脐血干细胞

    人脐带间充质干细胞来源外泌体抑制髓母细胞瘤Daoy细胞增殖并促其凋亡
  • 图 1 |人脐带间充质干细胞及其来源外泌体的鉴定

    结果:接种10 d左右可长出贴壁的梭形细胞,传至第4代呈平行排列或漩涡状生长,见图1A,B;流式细胞仪检测人间充质干细胞表面标志物CD73,CD44,CD90和CD105呈阳性表达,HLA-DR,CD14,CD34和CD45呈阴性表达,见图1C,提示所分离培养细胞为人间充质干细胞。人脐带间充质干细胞上清液超速离心得到的物质,经Western blot检测CD9,CD81蛋白均呈阳性表达,证明所提取物质为外泌体,见图1D

    图 2 |人脐带间充质干细胞来源外泌体对 Daoy 细胞增殖的影响

    结果:CFSE是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色剂,在细胞分裂增殖过程中,CFSE标记荧光可平均分配至2个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半。培养96 h后,流式细胞术分析Daoy细胞CFSE荧光发生递减即增殖的细胞比率,这一部分细胞包含了G2/M期和S期细胞;CFSE荧光未发生递减即未增殖的细胞比率,这部分细胞为G0/G1期细胞。人脐带间充质干细胞来源外泌体组G2/M期和S期细胞比率为(44.60±7.28)%,明显低于对照组(79.30±8.92)%,差异有显著性意义(P < 0.05);人脐带间充质干细胞来源外泌体组G0/G1期细胞比率为(53.10±5.74)%,明显高于对照组(20.30±4.42)%,差异有显著性意义(P < 0.05),见图2

    图 3 |人脐带间充质干细胞来源外泌体对于Daoy 细胞克隆形成能力的影响

    结果:通过克隆形成实验检测人脐带间充质干细胞来源外泌体对Daoy细胞增殖活力和群体依赖性的影响。人脐带间充质干细胞来源外泌体组Daoy细胞的克隆形成率为(42.6±8.6)%,较对照组(86.3±11.4)%明显下降(P < 0.01),表明人脐带间充质干细胞来源外泌体对Daoy细胞增殖活力具有抑制作用,见图3

    图 4 |人脐带间充质干细胞来源外泌体对 Daoy 细胞凋亡的影响


    结果: 人脐带间充质干细胞来源外泌体组细胞凋亡率为(32.8±7.8)%,较对照组(11.9±9.4)%显著增加(P < 0.01),见图4AB;抗凋亡因子Bcl-2和Cyclin D1蛋白表达水平相对下调(P < 0.05),而促凋亡因子Caspase-3蛋白表达显著上调(P < 0.01),见图4CD

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  • 发布日期: 2021-05-11  浏览: 349