脐血干细胞

    人脐带间充质干细胞联合玻璃酸钠注射液治疗膝骨关节炎
  • 图 1 |流式细胞仪检测人脐 带间充质干细胞特异性表面抗原

    结果:人脐带间充质干细胞形态为梭形,流式细胞仪检测第3代人脐带间充质干细胞特异性表面抗原CD44、CD90、CD73和CD105的阳性率分别为99.9%,100.0%,99.5%,96.8%,而CD14、CD19、CD34、CD45和HLA-DR的表达为阴性,见图1

    图 2 |人脐带间充质干细胞抑制淋巴细胞增殖

    结果: 脐带间充质干细胞能抑制CD4+/CD8+T细胞增殖,植物血凝素刺激后CD4+T细胞的增殖率为43.8%,加入脐带间充质干细胞后CD4+T细胞的增殖率为2.2%;植物血凝素刺激后CD8+T细胞的增殖率为44.3%,加入脐带间充质干细胞后CD8+T细胞的增殖率为12.3%,见图2

    图 3 |人脐带间充质干细胞上调调节性 T 细胞比例

    结果:  阳性对照组CD4+T细胞单独培养3 d后,流式细胞仪检测调节性T细胞比例为66.1%;CD4+T细胞与人脐带间充质干细胞共培养3 d后,流式细胞仪检测调节性T细胞比例为87.5%,见图3

    图 4 |玻璃酸钠对人脐带间充质干细胞成脂分化的影响 ( 油红 O 染色, 标尺:20 μm)

    结果:  玻璃酸钠与人脐带间充质干细胞预混组成脂诱导后细胞内明显有红色脂滴形成,见图4

    图 5 |玻璃酸钠对人脐带间充质干细胞成软骨分化的影响 ( 阿尔新蓝染 色,标尺:200 μm)

    结果:玻璃酸钠与人脐带间充质干细胞预混组成软骨诱导后细胞聚集形成球状,阿尔新蓝着色,见图5

    图 6 |骨关节炎造模新西兰兔右膝关节和正常左膝关节

    结果:造模5周后,1只兔子死亡,其余兔子均未出现不良状况。与造模的前4周比较,造模5周后实验兔较活跃,右腿变细,出现肌肉萎缩现象,右膝关节膨大。正常对照组和假手术组无症状。造模6周后随机选1只新西兰白兔取材观察模型构建情况,造模右膝关节红肿,左膝关节正常,见图6

    图 7 |各组新西兰兔体质量曲线

    结果:治疗后实验兔经观察均未出现不良反应,人脐带间充质干细胞+玻璃酸钠组改善比较明显,玻璃酸钠组和人脐带间充质干细胞也有两三只兔子较活跃。各治疗组与正常组和假手术组间体质量差异无显著性意义,见图7

    图 8 |各组新西兰兔软骨修复的大体观察

    结果: 术后16周,正常组和假手术组关节面光滑正常,玻璃酸钠组关节面不平整,见图8A。人脐带间充质干细胞+玻璃酸钠组与玻璃酸钠组相比,ICRS评分有显著升高,见图8B

    图 9 |各组新西兰兔股骨髁苏木精 - 伊红染色代表性图片 ( 左侧图标尺:500 μm,右侧图标尺: 200 μm)

    结果:苏木精-伊红染色评估由四川大学华西医院骨科完成。人脐带间充质干细胞+玻璃酸钠组的软骨厚度显著增加,见图9

    图 11 |各组新西兰兔股骨髁番红 O/ 固绿染色代表性图片 ( 标尺:200 μm)


    结果: 番红O/固绿染色评估由四川大学华西医院骨科完成。玻璃酸钠组软骨表面不连续,基质染色不均匀,染色较浅,深层存在部分胶原纤维染色。人脐带间充质干细胞组部分关节软骨表面不连续,基质染色不均匀,染色较浅,深层局部存在胶原纤维染色。人脐带间充质干细胞+玻璃酸钠组局部关节软骨表面不连续,基质染色较浅,有软骨细胞簇集或群集增生,软骨全层含较多蛋白聚糖,放射层及钙化层局部存在胶原纤维染色,见图11。

    图 13 |各组新西兰兔股骨髁关节软骨Ⅱ型胶原表达 ( 标尺:200 μm)


    结果:免疫组化评价由四川大学华西医院骨科完成。人脐带间充质干细胞组和人脐带间充质干细胞+玻璃酸钠组关节软骨Ⅱ型胶原表达增加,见图13

    图 14 |各组新西兰兔股骨髁关节软骨基质金属蛋白酶 13 表达 ( 标尺:200 μm)


    结果:人脐带间充质干细胞+玻璃酸钠组关节软骨基质金属蛋白酶13的分泌减少,见图14

    点击此处查看原文

  • 发布日期: 2021-05-11  浏览: 367