脐血干细胞

人脐带与人脂肪间充质干细胞中应激耐受多系分化细胞的分离鉴定及分化能力比较

• 图2｜Muse细胞培养形态及碱性磷酸酯酶染色(标尺为100 μm)

  

  结果：将胰酶消化处理4 h的脂肪间充质干细胞、脐带间充质干细胞，以5×106 L-1细胞浓度接种至超低吸附培养板中，每孔0.5 mL，在悬浮培养第3天，可看到细胞逐渐变大，形成类似于胚胎干细胞衍生的拟胚体，即细胞集落，见图2A。细胞集落为类圆形，透明度好，边界清楚，在7-10 d集落形态达到最大，见图2B，然后停止生长，细胞集落变暗。将细胞集落转为贴壁生长时，细胞集落可以继续增殖，向周围呈放射状生长，中间细胞较小，胞体类圆形，周围细胞呈成纤维状，胞体较大，见图2C。
  由于悬浮培养的Muse细胞不易进行染色，所以将悬浮8 d的细胞贴壁培养12 h后，进行碱性磷酸酯酶染色。结果显示脐带来源Muse细胞、脂肪来源Muse细胞形成的集落碱性磷酸酯酶染色呈阳性反应，而未悬浮培养的脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞不着色，见图2D-F。

  
  

  图4｜间充质干细胞、Muse细胞多向分化潜能

  

  结果：成骨诱导分化3周后，间充质干细胞及Muse细胞分别进行茜红素和Von Kossa染色，低倍镜下，在细胞质中观察到黑色和橘红色的沉积钙盐。间充质干细胞与Muse细胞都具有成骨诱导分化能力，但两种细胞之间诱导效率存在差别，Muse细胞的成骨能力高于间充质干细胞，见图4。

  
  

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发布日期： 2022-01-30  浏览： 636