骨髓干细胞

    慢病毒下调酪蛋白激酶2相互作用蛋白1表达的骨髓间充质干细胞修复骨质疏松大鼠牙槽骨缺损
  • 图1|大鼠骨髓间充质干细胞吉姆萨染色(×40)

    结果:图1所示,吉姆萨染色后的骨髓间充质干细胞的胞核深染,居中。细胞贴壁铺成单层,细胞形态大致呈短梭形,有粗大突起伸出,细胞多数聚集成集落。


    图2|大鼠骨髓间充质干细胞成骨及成脂诱导分化能力

    结果:成骨诱导3周后,可观察到结节状钙化结构,用茜素红染色后,显微镜下可观察到红色的钙化结节,见图2A。成脂诱导28 d后进行油红O染色,显微镜下可观察到脂肪滴位置呈明显红染,见图2B


    图4|各组大鼠股骨干骺端苏木精-伊红染色(A,C:×100;B,D:×200)

    结果:维甲酸灌胃结束后,两组大鼠均无死亡。与对照组相比,骨质疏松组骨小梁较薄,骨髓腔较宽,骨小梁之间分离度较大,见图4


    图5|各组大鼠牙槽骨缺损修复后的苏木精-伊红染色图像

    结果:术后1个月,上颌骨术区组织苏木精-伊红染色显示:OP组骨缺损充满纤维结缔组织,仅可见少部分新生骨质,并且与周边骨组织交界明显;OP+BMSCs组骨缺损内可见明显的新生骨生成,与周围骨组织无明显骨连接;OP+BMSCs/CKIP-1组骨缺损区内可见大量新生骨组织,并能发现部分新生血管,与周围骨组织有骨与类骨连接的形式存在;正常组骨缺损区域内新生骨量较多,活跃的成骨细胞和新生血管多见,与周围骨组织已经存在部分骨性连接,见图5A-D

    Lane-Sandhu组织学评分统计结果显示:OP组组织学评分明显低于OP+BMSCs组、OP+BMSCs/CKIP-1组和正常组,差异有显著性意义(P < 0.01);OP+BMSCs组组织学评分低于OP+BMSCs/CKIP-1组,差异有显著性意义(P < 0.05);OP+BMSCs/CKIP-1组组织学评分与正常组相比差异无显著性意义(P > 0.05),见图5E

    新生骨百分比统计结果显示:OP组新生骨面积百分比最小,与OP+BMSCs组、OP+BMSCs/CKIP-1组和正常组相比差异均有显著性意义(P < 0.01);OP+BMSCs组新生骨面积百分比低于OP+BMSCs/CKIP-1组,差异有显著性意义(P < 0.05);而OP+BMSCs/CKIP-1组的新生骨面积百分比与正常组相比差异无显著性意义(P > 0.05),见图5F


    图6|各组大鼠牙槽骨缺损区碱性磷酸酶、骨钙素、CKIP-1蛋白及mRNA相对表达量

    结果:免疫组化结果显示,OP+BMSCs/CKIP-1组碱性磷酸酶和骨钙素蛋白表达高于OP组(P < 0.01)和OP+BMSCs组(P < 0.05),而与OP组和OP+BMSCs组相比,OP+BMSCs/CKIP-1组CKIP-1蛋白表达显著降低(P < 0.01),见图6A-D。RT-PCR结果显示,OP+BMSCs/CKIP-1组碱性磷酸酶和骨钙素 mRNA的相对表达水平高于OP组(P < 0.01)和OP+BMSCs组(P < 0.05),见图6EF。OP+BMSCs/CKIP-1组CKIP-1 mRNA的相对表达低于OP组(P < 0.05)和OP+BMSCs组(P < 0.05),见图6G


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  • 发布日期: 2022-09-09  浏览: 454