2.1 实验动物数量分析 纳入Wistar大鼠120只,其中8只大鼠因术后感染死亡,并进行了补充,在进入结果分析时无脱失。
2.2 各组大鼠脊髓损伤不同时间点行为学观察 见表1。
注:与不移植细胞的脊髓损伤模型组比较,aP < 0.01;低浓度治疗组静脉推注1×109 L-1骨髓间充质干细胞1 mL,高浓度治疗组损伤区局部注射4× 1010 L-1骨髓间充质干细胞10 μL,移植15 d起,两组运动功能恢复强于模型组
表1 骨髓间充质干细胞移植脊髓损伤Wistar大鼠后其运动功能恢复Tarlov评分变化Table 1 Tarlov score of the recovery of Wister rats, motor function after bone marrow mesenchymal stem cells transplantation
损伤后1 d模型组和两治疗组均无恢复迹象,运动评分低于空白组(
P < 0.01);损伤7 d,两治疗组运动功能有所恢复,行为学评分均高于模型组,但差异无显著性意义(
P > 0.05);损伤15 d,两治疗组行为学评分改良Tarlov分级均明显高于模型组,差异有非常显著性意义(
P < 0.01);损伤30 d,两治疗组大鼠运动功能进一步恢复,行为学分级明显高于模型组,差异有显著性意义 (
P < 0.01)。
2.3 病理观察各组损伤脊髓形态变化
空白组:大鼠脊髓灰、白质组织结构完整,神经细胞在灰质中分布均匀、形态正常、尼氏体清晰及细胞膜完整,白质内神经纤维排列整齐,细胞间基质均匀,见图1。
注:未进行脊髓损伤造模的空白组大鼠脊髓形态正常
Figure 1 Histopathological changes of rat spinal tissue in the blank group (hematoxylin-eosin staining, ×40)
图1 空白组大鼠脊髓组织病理学变化(苏木精-伊红染色,×40)
脊髓组织切片发现损伤区主要位于脊髓灰质,在脊髓损伤7 d可见脊髓损伤区及周围区炎性细胞浸润,有些损伤脊髓组织出现囊腔样变化,见图2a;15 d病变处出现大片软化灶,仍可见出血灶,神经细胞消失,见图2b;30 d白质水肿较前减轻,可见胶质细胞增生,见图2c。
注:模型组大鼠在脊髓损伤7 d可见脊髓损伤区及周围区炎性细胞浸润,15 d病变处出现大片软化灶,仍可见出血灶,神经细胞消失,30 d白质水肿较前减轻,可见胶质细胞增生 Figure 2 Histopathological changes of rat spinal tissue in the model group at different time points after spinal cord injury (hematoxylin-eosin staining, ×40)
图2 模型组大鼠脊髓损伤不同时间点组织病理学变化(苏木精-伊红染色,×40)
注:低浓度治疗组静脉推注1×10
9 L
-1骨髓间充质干细胞1 mL,高浓度治疗组损伤区局部注射4×10
10 L
-1骨髓间充质干细胞10 μL,于损伤7 d见组织水肿减轻,炎性细胞浸润减轻,空泡变性减轻,神经细胞形态恢复,结构排列完整,第15天神经细胞形态恢复及结构排列较第7天又有改善,第30天又较第15天神经细胞形态恢复及结构排列有改善 Figure 3 Histopathological changes of rat spinal tissue in the treatment groups at different time points after spinal cord injury (hematoxylin-eosin staining, ×40)
图3 治疗组大鼠脊髓损伤不同时间点组织病理学变化(苏木精-伊红染色,×40)
Figure 3 Histopathological changes of rat spinal tissue in the treatment groups at different time points after spinal cord injury (hematoxylin-eosin staining, ×40)
图3 治疗组大鼠脊髓损伤不同时间点组织病理学变化(苏木精-伊红染色,×40)
低浓度治疗组和高浓度治疗组:于损伤7 d见组织水肿减轻,炎性细胞浸润减轻,空泡变性减轻,神经细胞形态恢复,结构排列完整,见图3a、b;第15天神经细胞形态恢复及结构排列较第7天又有改善,见图3c、d;第30天又较第15天神经细胞形态恢复及结构排列有改善,见图3e、f。