唾液体外诱导促进兔脂肪干细胞上皮分化

doi:10.12307/2022.567

中国组织工程研究 ›› 2022, Vol. 26 ›› Issue (24): 3865-3869.doi: 10.12307/2022.567

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唾液体外诱导促进兔脂肪干细胞上皮分化

李晓文1，2，许颖捷1，2，贾梦莹1，2，史玮1，2，贾馨雨1，2，龚忠诚1，2

1新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院) 颌面肿瘤外科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054；2新疆维吾尔自治区口腔医学研究所，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054

收稿日期:2021-02-27 接受日期:2021-04-10 出版日期:2022-08-28 发布日期:2022-01-22
通讯作者: 龚忠诚，博士，主任医师，博士生导师，硕士生导师，新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院) 颌面肿瘤外科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054；新疆维吾尔自治区口腔医学研究所，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054
作者简介:李晓文，女，1994年生，河北省任县人，汉族，2021年新疆医科大学毕业，硕士，医师，主要从事口腔颌面外科软组织缺损修复基础研究。
基金资助:
自治区研究生科研创新项目(XJ2020G193)，项目负责人：李晓文

Epithelial differentiation of adipose stem cells induced by saliva in vitro

Li Xiaowen1, 2, Xu Yingjie1, 2, Jia Mengying1, 2, Shi Wei1, 2, Jia Xinyu1, 2, Gong Zhongcheng1, 2

1Oncological Department of Oral & Maxillofacial Surgery, First Affiliated Hospital (Affiliated Stomatological Hospital) of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; 2Xinjiang Uyghur Autonomous Region Institute of Stomatology, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Received:2021-02-27 Accepted:2021-04-10 Online:2022-08-28 Published:2022-01-22
Contact: Gong Zhongcheng, MD, Chief physician, Doctoral supervisor, Master’s supervisor, Oncological Department of Oral & Maxillofacial Surgery, First Affiliated Hospital (Affiliated Stomatological Hospital) of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; Xinjiang Uyghur Autonomous Region Institute of Stomatology, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Li Xiaowen, Master, Physician, Oncological Department of Oral & Maxillofacial Surgery, First Affiliated Hospital (Affiliated Stomatological Hospital) of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; Xinjiang Uyghur Autonomous Region Institute of Stomatology, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Supported by:
Autonomous Region Postgraduate Research and Innovation Project, No. XJ2020G193 (to LXW)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
表皮生长因子：是一种多肽类物质，在体内可由多种细胞分泌而产生，大量临床试验及动物实验发现，表皮生长因子在创面修复过程中发挥着非常重要的作用，能够增强细胞角蛋白19的表达，因而表皮生长因子是细胞上皮分化研究中常用的诱导剂。
细胞角蛋白19：近年来，脂肪干细胞向上皮分化的研究逐渐增多，细胞角蛋白19是能够反映细胞上皮分化的标志物之一，许多学者采用细胞角蛋白19的表达来说明细胞的上皮分化，它也成为了上皮分化研究中热门的指标。

背景：颊脂垫常用于修复口腔颌面部缺损，其能使口腔黏膜快速上皮分化。由于缺损创面暴露于唾液中，因而认为唾液可能促进颊脂垫中的脂肪干细胞上皮化。
目的：探讨唾液体外诱导促进兔脂肪干细胞上皮分化的可行性。
方法：取两三个月龄的新西兰大白兔脂肪组织，分离、培养脂肪干细胞并传代。将第3代脂肪干细胞分为3组，即阴性对照组、表皮生长因子组与唾液组，后两组采用10 μg/L表皮生长因子、15%唾液来诱导脂肪干细胞，倒置显微镜观察细胞形态变化，诱导7，14 d采用免疫荧光、RT-PCR检测细胞角蛋白19的表达。
结果与结论：①唾液诱导后脂肪干细胞形态由长梭形逐渐变为短梭形，甚至不规则的扁圆形；②诱导7，14 d，表皮生长因子组、唾液组细胞角蛋白19呈阳性表达，均高于阴性对照组，且诱导14 d细胞角蛋白19的表达量明显高于诱导7 d；③诱导7，14 d，表皮生长因子组、唾液组细胞角蛋白19的mRNA表达量均高于阴性对照组(P < 0.01)，且诱导14 d的表达量要显著高于诱导7 d(P < 0.01)；④结果表明，唾液在一定程度上能促进脂肪干细胞向上皮分化。

https://orcid.org/0000-0002-3010-4017 (龚忠诚)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 干细胞, 脂肪干细胞, 表皮生长因子, 唾液, 上皮, 分化, 细胞角蛋白19

Abstract: BACKGROUND: Buccal fat pads are often used to repair oral and maxillofacial defects, which can rapidly differentiate the oral mucosa from the epithelium. Because the defect wound is exposed to saliva, it is believed that saliva may promote the epithelialization of adipose stem cells in the buccal fat pad.
OBJECTIVE: To investigate the feasibility of promoting epithelial differentiation of rabbit adipose stem cells by induction of saliva in vitro.
METHODS: Fat harvested from 2-3 months New Zealand white rabbit was isolated, cultured, generated adipose stem cells for passage. Passage 3 adipose stem cells were divided into three groups: negative control group, epidermal growth factor group and saliva group. Adipose stem cells were induced by 10 μg/L epidermal growth factor and 15% saliva in the epidermal growth factor group and saliva group. Cell morphology changes were observed under inverted microscope. The expression of cytokeratin 19 was detected by immunofluorescence and RT-PCR after 7 and 14 days of induction.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) After saliva induction, the morphology of adipose stem cells was gradually changed from long spindle shape to short spindle shape or even irregular oblate shape. (2) At 7 and 14 days, cytokeratin 19 was positively expressed in the epidermal growth factor and saliva groups, which was higher than that in the negative control group. The expression level of cytokeratin 19 in the 14-day induction group was significantly higher than that in the 7-day induction group. (3) The expression of cytokeratin 19 mRNA in epidermal growth factor and saliva groups was higher than that in negative control group (P < 0.01). The expression level at 14 days was significantly higher than that at 7 days (P < 0.01). (4) Results suggest that saliva can promote the epithelial differentiation of adipose stem cells to some extent.

Key words: stem cell, adipose stem cell, epidermal growth factor, saliva, epithelium, differentiation, cytokeratin 19

中图分类号:

李晓文, 许颖捷, 贾梦莹, 史玮, 贾馨雨, 龚忠诚. 唾液体外诱导促进兔脂肪干细胞上皮分化[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(24): 3865-3869.

Li Xiaowen, Xu Yingjie, Jia Mengying, Shi Wei, Jia Xinyu, Gong Zhongcheng. Epithelial differentiation of adipose stem cells induced by saliva in vitro[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2022, 26(24): 3865-3869.

图/表（结果） 6

2.1 脂肪干细胞的形态原代细胞接种至培养皿后，可见漂浮的圆形细胞，体型稍大的脂滴，并伴有部分杂质，24 h后细胞形态逐渐发生改变，呈长梭形、三角形及多角形；培养7 d后，皿底细胞基本铺满，此时形态排列较集中，呈鱼群状分布，形态大多数为长梭形。随着细胞的传代，细胞形态分布逐渐规整，见图1。

2.2 不同浓度唾液干预后的细胞形态用48孔板接种第3代脂肪干细胞，分别加入0%，5%，10%，15%，20%，25%，30%唾液，观察细胞形态，见图2，培养4 d后可见15%唾液干预的细胞形态较好，见图2D，而20%唾液干预的细胞死亡增多，见图2E，直到30%时，脂肪干细胞基本脱壁，呈现圆形，见图2G。

在初步预估唾液浓度后，采用15%唾液对脂肪干细胞进行培养，第6天时，发现未加唾液的脂肪干细胞形态大多数为长梭形，而加入15%唾液的脂肪干细胞形态逐渐发生改变，长梭形细胞变短为不规则的扁圆形、三角形形状，见图3。

2.3 CCK-8法检测各组细胞的增殖曲线脂肪干细胞在培养一两天内生长较慢，第3天进入快速增殖期，到第5天达到生长高峰期，表皮生长因子组及唾液组脂肪干细胞增殖能力均高于阴性对照组，此时比较唾液组与阴性对照组的细胞增殖活性，差异无显著性意义(P > 0.05)，说明15%唾液对脂肪干细胞无明显毒性作用，不会抑制该细胞的增殖，见图4。

2.4 各组脂肪干细胞免疫荧光染色诱导7 d后，阴性对照组无荧光表达，表皮生长因子组与唾液组可见绿色荧光，且表皮生长因子组细胞角蛋白19的荧光表达量要高于唾液组。诱导14 d后，阴性对照组可见微弱荧光，表皮生长因子组与唾液组细胞角蛋白19荧光量的表达明显增多，且诱导14 d细胞角蛋白19的表达量明显高于诱导7 d，见图5。

2.5 各组细胞上皮标志物细胞角蛋白19 mRNA的表达诱导7，14 d后，细胞角蛋白19在表皮生长因子组、唾液组均有表达，较阴性对照组显著增高，差异均有显著性意义(P < 0.001)，同时表皮生长因子组与唾液组之间进行比较，差异也有显著性意义(P < 0.001)。除此之外，表皮生长因子与唾液组诱导14 d后，其细胞角蛋白19的表达量要明显高于诱导7 d(P < 0.001)，见表2。

参考文献

[1] KIM YH, KIM GH, KIM SW. Reconstruction of a Complex Scalp Defect after the Failure of Free Flaps: Changing Plans and Strategy. Arch Craniofac Surg. 2017;18(2):112-116.
[2] BORDIANU A, BOBIRCĂ F, PĂTRAŞCU T. Skin Grafting in the Treatment of Diabetic Foot Soft Tissue Defects. Chirurgia (Bucur). 2018;113(5):644-650.
[3] EGYEDI P. Utilization of the buccal fat pad for closure of oro-antral and/or oro-nasal communications. J Maxillofac Surg. 1977;5(4):241-244.
[4] KABLAN F. The use of buccal fat pad free graft in closure of soft-tissue defects and dehiscence in the hard palate. Ann Maxillofac Surg. 2016;6(2):241-245.
[5] 张圣敏,陈刚,王晨星,等.人颊脂垫脂肪干细胞与皮下脂肪干细胞生物学特性的比较[J].中国组织工程研究,2012,16(32):5941-5945.
[6] ZUK PA, ZHU M, ASHJIAN P, et al. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Mol Biol Cell. 2002;13(12):4279-4295.
[7] HATA Y. Do not forget the fundamental merits of microtia repair using a tissue expander. Plast Reconstr Surg. 2002;109(2):819-822.
[8] BAER PC, BEREITER-HAHN J, MISSLER C, et al. Conditioned medium from renal tubular epithelial cells initiates differentiation of human mesenchymal stem cells. Cell Prolif. 2009;42(1):29-37.
[9] CHEN S, WANG M, CHEN X, et al. In Vitro Expression of Cytokeratin 19 in Adipose-Derived Stem Cells Is Induced by Epidermal Growth Factor. Med Sci Monit. 2018;24:4254-4261.
[10] 尹小朋,许慧芬,刘慧,等.带蒂颊脂垫瓣与碘仿纱条在腭裂松弛切口处理中的对比分析[J].中国美容医学,2018,27(7):108-111.
[11] CHAUDHARY B, GONG Z, LIN Z, et al. Reconstruction of intraoral maxillary defect with buccal fat pad. J Craniofac Surg. 2014;25(6):2174-2177.
[12] KANZOW P, WEGEHAUPT FJ, ATTIN T, et al. Etiology and pathogenesis of dental erosion. Quintessence Int. 2016;47(4):275-278.
[13] ZHANG L, HAO L, ZUO W, et al. Preparation and application of polyclonal antibody against Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1. Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 2015;31(8):1120-1123.
[14] 李小英,李倩,崔博淼,等.慢性牙周炎患者唾液诱导巨噬细胞分化和活化的研究[J].华西口腔医学杂志,2018,36(5):50-55.
[15] FUJISAWA K, MIYAMOTO Y, NAGAYAMA M. Basic fibroblast growth factor and epidermal growth factor reverse impaired ulcer healing of the rabbit oral mucosa. J Oral Pathol Med. 2003;32(6):358-366.
[16] AZUMA N, KATADA Y, SANO H. Deterioration in saliva quality in patients with Sjogren’s syndrome: impact of decrease in salivary epidermal growth factor on the severity of intraoral manifestations. Inflamm Regen. 2018;38:6.
[17] INO M, USHIRO K, INO C, et al. Kinetics of epidermal growth factor in saliva. Acta Otolaryngol Suppl. 1993;500:126-130.
[18] THESLEFF I, VIINIKKA L, SAXÉN L, et al. The parotid gland is the main source of human salivary epidermal growth factor. Life Sci. 1988;43(1): 13-18.
[19] INO M, USHIRO K, INO C, et al. Epidermal Growth Factor in Salivary Glands-epidermal Growth Factor and its Receptor in Human Salivary Glands. Jibirinsho.1992;85(5):805-814.
[20] 王程,徐潇,陈冲,等.体外诱导脂肪来源干细胞向黏膜上皮细胞分化的研究[J].解放军医学杂志,2015,40(10):798-802.
[21] 郭凯,罗燕,李涛,等.人脂肪间充质干细胞向视网膜色素上皮样细胞的诱导分化及其在体应用研究[J].中华实验眼科杂志,2015, 33(9):794-797.
[22] MAO Y, MA J, XIA Y, et al. The Overexpression of Epidermal Growth Factor (EGF) in HaCaT Cells Promotes the Proliferation, Migration, Invasion and Transdifferentiation to Epidermal Stem Cell Immunophenotyping of Adipose-Derived Stem Cells (ADSCs). Int J Stem Cells. 2020;13(1):93-103.
[23] 胡亚暖,姚永明,张泽敏,等.不同浓度EGF对兔ADSCs体外诱导分化为表皮细胞的实验研究[J].中国美容医学,2016,25(7):47-50.

引言

材料方法

1.1 设计体外细胞学实验，各组之间比较使用单因素方差分析，两两比较采用LSD检验。
1.2 时间及地点实验于2019年6月至2020年12月在新疆医科大学第一附属医院感染免疫实验室与干细胞研究实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物新西兰大白兔12只，两三个月龄，体质量2.5-3.0 kg，购自新疆医科大学动物实验中心。
1.3.2 实验仪器及试剂超净工作台(AIRTECH，中国)；荧光倒置显微镜、正置显微镜(Leica，德国)；高速低温离心机(Eppendorf，德国)；酶标仪(Thermo，美国)；RNA提取超净台(雷柏特，中国)；水浴锅(精宏，中国)。
DME-F12培养基、胰酶(Hyclone公司，美国)；胎牛血清(Gibico公司，美国)；双抗(Hyclone公司，美国)；表皮生长因子(Abcam，美国)；细胞角蛋白19兔单克隆抗体(Abcam，美国)；山羊抗兔荧光二抗(Abcam，美国)；CCK-8试剂盒(北京博奥森有限公司)；miRNA反转录试剂盒(Thermo，美国)；QuantiNova SYBR Green PCR试剂盒(凯杰，中国)。
1.4 方法

1.4.1 脂肪干细胞的分离、培养及传代取兔腹股沟处新鲜脂肪组织，避免触及筋膜与血管，将取好的组织块放入50 mL离心管中，用含5%双抗的PBS浸泡15 min，弃除废液，无菌PBS清洗3次，随后把脂肪组织吸取至培养皿中，组织剪尽量去尽肉眼可见的筋膜与血管，将其剪碎约1 mm×1 mm×1 mm大小，转移至50 mL离心管，加入等体积的0.1%Ⅰ型胶原酶，摇匀，37 ℃消化50 min，DME-F12培养基终止消化，2 000 r/min，4 ℃，离心5 min，弃上清，留细胞层，DME-F12培养基重悬沉淀，细胞筛过滤至培养皿，放置CO2恒温培养箱中孵育，24 h后注意观察细胞贴壁状态，48 h后换液，以后隔天换液，待细胞融合至80%-90%时开始传代，取第3代兔脂肪干细胞进行后续实验。

1.4.2 唾液的收集及初步浓度测定收集同一人的唾液，要求口内无龋齿、根尖周病、牙周病、黏膜类疾病、残根残冠等，且口腔卫生状况良好者，并无全身系统性疾病及用药史。收集前30 min使用清水漱口，需提前2 h禁食，时间最好为早上8：00-9：00，若无法满足该条件也可在任意时间点，只要收集前完成刷牙漱口便可进行。每次采集的量为5-10 mL不等(具体根据实验需求所定)。采集完成后，4 ℃，
12 000 r/min离心15 min，在超净台中用无菌枪头取上清，并转移至5 mL注射器中，接口接入0.22 μm滤器，过滤至无菌15 mL离心管，再分装至1.5 mL EP管内，-80 ℃冰箱保存。将第3代脂肪干细胞以5×103/孔的密度接种于48孔板，用DME-F12完全培养基配制成不同浓度梯度(0%，5%，10%，15%，20%，25%，30%)的唾液(mL/mL)，依次加入脂肪干细胞中进行培养，通过观察细胞的生长状态，选取合适的唾液浓度来进行诱导。
1.4.3 CCK-8法检测细胞增殖曲线实验设定3组，分别为唾液组、表皮生长因子组、阴性对照组。准备3个96孔板，将第3代脂肪干细胞以1×103/孔的密度接种于96孔板中，3个板分别加入含15%唾液的DME-F12培养基、含10 μg/L表皮生长因子的DME-F12培养基及单纯DME-F12培养基100 μL，每个孔板设定6个复孔，3个孔有细胞，即单纯培养组，另外3个孔不含细胞，即空白对照组。96孔板放入CO2培养箱中，每天分别取1组复孔，用酶标仪测定450 nm处的吸光度值，连续测定7 d，最终绘制生长曲线。
1.4.4 免疫荧光检测细胞角蛋白19的表达将第3代脂肪干细胞以2×103/孔的密度接种于48孔板，分组与CCK-8实验一致。培养7，14 d后，取出培养板，PBS洗3次，每次3 min，40 g/L多聚甲醛固定细胞20 min，PBS洗3次，0.5%Triton-X100室温通透20 min，PBST浸洗3次，每次5 min，清洗完毕后，室温下山羊血清封闭30 min，加稀释好的一抗(1∶100)，4 ℃冰箱过夜；次日，避光操作加入荧光二抗，孵育2 h，PBST继续洗3次，每次5 min，滴加DAPI染色15 min，PBST洗4次，每次5 min，荧光倒置显微镜下采集图像。
1.4.5 RT-PCR检测细胞角蛋白19 mRNA的表达水平将第3代脂肪干细胞以2×104/孔的密度接种于6孔板，分组与CCK-8实验一致。培养7，14 d后，用Trizol提取3组细胞的总RNA，在核酸定量仪下测定总RNA的浓度与纯度，当浓度、纯度均达标后，按照反转录试剂盒说明，反转录为cDNA，采用10 μL体系进行RT-PCR，检测3组细胞角蛋白19 mRNA的表达水平，实验均重复3次。引物序列见表1。

1.5 主要观察指标 ①各组细胞生长曲线；②各组细胞上皮标志物细胞角蛋白19基因、蛋白的表达。
1.6 统计学分析所有数据均采用SPSS 25.0分析，多组之间比较使用单因素方差分析，两两比较采用LSD检验；不同时间点之间比较用t检验，数据以x±s表示，检验水准为ɑ=0.05。

讨论

既往临床研究证实，各类皮肤缺损单纯依靠自身的愈合能力，往往恢复不佳。该研究结果表明，在体外使用唾液诱导脂肪干细胞，可以成功使其向上皮方向分化，这一发现对于今后临床上的皮肤缺损修复具有重要意义。以往未研究过唾液对脂肪干细胞的作用，该研究的主要特点是把唾液当作诱导剂首次诱导脂肪干细胞上皮分化，这一研究思路也是基于作者观察多年的临床病例引发而来。尹小朋等[10]通过带蒂颊脂垫瓣与传统的碘仿纱条填充腭裂松弛切口进行对比分析，发现颊脂垫瓣可显著降低术后不良并发症，加速术区创面愈合。CHAUDHARY等[11]探讨颊脂垫修复各种口腔缺损的效果，如恶性肿瘤术后组织瓣缺损、腭裂等，最终得出用颊脂垫修复口腔内多种缺损是一种有效、安全的方法。有学者在各种外科手术中对脂肪组织进行处理，发现无血供的颊脂垫脂肪组织作为一种自由移植物，在缺损创面中可以很好地存活和愈合[4]。大量研究表明，使用颊脂垫修复缺损创面，可在7 d左右快速发生上皮化，促进黏膜愈合，其中机制尚不明确。此外，作者发现颊脂垫中含有丰富的脂肪干细胞，由于脂肪干细胞具有易分离、免疫原性低并且容易在体外扩增等一系列优点，因此它在基因治疗及组织工程学修复创面中具有良好的应用前景。该实验以脂肪干细胞为研究对象，探索其上皮分化的现象，由于人脂肪干细胞不易取材且涉及伦理问题，兔的生理结构与人相似，因而该实验选用了兔脂肪干细胞作为研究对象。
当颊脂垫用于修复口腔缺损时，可成功覆盖创面伤口并使其上皮分化，对于口腔的微环境来说，唾液是主要成分之一。该研究选择唾液作为诱导剂，在光学显微镜下脂肪干细胞的形态发生了改变，这将有助于后续实验的运行。唾液具有消化食物、润滑、保护及抗菌等多种生理作用，是口腔内唾液腺分泌的混合液[12]，其成分复杂，包含了大量的微生物、蛋白质、小分子物质等[13]。近年来，国内外学者对唾液的研究越来越多[14]，但鲜有使用唾液诱导细胞的相关研究。李小英等[14]发现慢性牙周炎唾液能够诱导巨噬细胞的分化和活化，该实验采取健康志愿者唾液诱导脂肪干细胞分化，通过设定不同的唾液浓度去诱导脂肪干细胞，最终选取15%唾液作为诱导的最佳浓度，CCK-8实验证实该浓度不会抑制脂肪干细胞增殖。有学者发现，表皮生长因子存在于唾液中，它能够促进口腔黏膜伤口的愈合[15]。AZUMA等[16]评估了干燥综合征患者唾液中表皮生长因子的水平变化，认为表皮生长因子是一种重要的细胞保护因子。口腔内表皮生长因子的主要来源是腮腺，除此之外也能从颌下腺、舌下腺或小唾液腺分泌而来[17-19]。为了能直观阐明这种现象，该研究首先使用免疫荧光检测细胞角蛋白19这一上皮标志物的表达，结果表明，唾液组细胞角蛋白19呈阳性表达，明显多于阴性对照组，且随着诱导时间增加，细胞角蛋白19的表达量也会明显增加。除此之外，在诱导14 d后，阴性对照组也伴有少量绿色荧光表达，具体原因尚不清楚，作者考虑因脂肪干细胞自身具有旁分泌作用，可能会分泌一些因子促进上皮愈合，其机制尚待研究。
近年来对脂肪干细胞向上皮分化的体外研究逐渐增多，诱导脂肪干细胞向上皮分化的方法有许多，如化学试剂诱导、生物共培养等。该研究采用表皮生长因子作为阳性对照组的诱导剂，与其他学者将脂肪干细胞向上皮分化的诱导方法一致[20-22]。有学者使用表皮生长因子诱导脂肪干细胞上皮分化，发现表皮生长因子会明显增强细胞角蛋白19的表达[8]。与此同时，表皮生长因子还参与诱导皮肤干细胞增殖分化，加速表皮的再生[23]。该实验选择表皮生长因子诱导脂肪干细胞，与阴性对照组、唾液组进行对比。RT-PCR结果可见，唾液组的细胞角蛋白19 mRNA表达较阴性对照组增高，但是与表皮生长因子组还存在差异，对于此现象，作者推测唾液这一混合物中含有互相干扰成分，会使其无法达到单纯表皮生长因子诱导脂肪干细胞上皮分化的效果。
综上所述，唾液能够一定程度促进脂肪干细胞上皮分化，这些结果将有助于为后期各类皮肤缺损的临床问题开辟新的道路。该研究并未探索唾液中具体哪种因子起到促进作用，其机制还需未来进一步研究。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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[1]	朱婵, 韩栩珂, 姚承佼, 周倩, 张强, 陈秋. 人体唾液成分与骨质疏松/骨量低下[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(9): 1439-1444.
[2]	王景, 熊山, 曹金, 冯林伟, 王信. 白细胞介素3在骨代谢中的作用及机制[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(8): 1260-1265.
[3]	肖豪, 刘静, 周君. 脉冲电磁场治疗绝经后骨质疏松症的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(8): 1266-1271.
[4]	安维政, 何萧, 任帅, 刘建宇. 肌源干细胞在周围神经再生中的潜力[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1130-1136.
[5]	范一鸣, 刘方煜, 张洪宇, 李帅, 王岩松. 脊髓损伤后室管膜区内源性神经干细胞反应的系列问题[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1137-1142.
[6]	闻丹丹, 李强, 沈才齐, 纪哲, 金培生. 外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架提高脂肪间充质干细胞活性修复糖尿病创面[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1038-1044.
[7]	朱兵兵, 邓江华, 陈晶晶, 慕晓玲. 白细胞介素8受体可提高脐带间充质干细胞迁移和向损伤内皮的黏附[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1045-1050.
[8]	罗小玲, 张丽, 杨茂桦, 徐洁, 徐晓梅. 柚皮素干预人牙周膜干细胞的成骨分化能力[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1051-1056.
[9]	熊挺淋, 应梦慧, 张丽莎, 张晓刚, 杨燕. 诱导多能干细胞分化的心肌细胞电生理特点[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1063-1067.
[10]	王新民, 刘飞, 许杰, 白玉玺, 吕剑. 髓芯减压联合牙髓干细胞治疗兔早期激素性股骨头坏死[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1074-1079.
[11]	房晓磊, 冷军, 张晨, 刘会敏, 郭文. 间充质干细胞不同移植途径治疗缺血性脑卒中疗效差异的系统评价[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1085-1092.
[12]	郭嘉, 丁琼桦, 刘泽, 吕思懿, 周泉程, 高玉花, 白春雨. 间充质干细胞来源外泌体的生物学特性及免疫调控作用[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1093-1101.
[13]	张璟琳, 冷敏, 朱博恒, 汪虹. 干细胞源外泌体促进糖尿病创面愈合的机制及应用[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1113-1118.
[14]	黄晨玮, 费彦亢, 朱梦梅, 李鹏昊, 于兵. 谷胱甘肽在干细胞“干性”及调控中的重要作用[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1119-1124.
[15]	惠小珊, 白京, 周思远, 王阶, 张金生, 何庆勇, 孟培培. 中医药调控干细胞诱导分化的理论机制[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(7): 1125-1129.