胚胎干细胞

比较人不同细胞来源诱导多能干细胞与胚胎干细胞拟胚体的分化培养过程

• 图1｜诱导多能干细胞/胚胎干细胞诱导拟胚体过程中的形态学变化(×40)

  

  结果：分别将AF888(诱导多能干细胞)/ P023(胚胎干细胞)细胞经酶消化后切割成小的细胞团块，接种到6孔板中，悬浮培养24 h后都可观察到拟胚体球形成，第4天可观察到囊状结构的拟胚体，见图1；第8天将悬浮生长的拟胚体转入Matrigel处理后的6孔板中，促进拟胚体贴壁自分化；第16天在显微镜下可见拟胚体分化为不同形态类型的细胞。诱导多能干细胞与胚胎干细胞均可被诱导形成拟胚体，并发育形成囊状结构，大体观察未见明显差异。

  图4｜流式细胞术检测拟胚体分化过程中CD34+CD43+细胞比率

  

  结果：第4，8，12，16天诱导多能干细胞拟胚体中CD34+CD43+细胞数比率分别为(0.014±0.000)%，(0.018±0.018)%，(0.021±0.013)%，(0.057±0.057)%；胚胎干细胞拟胚体中CD34+CD43+细胞数比率分别为(0.035± 0.009)%，(0.102±0.099)%，(0.027± 0.012)% (0.039±0.013)%。诱导多能干细胞拟胚体中CD34+CD43+细胞在第12天达到0.088%(羊水)/0.354%(尿细胞)，为造血干细胞含量的高峰。胚胎干细胞拟胚体高峰在第16天(0.035%)。在拟胚体诱导随机分化过程中，CD34、CD43均呈阶段性表达，随着分化时间的延长，均呈先上升后下降的趋势。诱导多能干细胞拟胚体中CD34、CD43的峰值表达量为胚胎干细胞拟胚体的数十倍，尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率明显高于羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体及胚胎干细胞拟胚体，见图4。
  

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发布日期： 2021-04-02  浏览： 675