其他干细胞
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图1｜电压对转染效果的影响
结果：小鼠子宫内电穿孔转染的效果主要受电压和脉冲数的影响[20]，电压太小无法将DNA成功转入神经前体细胞内，电压太高又会致使胎鼠死亡，因此探索出合适的电压至关重要。为了探索出更好的用于小鼠子宫内电穿孔转染条件，将电转电压设为4个梯度，分别为38，40，42，45 V，在其他参数不变的条件下(5个电脉冲数；每个电脉冲持续50 ms；2个电脉冲之间间隔1 s)进行活体子宫内电转染。首先向每只胎鼠的侧脑室内注射质量浓度约为2 000 mg/L的pEx-4-eGFP质粒后立刻进行电转染，电转结束后将子宫放入孕鼠腹腔中，滴加预热的生理盐水后进行缝合，小心护理待孕鼠苏醒。为了减小实验误差，不同电压的电转染在同一只孕鼠体内完成。待3 d后收取胎鼠脑组织进行切片检测，结果显示45 V的电压会致使胎鼠死亡，与较低的38 V电压相比，电压提高到40 V和42 V时，电转皮质上绿色荧光蛋白阳性的神经细胞数目增多，尤其42 V电压下，与38 V的电转电压相比，转染成功的细胞增多了1倍，见图1A，B，荧光强度也显著增强，见图1A，C；42 V电压比40 V电压电转的效果更佳，细胞数由400个增多到了460个。从以上数据可以得出这样的结论，42 V电压下电转对胎鼠的致死性低且转染效率最高，42 V是E14胎鼠的最佳转染电压。
图2｜脉冲数对转染效果的影响
结果：脉冲数在电穿孔转染的参数中对转染效率起着重要的作用[21]，在电压为42 V的前提下，作者试图通过提高电转的脉冲数来改善电转的效果。选择在以下条件下进行转染：脉冲数为5和8，42 V电压，每个电脉冲持续50 ms，2个电脉冲之间间隔1 s，通过数据统计分析发现，把脉冲数从5提高到8后，受转染大脑皮质上绿色荧光蛋白阳性的神经细胞数目增多且荧光强度增强，细胞数由460个增多到了585个，荧光强度也增强了1倍，见图2A-C。以上数据显示，42 V电压和8个脉冲以及每个电脉冲持续50 ms，两个电脉冲之间间隔1 s的电转条件可有效改善小鼠子宫内电穿孔转染的效率。
图3｜改良后的电转条件对神经细胞生长的影响
结果：分离E18受转染胚胎小鼠的大脑皮质组织，用胰酶将分离的皮质组织消化为单个神经元细胞，之后将细胞接种于经层粘连蛋白和多聚赖氨酸包被过的24孔细胞培养板的玻片上进行培养，培养3 d后检测表达绿色荧光蛋白阳性神经元的轴突长度。结果显示，42 V电压8个脉冲和38 V电压5个脉冲的电转条件下绿色荧光蛋白阳性神经元的轴突长度比较无显著差异，见图3A，B，以上结果表明，42 V电压8个脉冲的电转条件不影响胎鼠神经元的正常生长。