图1|贴壁生长的骨髓间充质干细胞形态学观察(×100)
结果:采用全骨髓贴壁筛选法培养骨髓间充质干细胞,培养48 h后原代细胞出现聚集贴壁生长,见图1A,当细胞生长至汇合度达80%以上进行传代,随着培养代数的增加,细胞逐渐从圆形逐渐变为梭形,至第3代时,形态呈均一的长梭形,见图1B。
图2|各组小鼠外周血血浆、肾脏中CXCL12的表达以及B淋巴细胞表面CXCR4的表达
结果:ELISA检测结果显示,与C57BL/6组比较,20周龄MRL/lpr组小鼠外周血血浆中CXCL12表达增高[(4 669.0±145.7) ng/L vs. (3 088.0±738.6) ng/L,P < 0.05,n=5],与PBS组相比,骨髓间充质干细胞组小鼠外周血血浆中CXCL12表达减少[(2 198±192.5) ng/L vs. (4 031.0±451.4) ng/L, P < 0.01,n=5],见图2A。
免疫组化染色显示,与C57BL/6组相比,MRL/lpr组小鼠肾小球和肾小管中CXCL12表达均增高,骨髓间充质干细胞组小鼠肾小球和肾小管中CXCL12表达降低,见图2B。
流式细胞分析结果显示,与C57BL/6组相比,MRL/lpr组小鼠外周血B淋巴细胞CXCR4的表达增高[(86.73±1.99)% vs. (43.38±8.65)%,P < 0.01,n=5]及肾脏B淋巴细胞CXCR4的表达增高[(67.4±2.14)% vs. (59.07±1.56)%,P < 0.05,n=5],与PBS组相比,骨髓间充质干细胞组小鼠外周血B淋巴细胞CXCR4的表达降低[(24.53±6.39)% vs. (79.28±10.87)%,P < 0.05,n=5]及肾脏中B淋巴细胞CXCR4的表达降低[(53.77±6.55)% vs. (81.15±3.20)%,P < 0.01,n=5],见图2C,D。
图3|各组小鼠肾脏病理改变(苏木精-伊红染色)