 d，油红O染色可见大量红色脂滴，见图2C。表明体外培养的骨髓间充质干细胞经诱导后可向成骨、成软骨、成脂细胞分化。"

2.2   不同粗糙度的PDMS皿底表征   为了制备具有不同表面形貌的PDMS， 选用120，1 000，10 000目砂纸为模具，标记为PDMS-120M，PDMS-1000M和PDMS-10000M，未与砂纸接触直接与空气接触的PDMS为对照，制作了4种不同表面形貌的PDMS，用于研究不同表面形貌PDMS对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制。宏观上看PDMS-120M表面具有明显的起伏，而随着砂纸目数的增大，PDMS表面的起伏越趋近于平坦，未与砂纸接触的PDMS表面较为光滑。通过扫描电镜可以看到PDMS表面随着砂纸目数的减小，孔径越来越大，峰间距逐渐扩大，见图3A。3D轮廓仪可以看到随着砂纸目数的减小，PDMS波峰的平均高度逐渐增大，PDMS、PDMS-10000M、PDMS-1000M和PDMS-120M粗糙度分别为(0.035±0.360)，(2.92±1.32)，(13.51±2.11)，(34.50±6.08) μm， 见图3B，C。"

2.3   静态条件下不同粗糙度PDMS表面对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响   成骨诱导7 d，RT-qPCR检测结果显示与对照组相比，PDMS-1000M使Runt相关转录因子2 mRNA表达量增加了138.9%，使Ⅰ型胶原mRNA表达量增加了360.1%，使骨钙素mRNA表达量增加了269.4%，见图4。说明静态条件下PDMS-1000M表面促进骨髓间充质干细胞成骨分化的效果更好。"

2.4    不同拉伸幅度对相对光滑PDMS表面骨髓间充质干细胞成骨分化的影响   拉伸时同时进行成骨诱导3 d，RT-qPCR检测结果显示在4%大应变拉伸幅度下成骨基因Runt相关转录因子2、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶表达量最高，见图5。"

2.5   不同拉伸幅度对PDMS-1000M表面骨髓间充质干细胞成骨分化的影响   拉伸时同时进行成骨诱导3 d，RT-qPCR检测结果显示在2%拉伸幅度下成骨基因Runt相关转录因子2、Ⅰ型胶原、骨钙素、碱性磷酸酶表达量最高，明显高于4%，6%拉伸组(P < 0.01，P < 0.005)，见图6。"

2.6   2%拉伸幅度下不同糙度PDMS表面对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响    2.6.1   对骨髓间充质干细胞增殖的影响   随着培养时间的延长，各组细胞显著增殖，第5天PDMS-1000M表面细胞增殖最为明显，比PDMS组高40.5%(P < 0.001)，比PDMS-10000M组高33.0%(P < 0.001)，比PDMS-120M组高28.1%(P < 0.001)，见图7，说明2%拉伸幅度下PDMS-1000M表面促进骨髓间充质干细胞增殖效果最显著。"

2.6.2   对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响   成骨诱导3 d，RT-qPCR检测结果显示PDMS-1000M表面骨髓间充质干细胞的Ⅰ型胶原、骨钙素、转录因子 Osterix、碱性磷酸酶mRNA表达量均高于PDMS、PDMS-10000M、PDMS-120M组，见图8。成骨诱导7 d，Western blot检测结果显示PDMS-1000M表面骨髓间充质干细胞的Ⅰ型胶原、Runt相关转录因子2、骨钙素的蛋白表达量均高于PDMS、PDMS-10000M、PDMS-120M组，见图9。 "

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2.6.3   碱性磷酸酶染色结果   对2%拉伸幅度下不同粗糙度PDMS表面骨髓间充质干细胞成骨诱导7 d后，进行碱性磷酸酶(早期成骨的典型标志物)染色，结果显示，PDMS-1000M具有更多的碱性磷酸酶染色阳性细胞，见图10。"

2.6.4   茜素红染色结果   PDMS-1000M与其他组相比有更多的钙沉积，通过溶解钙结节，相比PDMS组，PDMS-1000M使晚期钙沉积增加了52.3%，见图11。这也进一步说明了2%拉伸条件下PDMS-1000M促进晚期成骨分化的效果。"

2.7   2%拉伸幅度下不同粗糙度PDMS表面骨髓间充质干细胞中SIRT1表达   成骨诱导3 d，RT-qPCR检测结果显示PDMS-1000M组SIRT1的mRNA表达量明显高于PDMS组、PDMS-10000M组(P < 0.001)和PDMS-120M组(P < 0.005)，见图12。PDMS-1000M组SIRT1蛋白表达量明显高于PDMS组、PDMS-10000M组(P < 0.005)和PDMS-120M组(P < 0.05)，见图13。"

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