脐血干细胞

    miR-1-5p修饰脐带间充质干细胞治疗MRL/lpr狼疮小鼠的作用
  • 图1|显微镜下脐带间充质干细胞的形态特征 (×100)

    结果:利用组织块培养法培养8 d,在显微镜下观察原代UC-MSCs,在组织块周围可见呈多角形或短梭形散落分布的单个细胞;12 d后细胞明显增多,细胞呈放射状或漩涡状密集生长并形成群落;16 d后细胞大多呈长梭形并可融合至70%-90%。传代后增殖速度较快,三四天可融合达到90%左右。该UC-MSCs的形态和生长规律均符合间充质干细胞的特性,见图1


    图2|脐带间充质干细胞成脂和成骨诱导分化情况(×100)

    结果:UC-MSCs高表达 CD44、CD90、CD105(阳性率大于95%),低表达 CD11c、CD34、CD45(阳性率小于1%) [21]。UC-MSCs成脂诱导21 d后,镜下可见空泡形成,经油红O染色后UC-MSCs内可见大量鲜红色脂滴。UC-MSCs成骨诱导21 d后,镜下可见钙化结节,经茜素红染色后UC-MSCs内可见橘红色钙化结节,见图2


    图3|显微镜下观察脐带间充质干细胞转染miRNA Mimic情况(×100)

    结果:实验按照最佳转染效率:BLOCK-iTTMAlexa FluorTM Red Fluorescent Control浓度为10 nmol/L、转染时间为 48 h。转染后,显微镜下观察miRNA Mimic转染情况,见图3


    图4|miR-1-5p 修饰的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对MRL/lpr狼疮小鼠肝组织病理变化的影响(苏木精-伊红染色,左侧标尺为1 000 μm,右侧标尺为50 μm) 

    结果:对照组、PBS组MRL/lpr小鼠肝组织内可见肝细胞沿中央静脉呈肝索排列,偶见肝细胞核溶解、坏死;汇管区可见中度炎性细胞浸润。与对照组相比,UC-MSCs+miR-1-5p组、UC-MSCs+miR-NC组和UC-MSCs组肝组织汇管区可见炎性细胞浸润减少,表明miR-1-5p修饰的UC-MSCs、miR-NC修饰的UC-MSCs、UC-MSCs均可缓解系统性红斑狼疮小鼠肝组织炎症反应,但miR-1-5p并未加强UC-MSCs对肝组织细胞的修复能力。UC-MSCs+miR-NC组还可见肝细胞核固缩及肝细胞水肿变性,提示miR-NC修饰后可能影响了UC-MSCs对肝组织细胞的修复能力,见图4


    图5|miR-1-5p 修饰的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对MRL/lpr狼疮小鼠肠组织病理变化的影响(苏木精-伊红染色,左侧标尺为100 μm,右侧标尺为50 μm) 

    结果:对照组、PBS组肠组织内可见肠绒毛黏膜上皮细胞轻微变性,杯状细胞数量重度减少;黏膜下层未见水肿、炎性细胞浸润;肌层细胞排列整齐,未见变性坏死;浆膜层未见增厚。与对照组相比,UC-MSCs+miR-1-5p组可见肠组织中空泡杯状细胞明显增多,黏膜上皮细胞未见变性、坏死;UC-MSCs+miR-NC组可见杯状细胞数量无明显变化,黏膜上皮细胞未见变性、坏死;UC-MSCs组可见空泡杯状细胞数量轻微增多,黏膜上皮细胞未见变性、坏死;提示miR-1-5p可能与UC-MSCs在促进杯状细胞增殖及减少肠黏膜上皮细胞变性、坏死方面具有协同作用。但miR-NC修饰后可能影响了UC-MSCs促进杯状细胞增殖的作用,见图5


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  • 发布日期: 2022-09-09  浏览: 71