脂肪干细胞
-
图1｜4月龄和12月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞形态特征(×100)
结果：接种后4-6 h开始贴壁，细胞形态为小圆形，细胞大小不均匀，有部分单核细胞存在；48 h后逐渐伸展为细长的纺锤状、多角形和圆形等多种不稳定细胞形态；4 d后细胞呈长梭形，成纤维样细胞逐渐增多，且具有较强折光性；8-10 d密度达到80%-85%汇合。当细胞传至第3代，细胞形态呈长梭形趋于稳定，与4月龄比较，12月龄第10代细胞呈现胞体扁平、肥大、折光性弱等不规则形态，细胞呈现衰老的趋势，见图1。
图5｜4月龄和12月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞的成骨分化能力(×200)
结果：成骨诱导后茜素红染色，镜下可见形成不同程度的红色钙化结节。4月龄组第3代细胞钙结节形成率[(75.13±1.30)%]大于12月龄组[(64.26±0.96)%]，差异有显著性意义(P < 0.001)；4月龄组第10代细胞钙结节形成率[(72.43±1.00)%]大于12月龄组[(44.13±2.21)%]，差异有显著性意义(P < 0.001)；4月龄组内第3代细胞和第10代细胞没有差异，而12月龄组的第3代细胞钙结节形成率大于第10代细胞，差异有显著性意义(P < 0.001)，见图5。
图6｜4月龄和12月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞的成脂分化能力(×200)
结果：成脂诱导经油红O染色，显示细胞形态大多由长梭形变为椭圆形，细胞内形成大小数量不一红色脂滴。4月龄组第3代细胞脂滴形成百分率和12月龄组第3代细胞无显著差异，分别为(86.60±1.70)%和(83.80±1.82)%，4月龄组第10代细胞脂滴形成百分率[(63.16±2.00)%]大于12月龄组[(50.56±1.48)%]，差异有显著性意义(P < 0.001)；4月龄组和12月龄组第3代细胞脂滴形成率大于第10代细胞，差异有显著性意义(P < 0.001)，见图6。
图7｜4月龄和12月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞的β-半乳糖苷酶染色(×200)
结果：采用β-半乳糖苷酶染色，阳性细胞呈蓝色。4月龄组和12月龄组第3代细胞中β-半乳糖苷酶阳性细胞少，阳性细胞数分别为1.20±0.17和2.7±0.52，差异无显著性意义；随着月龄和细胞传代次数增加，阳性细胞比例增多。在第10代时，4月龄组阳性细胞数(10.26±1.00)小于12月龄组(55.50±1.37)，差异有显著性意义(P < 0.001)。4月龄组和12月龄组的第10代阳性细胞数均大于第3代，见图7。
引用本文：高元慧, 向 杨, 曹 卉, 王顺兰, 郑琳麟, 何浩伟, 张应爱, 张淑芳, 黄邓高. 两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的比较[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(19): 2988-2993.
点击此处查看全文