其他干细胞
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图2｜人羊膜上皮细胞形态、生长增殖情况
结果：人羊膜上皮细胞呈现典型上皮细胞状态，细胞贴壁初期显示出强折射率，形成单层黏附细胞，像铺路石样生长。在实时细胞分析S16仪中显示，刚分离的新鲜人羊膜上皮细胞在接种12 h时开始贴壁并进入停滞期，24 h左右进入对数生长期，并在48 h进入平台期。其中过量的细胞会加速培养基中营养物质的消耗，促使细胞群落提前进入衰落期，见图2。
图3｜人羊膜上皮细胞鉴定
结果：第1代人羊膜上皮细胞免疫荧光染色显示上皮细胞特征标记物CK19 阳性表达，间充质干细胞特征性标记物波形蛋白阴性表达，见图3A。流式细胞术检测人羊膜上皮细胞表面标志物的表达，结果显示CD34、CD45，HLA-DR呈阴性表达， CD73、CD90、CD105、CD29、EPCAM、CD324呈阳性表达，见图3B。成骨诱导培养基对人羊膜上皮细胞进行诱导培养后，使用茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察，结果显示在诱导分化7 d和21 d表现出不同的成骨能力，在7 d时，茜素红染色显示仅少量钙结节，碱性磷酸酶染色显示少许蓝染；在21 d时，茜素红显示出大片钙结节，碱性磷酸酶大片蓝染，见图3C。
图4｜人羊膜上皮细胞转染后的YAP1基因、蛋白表达量
结果：转染48 h后，免疫荧光显示人羊膜上皮细胞转染效率大于75%；siRNA-NC、1#siRNA-YAP1、2#siRNA-YAP1、3#siRNA-YAP1转染3 d后，使用PCR检测YAP1 mRNA表达，转染7 d后使用Western blot检测YAP1蛋白表达，结果显示1#siRNA-YAP1组中YAP1基因相对表达量显著降低，1#siRNA-YAP1组中YAP1蛋白相对表达量也显著降低，见图4。
图5｜各组人羊膜上皮细胞碱性磷酸酶染色(标尺为200 μm)
结果：成骨细胞与人羊膜上皮细胞共培养7 d进行碱性磷酸酶染色显示，随共培养时间延长染色程度增加。在加入siRNA-YAP1沉默后，碱性磷酸酶染色显示人羊膜上皮细胞成骨能力明显减弱，见图5。