胚胎干细胞

    外胚间充质干细胞条件培养基冻干粉复合纤维蛋白胶修复大鼠皮肤损伤
  • 图1|各组SD大鼠皮肤创面的愈合情况

    结果:各组动物手术后伤口呈鲜红色,5 min后通常没有活动性出血。损伤对照组的创面呈鲜红色,然后血液凝固形成覆盖创面的血痂,随时间延长血痂逐渐变为深黑色,此组动物创面缩小最为缓慢,至21 d创面仍然未完全愈合。纤维蛋白胶组和EMSCs-CM冻干粉复合纤维蛋白胶组在手术后第1天可见创面覆盖有白色的纤维蛋白胶,此后白色的纤维蛋白胶逐渐固化,形成灰白色纤维蛋白膜紧密覆盖在创面上,随后,由于组织再生,各组的伤口面积逐渐减少,7 d以后纤维蛋白膜逐渐降解,膜下可见明显的再生皮肤开始从伤口边缘向创面中央生长,使得创面缩小,并取代纤维蛋白胶。3组创面愈合的速度顺序:EMSCs-CM冻干粉复合纤维蛋白胶组>纤维蛋白胶组>损伤对照组,见图1。 

    图2|各组大鼠皮肤组织切片苏木精-伊红染色(标尺为100 μm)

    结果:正常皮肤和创面再生皮肤组织切片苏木精-伊红染色观察结果表明,EMSCs-CM冻干粉与纤维蛋白胶联合使用可促进大鼠皮肤损伤后的愈合和再生。正常皮肤由完整的表皮和真皮组成,真皮内可见大量毛囊和皮脂腺,见图2A。与正常皮肤相比,损伤对照组皮肤再生不完全,再生表皮结构疏松,表面角化层不明显,真皮内可见大量炎性细胞,见图2B。纤维蛋白胶组伤口愈合的皮肤中可检测到表皮和真皮,但再生的皮肤很薄,真皮毛囊和皮脂腺稀疏,见图2C。EMSCs-CM冻干粉复合纤维蛋白胶组创面表皮和真皮在21 d内再生修复,新表皮较厚,分层明显,上皮表面有角质化,再生组织包括表皮、真皮、毛囊和皮脂腺,新皮肤与伤口周围的皮肤完全融合,没有明显的瘢痕,见图2D

    图3|各组大鼠皮肤组织切片CK8的免疫组织化学染色(标尺为100 μm)

    结果:角化蛋白CK8(棕黄色)主要定位于表皮和毛囊的近表面部分。正常皮肤表皮表面呈现波浪状,很多毛囊开口,表面有角质层;真皮内毛囊和皮脂腺密集分布,见图3A。损伤对照组再生的表皮(角化蛋白CK8阳性染色)薄,基底光滑,表面没有明显的角化层,见图3B。纤维蛋白胶组再生的表皮比损伤对照组厚,真皮中有少量浅表毛囊或皮脂腺,见图3C。EMSCs-CM冻干粉复合纤维蛋白胶组创面新生表皮较厚,其表面有角质层,真皮内有不同发育阶段毛囊和皮脂腺,见图3D

    图4|各组大鼠皮肤组织切片P63的免疫组织化学染色(标尺为50 μm)

    结果:P63主要通过免疫组化在表皮基底层以及毛囊和皮脂腺的干细胞核(棕黄色)中检测到。正常皮肤的表皮中较少检测到P63阳性细胞,见图4A,表明表皮已高度分化和成熟。P63阳性细胞主要位于毛囊和皮脂腺,毛囊内可见毛干深部的P63阳性细胞密集排列,此处为毛干的生长点。损伤对照组创面的再生表皮薄,基底部平整,P63阳性细少,表面无明显角化层。在再生皮肤与周边正常皮肤交界处真皮内可见少量残留的毛囊和皮脂腺,再生表皮下真皮内可见空洞(脓肿)和炎症细胞,见图4B。纤维蛋白胶组创面的再生表皮较薄,表皮的基底层P63阳性细较少。真皮内有少量新生的未发育成熟的毛囊,其深部有P63阳性细胞,见图4C。EMSCs-CM冻干粉复合纤维蛋白胶组创面新生表皮较厚,其表面有角质层。表皮的基底层可见密集分布的P63阳性细胞,说明此处表皮为未分化成熟的新生上皮组织。真皮内有成簇分布的毛囊和皮脂腺,此处可见P63阳性细胞,毛囊内未见毛干,表明毛囊和皮脂腺为再生组织,见图4D


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  • 发布日期: 2022-10-18  浏览: 372