中低强度运动干预高脂饲养小鼠膝关节损伤软骨细胞LncRNA HOTAIR的表达

doi:10.12307/2024.221

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

中低强度运动：被认为较为适合膝骨关节炎患者，可以通过心率大致估算。其中涉及几个概念：心率储备=最大心率(220-年龄)-安静心率，中低强度运动心率控制在心率储备40%-80%+安静心率。比如30岁成年人，安静心率为60次/min，中低强度运动心率按照公式可以控制在112-164次/min之间。膝骨关节炎患者运动强度不宜过大(建议：心率储备40%-60%+安静心率)，以免加重症状，特别是老年人。
Micro CT：临床前科学研究的高分辨率、低辐射、高性能X射线活体3D显微断层扫描仪，可以将小动物(如小鼠)整体、骨骼、牙齿、脏器、血管和脂肪组织等在内的广泛样本三维成像清晰地展现相应组织，并且得到相关数据参数。在骨与关节系统中，作为一项金指标被广泛应用。

背景：中低强度有氧运动对膝关节软骨具有一定保护作用。长链非编码RNA对基因调节具有重要作用，其中，HOTAIR可以动员多个转录共同抑制因子，抑制某些基因表达。

目的：检测HOTAIR及相关因子在高脂饲养小鼠及中低强度运动干预后膝关节软骨细胞中表达水平，探讨其在软骨损伤及运动康复中的作用。
方法：C57BL/6雄性小鼠30只，随机分为对照组(正常饲养)、高脂静养组和高脂运动组，每组10只。高脂运动组进行8周中低强度跑台运动，对照组和高脂静养组笼中饲养，期间每周日称体质量。8周跑台结束后取材双下肢，采用Micro CT扫描膝关节，股骨髁成3D图像，获取相关参数；膝关节苏木精-伊红和番红固绿染色进行关节Mankin和OARSI评分；RT-PCR检测相关软骨代谢指标Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶13、白细胞介素1，脂代谢指标低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)，HOTAIR及其下游因子赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)mRNA表达。

结果与结论：①高脂静养组和高脂运动组体质量均高于对照组(P < 0.01)，高脂运动组体质量低于高脂静养组(P < 0.05)；②高脂静养组和高脂运动组骨小梁连接密度均高于对照组(P < 0.01)；③高脂静养组Mankin和OARSI评分高于对照组(P < 0.01)和高脂运动组(P < 0.05)；④对照组Ⅱ型胶原 mRNA表达高于高脂运动组(P < 0.05)和高脂静养组(P < 0.01)，高脂运动组Ⅱ型胶原 mRNA表达高于高脂静养组(P < 0.01)；⑤高脂静养组基质金属蛋白酶13、白细胞介素1、低密度脂蛋白受体相关蛋白5、HOTAIR和赖氨酸特异性去甲基化酶1 mRNA表达高于对照组和高脂运动组(P < 0.01)；⑥结论：高脂饲养造成小鼠股骨髁骨质增加、膝关节软骨磨损，软骨细胞代谢紊乱，这一过程中HOTAIR的表达增加。8周中低强度跑台可减轻小鼠体质量、减缓膝关节软骨磨损、改善软骨细胞功能和下调HOTAIR表达。

https://orcid.org/0000-0002-2825-3451(张慧珍)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: HOTAITR, 高脂, 膝骨关节炎, 中低强度运动, Micro CT, LncRNAs

Abstract: BACKGROUND: Low to moderate intensity aerobic exercise can help protect knee cartilage. Long-chain non-coding RNAs are crucial for gene regulation. Among them, HOTAIR can activate numerous transcriptional co-repressors to repress the activation of certain genes.
OBJECTIVE: To detect the expression levels of HOX transcript antisense RNA (HOTAIR) and other related factors in chondrocytes of high fat-fed mice and after low to moderate intensity exercise intervention, and to investigate their role in cartilage injury and sports rehabilitation.
METHODS: Thirty C57BL/6 male mice were randomly divided into control group (normal feeding), high fat feeding group and high fat feeding plus treadmill exercise group, with 10 mice in each group. The mice in the high fat feeding plus treadmill exercise group were subjected to an 8-week low to middle intensity treadmill exercise, and the mice in the other two groups were caged. During this period, body mass was weighed every week on Sunday. After the 8-week exercise, both lower extremities of mice were taken, and the knee joint was scanned using Micro CT to make a 3D femoral condyle image to obtain relevant parameters. Hematoxylin-eosin and safranin O-fast green staining of the knee joint were performed for Mankin and Osteoarthritis Research Society International (OARSI) scoring. RT-PCR was performed to detect the mRNA levels of cartilage metabolic indicators and lipid metabolism indicators, including type II collagen, matrix metalloproteinase 13, interleukin 1, low-density lipoprotein receptor-related protein 5, HOTAIR and its downstream factor lysine specific demethylase 1.
RESULTS AND CONCLUSION: The body mass of high fat-fed mice were higher than that of the control group (P < 0.01), and the body mass of the high fat feeding plus treadmill exercise group was lower than that of the high fat feeding group (P < 0.05). The connectivity density of high fat-fed mice was higher than that of the control group (P < 0.01). Mankin and OARSI scores of the high fat feeding were higher than those of the control group (P < 0.01) and high fat feeding plus treadmill exercise group (P < 0.05). The mRNA level of type II collagen was higher in the control group than the high fat feeding plus treadmill exercise group (P < 0.05) and high fat feeding group (P < 0.01) as well as higher in the high fat feeding plus treadmill exercise group than the high fat feeding group (P < 0.01). The mRNA levels of matrix metalloproteinase 13, interleukin 1, low-density lipoprotein receptor-related protein 5, HOTAIR and lysine specific demethylase 1 were higher in the high fat feed group than the control group and high fat feeding plus treadmill exercise group (P < 0.01). To conclude, high fat feeding can increase the bone substance of the femoral condyle, lead to knee cartilage wear, and cause chondrocyte metabolism disorder. HOTAIR is highly expressed in this process. An 8-week low to middle intensity treadmill exercise can reduce body mass, alleviate knee cartilage wear, improve chondrocyte function and down-regulate HOTAIR expression in mice.

Key words: HOTAIR, high fat, knee osteoarthritis, moderate to low intensity exercise, Micro CT, LncRNAs

中图分类号:

张慧珍, 吴伟, 罗海涛. 中低强度运动干预高脂饲养小鼠膝关节损伤软骨细胞LncRNA HOTAIR的表达[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(11): 1684-1689.

Zhang Huizhen, Wu Wei, Luo Haitao. Medium to low intensity exercise interferes with the expression of LncRNA HOTAIR in chondrocytes in high-fat-fed mice with knee joint damage[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2024, 28(11): 1684-1689.

图/表（结果） 7

2.1 实验动物数量分析实验一共取小鼠30只分为3组，全部进入结果分析。
2.2 小鼠体质量喂养的前5周，两组小鼠体质量并未出现差异；第6周时，高脂组小鼠体质量大于对照组(P < 0.05)；第7-13周，高脂组小鼠体质量显著大于对照组(P < 0.01)，第13周时，高脂组小鼠体质量为(41.69±3.13) g，对照组为(30.64±3.17) g，详见表3。

运动干预期间，各组小鼠喂养饲料不变。对照组小鼠体质量显著低于高脂静养组和高脂运动组(P < 0.01)；与高脂静养组比较，高脂运动组小鼠体质量在第16，18和21周有所降低(P < 0.05)，在第17，19和20周显著降低(P < 0.01)。总体来说，高脂运动组小鼠体质量在第16周开始下降，详见表4。

2.3 重建区域内Micro CT参数值高脂运动组和高脂静养组小鼠的骨小梁连接密度要显著高于对照组(P < 0.01)。其余参数未见差异，见图2。

图3中可以看出，感兴趣区域内，高脂运动组和高脂静养组小鼠的骨小梁网状结构之间的连接数量多于对照组。

2.4 小鼠膝关节苏木精-伊红、番红固绿染色评分见图4。
(1)苏木精-伊红染色：对照组小鼠软骨表面连续平整、结构如常，软骨细胞数量如常，分布均匀，潮线完整；高脂运动组小鼠软骨表面平整、结构如常，软骨细胞稍有增多，潮线完整；高脂静养组小鼠软骨表面不规则(外侧)，软骨细胞簇集(外侧)，潮线完整，见图4A。
(2)番红固绿染色中，对照组小鼠软骨表面平整，未出现钙化；高脂运动组小鼠软骨表面不规则，外侧有钙化迹象；高脂静养组软骨表面不规则较多，外侧钙化面积较大，见图4B。

由表5可知，Mankin及OARSI评分结果显示，高脂运动组与对照组差异无显著性意义。高脂静养组小鼠Mankin评分大于对照组及高脂运动组(P < 0.01)，高脂静养组小鼠OARSI评分大于对照组(P < 0.01)和高脂运动组(P < 0.05)。说明高脂静养可以造成小鼠膝关节软骨损伤。

2.5 软骨细胞、脂代谢及HOTAIR相关基因检测结果见图5。对照组的Ⅱ型胶原mRNA表达水平高于高脂运动组(P < 0.05)和高脂静养组(P < 0.01)，高脂运动组的Ⅱ型胶原 mRNA表达水平高于高脂静养组(P < 0.01)，高脂静养组的基质金属蛋白酶13、白细胞介素1、LRP5、HOTAIR和LSD1 mRNA表达高于对照组和高脂运动组(P < 0.01)。

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引言

膝骨关节炎主要症状为关节肿胀、疼痛和活动受限等。各种原因导致关节内的炎症反应和软骨损伤，主要表现为软骨骨面磨损、骨赘生成，以及滑膜、周围血管和软骨下骨代谢紊乱等，最终发展成为膝骨关节炎[1-2]。研究显示，肥胖是导致膝骨关节炎常见的危险因素之一，超重和肥胖可造成关节内的异常压力、半月板和软骨磨损等。据报道，体质量指数增加5个单位，患有膝骨关节炎的风险随之增加35%[3]。此外，肥胖可触发炎症反应和降解酶的表达，可能通过生物力学或代谢因素导致膝骨关节炎发生发展。膝骨关节炎患者低密度脂蛋白水平要显著高于健康人群。且在动物实验中，研究发现高脂喂养小鼠存在膝骨关节炎的易感因素[4]。目前，膝骨关节炎的相关治疗主要有保守治疗，如针灸、推拿、理疗、药物(外敷、内服、关节内注射)等，以及手术治疗，如关节镜和关节置换等[5]。与这些方法比较，运动疗法作为一种保守治疗法，具有疗效明显、易于接受和普及、方便经济等特点。研究表明了运动疗法对防治膝骨关节炎具有一定疗效[6]，但是有关运动疗法防治膝骨关节炎的作用机制和靶点尚未清楚，包括运动疗法的相关因素及其如何作用于软骨细胞、软骨下骨、滑膜和周围血管等。
近几年，长链非编码RNA(long non-coding RNA，LncRNAs)因对基因具有多层次调控，这种调控更加迅速、灵敏[7]，成为了医学界研究的热点。LncRNA在软骨细胞功能中具有重要作用，是软骨细胞发育或凋亡过程中关键转录因子，可以调控软骨基质代谢、软骨下骨、滑膜组织和关节周围血管等[8]，其中HOTAIR(HOX transcript antisense RNA)具有抑制某些基因表达、反式调控的作用[9]。HOTAIR的主要研究集中在肿瘤细胞中[10]，在膝骨关节炎的研究中尚不多见，有研究表明HOTAIR表达可以加重关节炎的症状及进程[11]。基于此，该文章主要检测LncRNA HOTAIR在中低强度运动干预高脂饲养小鼠软骨细胞中的表达水平并探讨其作用，为运动防治膝骨关节炎的机制及靶点研究提供一定参考依据。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验。两组间比较采用独立样本t检验，多组比较采用单因素方差分析，并进行LSD或Tamhane’s T2两两比较。
1.2 时间及地点实验于2022年6-12月在上海体育学院完成。
1.3 材料
1.3.1 动物雄性C57BL/6小鼠30只，南京动物模式研究所提供，许可证号：SCXK(苏)2018-0008，4周龄，平均体质量(13.64±1.33) g，饲养于上海体育学院SPF级动物房屏障内，适应性饲养1周，平均体质量(15.22±1.52) g。
实验方案经上海体育学院动物实验伦理委员会批准(编号：102772022DW013)。实验过程遵循了国际兽医学编辑协会《关于动物伦理与福利的作者指南共识》和本地及国家法规。实验动物在麻醉下进行所有的手术，并尽一切努力最大限度地减少其疼痛、痛苦和死亡。
1.3.2 主要试剂与仪器阿佛丁(1.2%)、多聚甲醛、乙醇(75%)、苏木精-伊红染色及番红固绿染色试剂、PCR扩增罗氏试剂盒及引物、反转录试剂盒(Yakara)、SYBR green (V)、TRizol、PBS，均为上海生工生物工程有限公司产品。DSPT-202小鼠跑台(杭州端氏)；BH2光学显微镜(日本奥林巴斯)；Z216MK低温离心机(德国贺默)；实时荧光定量PCR仪(美国应用生物系统公司)；小动物扫描成像系统(Micro CT，瑞士SCANCO Medical AG)。
1.4 实验方法
1.4.1 分组适应性饲养1周后，小鼠随机分为对照组(n=10)和高脂组(n=20)，对照组给予普通饲料(由上海杰思捷实验动物有限公司提供)，高脂组给予高脂饲料(由上海普路腾生物科技有限公司提供，能量比例为蛋白质20%。脂肪40%，碳水化合物40%)饲养，为期13周。13周后，高脂组随机分为高脂静养组(n=10)和高脂运动组(n=10)组，高脂运动组进行为期8周的中低强度跑台干预。各组喂养饲料不变，即对照组普通饲料，高脂静养组和高脂运动组高脂饲料。

中低强度跑台运动方案[12]，见表1。

每周一至周五训练，周末休息，共计8周。该方法根据参考文献及团队前期研究成果所得[4]。
1.4.2 体质量检测每组小鼠每周日早上进行体质量测定。
1.4.3 取材运动干预结束后，48 h内阿佛丁(1.2%，30 mL/kg)腹腔注射麻醉小鼠后，颈椎脱臼处死，每组取双下肢，剥离肌肉，将完整的下肢骨进行PBS冲洗，后用40 g/L多聚甲醛固定48 h。

1.4.4 Micro CT检查[13] 小鼠下肢置于多聚甲醛固定48 h，转移至体积分数75%乙醇，4 ℃保存。采用Micro CT扫描膝关节，扫描参数：视野/直径(FOV/Diameter)31 948 μm，分辨率(Voxel Size)10.4 μm，源电压(Energy)55 kV，源电流( Intensity)72 μA，曝光时间(Sampletime)250 000 μs。扫描结束后，从股骨髁出现位置向上选取100层(每层10.4 μm)进行重建，见图1。选取观察重建区域内指标如下：骨矿物密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp)和骨小梁连接密度(Conn.D)。

1.4.5 膝关节苏木精-伊红、番红固绿染色标本固定、脱钙，乙醇脱水、二甲苯透明、浸蜡后腘窝侧关节紧贴包埋盒底部包埋，切片机切除多余组织，达软骨负重区，连续切片后6.0 μm。切片常规脱蜡脱水，自来水冲洗后进行不同组织化学染色。
苏木精-伊红染色：苏木精浸染切片5 min，水洗，1%盐酸乙醇分化3 s，再入伊红浸染3 min，乙醇逐级脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。光镜下(200倍)2位独立观察者按Mankin评分标准进行评分，从软骨结构、软骨细胞和潮线完整性进行评价，分值越高代表软骨损伤程度越高，取两者均值为最终得分。
番红固绿染色：固绿浸染切片5 min，水洗至软骨绿色较浅，媒染剂3 s，水洗3 min，再入番红O染液30 s，乙醇逐级脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。光镜下(200倍) 2位独立观察者按OARSI评分标准进行评分，从软骨结构、纤维化、表面裂隙和钙化程度进行评价，分值越高代表软骨损伤程度越高，取两者均值为最终得分。

1.4.6 RT-PCR检测相关因子mRNA表达关节软骨剥离并剔除软组织，液氮下研磨成粉，装入1.5 mL EP管。Trizol提取软骨总RNA，检测RNA纯度和浓度，按反转录试剂盒步骤将RNA反转录成cDNA，再进行荧光定量扩增。对样本中的软骨细胞合成和降解因子、炎症因子、脂代谢因子和HOTAIR及其下游因子：Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶13、白细胞介素1、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(low density lipoprotein receptor related protein 5，LRP5)、HOTAIR、赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine-specific demethylase1，LSD1)、β-actin mRNA进行定量检测，计算2-ΔΔCt值。引物序列详见表2。

1.5 主要观察指标 ①小鼠体质量；②重建区域内Micro CT参数值；③膝关节苏木精-伊红、番红固绿染色评分；④软骨细胞、脂代谢及HOTAIR相关基因检测结果。
1.6 统计学分析采用SPSS 22.0 处理数据，计量资料以x±s表示。两组间比较采用独立样本t检验，方差齐性用t检验，方差不齐用t’检验；多组比较采用单因素方差分析，方差齐性(Levene，P > 0.05)用LSD进行两两比较，方差不齐(Levene，P < 0.05)进行Welch检验，用Tamhane’s T2进行两两比较。最终结果，P < 0.05表示差异有显著性意义，P < 0.01表示差异有非常显著性意义。该文章的统计学方法已经上海体育学院生物统计学专家审核。

讨论

3.1 高脂饲养小鼠股骨髁骨质增加软骨下骨硬化、骨赘生成可加速关节软骨的破坏[14-15]。关节炎初期，软骨下骨的骨吸收增强，孔间隙增加，形成裂纹，新血管生成侵袭软骨层。中后期软骨下骨钙化变厚，甚则生成骨赘。软骨下骨板紧贴于软骨下方，为1-3 mm厚[16-17]。此次研究利用Micro CT扫描技术，可以从3D角度来观察软骨下骨的结构。取股骨髁出现向上扫100层进行重建，约1.04 mm，可以很好的观察软骨下骨情况。重建区域内的骨矿物密度、骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度、骨小梁分离度未见差异，说明此次研究中高脂饲养小鼠软骨下骨的骨密度、骨量及骨小梁微结构并未出现增加或减少，与正常饲养组没有差异。但是高脂饲养小鼠重建区域内的骨小梁连接密度明显高于正常饲养组，说明高脂饲养组骨小梁网状结构之间的连接数量要高于正常饲养组，且高脂运动组和高脂饲养组之间骨小梁连接密度差异无显著性意义，说明高脂本身可能会增加骨小梁连接密度，对骨质增长具有一定帮助。
3.2 高脂饲养小鼠膝关节软骨表面排列不规则，外侧有钙化现象，中低强度运动可以减缓软骨磨损退化骨关节炎中的软骨损伤往往是不可逆的，因软骨组织中无血管、神经和淋巴组织，修复能力极差。软骨出现磨损甚至磨至软骨下骨时，关节腔内产生大量炎性物质，长期炎性物质的浸润下又会加速软骨细胞的降解，使关节炎恶化。因此，观察关节软骨表面的磨损情况对于膝骨关节炎诊断有着重要意义[18-21]。何健宜等[22]利用高脂饮食诱导C57BL/6J肥胖小鼠骨关节炎模型的研究中发现，高脂组小鼠软骨细胞减少，排列紊乱等。此次研究中结果与之类似，高脂饲养小鼠的关节软骨Mankin和OARSI评分要高于正常饲养及高脂运动组，说明高脂可能是造成关节软骨退化的因素之一。高脂运动组与正常饲养组之间无显著性差异，而高脂运动组小鼠体质量一直大于正常饲养组，说明虽然高脂可能会造成关节软骨退化，但在这个过程中，中低强度运动可以有效地减缓或抑制软骨磨损退化的进程。
3.3 高脂饲养小鼠软骨代谢异常，不利于软骨合成，中低强度运动可以改善软骨细胞功能肥胖患者由于体质量和脂代谢等原因，易造成膝骨关节炎。LRP5定位在染色体11q11-12上，是低密度脂蛋白受体家族成员之一，并且与骨关节炎易感点相邻[4，23]。MEO BURT等[24]研究表明，关节炎的早期阶段LRP5水平上升。此次研究结果与其一致。高脂静养组小鼠LRP5显著高于正常饲料饲养的对照组和高脂运动组(P < 0.01)，而对照组和高脂运动组之间无显著性差异。表明高脂喂养可以造成小鼠膝关节软骨细胞内LRP5表达增长，而中低强度的运动干预后，可以下调高脂喂养小鼠的LRP5至正常水平。
基质金属蛋白酶13是一种胶原降解酶，其过表达可以导致软骨细胞凋亡，Ⅱ型胶原降解和软骨骨面磨损是判断关节炎的重要指标[25-26]。白细胞介素是膝骨关节炎中常见的炎性因子，高表达的白细胞介素成为促进软骨损伤的主要因素之一[27]，其中白细胞介素1具有强烈致炎作用[28]。PAPATHANASIOU等[29]研究发现，LRP5表达可以刺激基质金属蛋白酶13表达，阻断LRP5表达后，基质金属蛋白酶13水平也随之下降。此次研究结果也显示，高脂静养组小鼠基质金属蛋白酶13及炎性因子白细胞介素1水平显著高于其他两组，说明LRP5对基质金属蛋白酶13具有一定影响作用。且高脂静养组小鼠Ⅱ型胶原水平显著低于正常饲养和高脂运动组。Ⅱ型胶原是构成软骨基质重要成分，其水平越高越有利于软骨形成[30]。肥胖过程中的脂代谢异常会造成LRP5含量升高，进一步引起基质金属蛋白酶13水平上升和Ⅱ型胶原水平下降，达到某一界值时，可能就会诱发膝骨关节炎的发生。而中低强度运动可以作为一种有效的干预方式，来降低高脂小鼠膝关节软骨细胞内LRP5、基质金属蛋白酶13、白细胞介素1水平，促进Ⅱ型胶原水平。
3.4 高脂饲养小鼠膝关节软骨细胞HOTAIR及其相关基因表达上升，中低强度运动可下调其表达 LncRNA涉及绝大部分生物过程，对基因调节具有重要作用[31]。HOTAIR作为LncRNA中的一员，可以动员转录共同抑制因子LSD1，从而抑制某些基因表达[32]。HOTAIR在多种肿瘤细胞调控中具有关键作用，在膝骨关节炎中的研究相对较少。此次研究结果发现，高脂静养组小鼠HOTAIR和LSD1水平都要高于正常饲养组和高脂运动组，正常饲养的对照组与高脂运动组之间没有差异，说明中低强度运动可以降低小鼠膝关节软骨细胞内HOTAIR和LSD1水平。ZHANG等[33]研究发现，HOTAIR可以促进基质金属蛋白酶水平上升，阻断后可抑制基质金属蛋白酶表达。前期综述研究也发现，HOTAIR除了可以对基质金属蛋白酶产生影响外，还可以促进关节炎中白细胞介素1β表达[9]。由此可见，HOTAIR在膝骨关节炎中起到一定作用。结合高脂饮食小鼠股骨髁骨质增加，软骨表面排列不规则，外侧钙化现象，软骨细胞代谢异常等，推测是否存在HOTAIR通过脂代谢因子LRP5 促进膝骨关节炎进程的可能性。而中低强度运动可以减缓高脂小鼠膝关节软骨磨损，改善软骨细胞功能和下调HOTAIR表达，推测HOTAIR在中低强度运动减缓高脂小鼠软骨损伤中起着重要作用。
3.5 研究成果的意义和临床价值此次研究初步探讨了HOTAIR在高脂饲养小鼠中低强度运动干预后膝关节损伤软骨细胞中表达，可为中低强度运动减缓高脂小鼠膝关节软骨损伤提供一定临床参考依据。后期将继续深入研究HOTAIR在其中的具体作用机制，转染HOTAIR后，其是否通过LRP5进而影响高脂小鼠膝关节软骨细胞有待进一步研究。
结论：高脂饲养会造成小鼠体质量增加、股骨髁骨质增加、膝关节软骨表面磨损及钙化，不利于软骨合成，这一过程中LncRNA HOTAIR的表达水平增加，提示HOTAIR可能参与此过程。8周中低强度跑台运动可减轻小鼠体质量，抑制高脂饲养小鼠膝关节软骨表面磨损及钙化，减缓软骨细胞降解，抑制HOTAIR和LRP5表达，HOTAIR和LRP5作用机制有待进一步研究。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程