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    圣草酚对过氧化氢所致SH-SY5Y细胞线粒体动力学失衡及凋亡的影响
  • 图2|圣草酚对过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞形态的影响(标尺=20 μm)

    结果:PBS对照组SH-SY5Y细胞在静息状态下生长良好,多为梭形或者是椭圆形,树枝状突起明显,细胞透亮;过氧化氢组SH-SY5Y细胞密度下降,突起消失,胞体肥大;圣草酚治疗组SH-SY5Y细胞多为梭形和椭圆形,有少数细胞胞体增大,细胞的形态趋近PBS对照组,见图2。


    图4|圣草酚抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降(x±s,n=3)

    结果:JC-1常用于检测线粒体膜电位的变化,JC-1探针的灵敏度使其在线粒体膜电位较高时聚集在线粒体基质中,形成聚合物产生红色荧光;当线粒体膜电位下降时JC-1探针则不能聚集,此时产生绿色荧光;通过荧光颜色的变化可以检测到线粒体膜电位的变化;与PBS对照组相比,过氧化氢组的红/绿荧光强度比值低,差异有显著性意义(P < 0.001),表明线粒体膜电位降低;与过氧化氢组比较,圣草酚治疗组的红/绿荧光强度比值升高,差异有显著性意义(P < 0.001),表明线粒体膜电位恢复正常状态。与PBS对照组比较,圣草酚治疗组红/绿荧光强度比值无明显差异(P > 0.05),见图4,说明圣草酚治疗可以恢复线粒体膜电位,发挥保护作用。


    图5|圣草酚抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞凋亡(x±s,n=5)

    结果:TUNEL染色结果显示,与PBS对照组比较,过氧化氢组的细胞凋亡率明显升高(P < 0.001),与过氧化氢组比较,圣草酚治疗组的细胞凋亡率降低(P < 0.001),见图5,表明圣草酚可以抑制过氧化氢诱导的细胞凋亡。


    图7|免疫荧光染色法检测各组SH-SY5Y细胞凋亡蛋白Caspase3表达量(x±s,n=3)

    结果:免疫荧光结果显示,与PBS对照组相比,过氧化氢组Caspase3增高(P < 0.05),而与过氧化氢组相比,圣草酚治疗组Caspase3表达降低(P < 0.05),见图7,说明圣草酚可以抑制促凋亡蛋白的表达水平,增加抗凋亡蛋白的表达水平。


    图8|免疫荧光染色检测各组SH-SY5Y细胞线粒体分裂蛋白p-Drp1、Fis1和融合蛋白Mfn2、OPA1的表达(x±s,n=5,标尺=100 μm)

    结果:免疫荧光结果显示,与PBS对照组比较,过氧化氢组线粒体分裂蛋白p-Drp1和Fis1的表达增加(P < 0.001),而线粒体融合蛋白Mfn2、OPA1的表达降低(P < 0.01)。与过氧化氢组比较,圣草酚治疗组p-Drp1和Fis1的表达降低(P < 0.001),Mfn2、OPA1的表达增加(P < 0.001),见图8。

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  • 发布日期: 2022-04-25  浏览: 642