骨髓干细胞
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图1｜不同代数的骨髓间充质干细胞生长情况(×40)
图2｜骨髓间充质干细胞的成骨、成脂分化能力
结果：48 h后镜下可见少部分呈多角形的贴壁细胞，大小不一；3 d后贴壁的细胞伸展较为明显，呈梭形或多角形等；5 d左右细胞紧密融合在一起形成明显的细胞集落；7-10 d细胞可长满培养瓶底。随着换液和传代，细胞形态逐渐变得均匀一致，胞体饱满，细胞密集排列相互挤压，呈梭形，漩涡状均匀排列，见图1。第3代大鼠骨髓间充质干细胞分别进行成骨、成脂诱导21 d后可见钙化结节及脂滴形成，见图2。
图5｜各组骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶染色
图7｜各组骨髓间充质干细胞的茜素红染色及半定量检测
结果：各组成骨诱导4 d和7 d后，碱性磷酸酶染色显示：Tideglusib+正常对照组的碱性磷酸酶染色程度最深，高糖组的碱性磷酸酶染色程度低于正常对照组，Tideglusib+高糖组的碱性磷酸酶染色程度优于高糖组，见图5。碱性磷酸酶活性定量测定显示：在第4，7天时，Tideglusib+正常对照组的碱性磷酸酶活性高于其他各组(P < 0.05)；高糖组的碱性磷酸酶活性低于其他各组(P < 0.05)；Tideglusib+高糖组的碱性磷酸酶活性高于高糖组(P < 0.05)，见图6。成骨诱导21 d后，茜素红染色显示：Tideglusib+正常对照组茜素红特异性红染的钙化结节较多，染色较深，红染斑块面积较大，钙化结节形成能力较强；正常对照组的红染钙化结节数量低于Tideglusib+正常对照组，且红染斑块面积小于Tideglusib+正常对照组；Tideglusib+高糖组的红染结节少于正常对照组，且斑块较小；高糖组的红染结节数量和面积最小。钙化结节半定量检测结果显示，Tideglusib+正常对照组的钙化结节数量最多，差异均有显著性意义(P < 0.05)，高糖组的钙化结节数量最低，差异有显著性意义(P < 0.05)，Tideglusib+高糖组的钙化结节数量大于高糖组，差异有显著性意义(P < 0.05)，见图7。
图8｜各组骨髓间充质干细胞培养24 h后鬼笔环肽染色(×200)
结果：使用荧光显微镜观察骨髓间充质干细胞在不同培养条件下培养24 h后细胞初期黏附形态，正常对照组的骨髓间充质干细胞多呈梭形或者多角形，胞内肌动蛋白丝清晰可见，细胞骨架与细胞长轴走形一致；Tideglusib+正常对照组相较于正常对照组细胞铺展更佳、面积更大，肌动蛋白丝数量更多；高糖组的细胞铺展不良，内部的肌动蛋白丝排列紊乱，细胞骨架卷曲，与细胞长轴不平行；与高糖组相比，Tideglusib+高糖组细胞内肌动蛋白丝排列更加规律，细胞铺展面积更大，细胞形态得到明显改善，见图8。