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miR-29a调控水通道蛋白4抑制过氧化氢诱导的星形胶质细胞凋亡

• 图1｜小鼠星形胶质细胞鉴定及过氧化氢诱导小鼠星形胶质细胞损伤

  

  结果：原代星形胶质细胞传代培养3代后，细胞体积增大，形态不规则，胞质丰富。使用胶质纤维酸性蛋白作为星形胶质细胞标记物验证原代培养的星形胶质细胞，DAPI用于活细胞核染色，见图1A。过氧化氢可导致星形胶质细胞损伤，且随着过氧化氢浓度的增加，星形胶质细胞活性下降(P < 0.05)，见图1B。Western blot结果显示，过氧化氢处理星形胶质细胞24 h后，促凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3水平升高(P < 0.05)，而抑凋亡相关蛋白Bcl-2水平降低(P < 0.05)，提示过氧化氢可诱导星形胶质细胞凋亡，见图1C，D。当过氧化氢浓度达到100 μmol/L时，星形胶质细胞凋亡相关蛋白表达明显发生变化，故选100 μmol/L浓度的过氧化氢进行后续实验。
  

  图4｜过表达miR-29a对小鼠脊髓损伤部位水通道蛋白4(AQP4)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响

  

  结果：通过慢病毒注射的方式，在小鼠脊髓损伤部位过表达miR-29a，术后第7天检测小鼠脊髓损伤部位水通道蛋白4和胶质纤维酸性蛋白表达变化。免疫组织荧光染色实验结果显示：与空载体组比较，miR-29a过表达组水通道蛋白4荧光表达显著减少(P < 0.05)，同时胶质纤维酸性蛋白荧光表达也显著减少(P < 0.05)，见图4。

  
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发布日期： 2022-11-29  浏览： 239