牙髓干细胞

    柚皮素干预人牙周膜干细胞的成骨分化能力
  • 图1|人牙周膜干细胞的形态(×40)

    结果:组织块法分离培养原代细胞,在培养7 d左右可观察到原代细胞从组织块周围贴壁爬出,倒置显微镜下观察细胞呈星形或长梭形,如图1A所示。待细胞增殖融合至90%时可进行传代培养,传代后24 h细胞基本全部贴壁生长,生长状态良好,呈典型的漩涡状生长,如图1B所示。

    图3|人牙周膜干细胞成骨、成脂诱导分化能力

    结果:细胞经成骨诱导培养14 d后,茜素红染色可观察到大量矿化结节形成,如图3A所示,证实了其成骨分化的潜能。成脂诱导培养21 d后,油红O染色可观察到明显的红色脂滴,如图3B所示,证实了培养细胞具有成脂分化的能力。

    图5|柚皮素对人牙周膜干细胞碱性磷酸酶染色的影响

    结果:培养3,5,7 d后,柚皮素对牙周膜干细胞碱性磷酸酶染色和活性的影响如图5和图6所示。诱导培养第3天,1 μmol/L柚皮素组与对照组碱性磷酸酶活性相比无明显差异,10,100 μmol/L柚皮素组碱性磷酸酶活性显著高于对照组(P < 0.05);诱导第5天,1,10,100 μmol/L柚皮素组碱性磷酸酶活性均显著高于对照组(P < 0.05),且随着柚皮素浓度增高,牙周膜干细胞的碱性磷酸酶活性越强,呈剂量效应关系;诱导第7天,所有组碱性磷酸酶活性均显著增强,1,10 μmol/L柚皮素组碱性磷酸酶活性与对照组相比,差异无显著性意义,仅100 μmol/L柚皮素组显著高于对照组(P < 0.05)。碱性磷酸酶染色结果与活性测定结果一致。

    图7|不同浓度柚皮素对人牙周膜干细胞矿化结节形成的影响

    结果:诱导14 d后,茜素红染色结果显示,与对照组相比,1,10,100 μmol/L柚皮素组具有更多的矿化结节(P < 0.05),如图7所示。用酶标仪法对矿化结节进行定量分析,统计结果显示,随着柚皮素浓度增高,牙周膜干细胞形成的矿化结节数量越多,呈剂量效应关系,说明柚皮素能够促进牙周膜干细胞形成矿化结节的能力,且各浓度间差异有显著性意义(P < 0.05)。


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  • 发布日期: 2021-11-01  浏览: 545