脂肪干细胞
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图1｜脂肪间充质干细胞形态学观察(×200)
结果：原代分离培养的小鼠脂肪间充质干细胞初为小圆形，细胞大小不均匀。培养24 h后可见细胞基本已经完全贴壁，贴壁细胞呈成纤维细胞形态；48 h后换液去除非贴壁细胞，此时细胞已生长出触角，呈梭形或三角形，见图1A；五六天后细胞基本达到70%-80%融合，细胞呈成纤维样生长，形态一致。传代后细胞呈典型成纤维细胞样生长，具有一定的方向性。当传至第3代时，贴壁细胞形态均一，大部分呈梭形，细胞排列呈漩涡状且增殖速度快，见图1B。
图4｜miR-146a对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响
结果：成骨诱导第6天，采用RT-PCR方法检测转染miR-NC、miR-146a mimic和miR-146a inhibitor之后各组细胞miR-146a mRNA表达变化，结果发现与miR-NC组相比，miR-146a mimic组细胞miR-146a的mRNA表达显著升高，miR-146a inhibitor组细胞miR-146a的mRNA表达显著减低(P < 0.05)，见图4A。采用碱性磷酸酶染色比较各组细胞成骨分化程度，结果发现miR-146a mimic组显色较miR-NC组和miR-146a inhibitor组明显减弱，而miR-146a inhibitor组与miR-NC组相比则显色增强，见图4B。碱性磷酸酶活性检测结果显示，与miR-NC组相比，miR-146a mimic组碱性磷酸酶表达活性显著降低，miR-146a inhibitor组碱性磷酸酶活性显著上升(P < 0.05)，见图4C。在成骨诱导后的第12天，采用茜素红染色鉴定细胞表面矿化基质的产生，与miR-NC组相比，miR-146a mimic组细胞的钙化程度显著降低，而miR-146a inhibitor组细胞的钙化程度显著升高(P < 0.05)，见图4D。